显微镜油浸系的使用方法与操作步骤及日常维护与保养!
一、目的要求
1、正确掌握使用及护理显微镜的方法,特别是油浸系的使用及护理。
2、认识细菌的基本形态和构造。
二、操作步骤
1、普通光学显微镜的构造
普通光学显微镜包括机械部分和光学部分两部分。机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、粗调节螺旋、细调节螺旋、标本夹等。光学部分包括接目镜、接物镜、反光镜、光圈(虹采)、聚光镜(集光器)等。
2、油浸系的原理
浸系是在油浸镜与标本之间加1滴香柏油,调整光源检查细菌标本的方法。油浸镜是一种高倍放大的物镜,一般都刻有放大倍数,如95x、100x等。其镜头标记国产镜多用“油”字表示,国外产品则用“Oil”(Oil Immersion)或HI(homogeneous Immersion)表示。而且油镜的镜身较高倍镜和低倍镜为长,镜片最小,这也是识别的另一种标志。其使用原理是:由于香柏油与玻璃的折光率相似(香柏油为1.515,玻璃为1.52)。镜检时,滴加香柏油的作用是使光源尽可能多的进入物镜中,避免光线通过折光率低的空气(折光率为1.0)而散失,因而能提高物镜的分辨率,使物像明亮清晰。
3、使用方法
镜检者需姿势端正,一般用左眼观察,右眼用于绘图和记录,两眼同时睁开,以减少疲劳。光源用自然光线或人工光源,注意避开直射日光。用人工光源时,为了避免赤黄光线,需在集光镜下装入蓝色滤光片。
三、显微镜油浸系的原理
1、对光
将光圈完全开放,升高聚光镜与载物台同高,置标本片于载物台上,在低倍镜下对光,用手转动反光镜以调节之,至视野最亮时为止。若用天然光源宜用反光镜平面,较弱光源用凹面。检查未染色标本,光不宜太强,染色标本需强光。光线强弱可通过放大或缩小光圈、升降聚光镜、旋转反光镜调节之。
2、加油
将标本放在载物台上,染色部位正对集光器的中央,用标本夹固定好,滴加香柏油1滴,用油浸镜检查,使油镜头浸入油滴中,几乎与标本面接触为度,然后由接目镜注视镜内,同时慢慢转动粗调节螺旋提起镜筒(绝对不能下降镜筒!)至能模糊看到物像时,再转动细螺旋(细螺旋转动一般不超过一周),直至物像清晰为止。
四、显微镜的保护
1、从镜箱内取显微镜时,应以右手持镜臂以水平方向慢慢抽出,不得碰镜,再以左手托镜座,保持镜体平行,以防反光镜及接目镜滑落。
2、显微镜各镜头绝对不可用手指拭抹,应用擦镜纸或用绸布轻拭之。油镜用过后,立即用擦镜纸拭之,若油渍已干,则需用擦镜纸蘸二甲苯拭之,然后用干燥镜纸轻拭之。镜体可用软布轻拭,以保持清洁。
3、用过后应将显微镜各部复位,尤其注意不要让接物镜对集光器,同时把集光器下降,以免发生碰撞,然后置镜箱内锁好。
4、注意防潮,勿靠近热源及有腐蚀性的化学药品。显微镜各零件不要任意拆卸,尤其是光学部分,以免损坏。
五、细菌正常形态的观察
练习显微镜油浸系的使用,观察已制好的细菌染色标本,如葡萄球菌、链球菌、四联球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、螺旋状菌及细菌的荚膜、芽胞和鞭毛,并进行绘图。
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