啮齿粪杆菌的培养方法与活化操作步骤及注意事项！

                  啮齿粪杆菌的培养方法与活化操作步骤及注意事项！

一、菌种简介

平台编号：Bio-137370

规格：冻干粉/培养物

拉丁属名：Faecalibaculum Rodentium

菌株名称：啮齿粪杆菌

其他编号：=KCTC15484

生长条件：37°C；3-7天；严格厌氧（改良PYG培养基或哥伦比亚血平板）

存储条件：2-8℃

安全等级：1

形态：G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯

分离基物：faeces, female C57BL/6 J mouse

模式菌株：yes

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

改良PYG培养基（英文名：PYG MEDIUM (modified)）：胰酪蛋白胨 5.0g，蛋白胨 5.0g，酵母提取物10.0g，牛肉提取物5.0g，葡萄糖5.0g，磷酸氢二钾 2.0g，吐温80 1.0ml，CaCl2·2H2O 0.01g，MgSO4·7H2O 0.02g，磷酸氢二钾 0.04g，磷酸二氢钾0.04g，碳酸氢钠 0.4g，氯化钠0.08g，刃天青1.0mg，蒸馏水 1.0L，pH7.2±0.2（25℃）。加热煮沸（建议持续沸腾3-5分钟），CO2环境下冷却，每100ml添加0.5mg氯化血红素、0.1mg维生素K1和0.05g半胱氨酸盐酸盐，N2环境下分装试管，121℃灭菌15分钟，备用。

三、实验操作步骤

①准备 1 支φ18mm 试管液体培养基，约 10mL（提前置于厌氧环境除氧 24h）；

②在厌氧环境下，用移液枪或吸管吸取0.5-1mL菌液转接到新的液体培养基中；

③将液体试管置于上述培养条件下培养，菌液浑浊即可使用。

四、菌株活化步骤

冻干粉活化，将菌粉甩至底部，将尖头一侧用酒精消毒后敲开，取0.2-0.3ml溶解液加入至菌种管中，轻轻弹至菌粉混合均匀，用无菌吸头全部吸出溶解液，全部接种至2支斜面上培养。注意真空菌种管一旦敲开里面的冻干粉就必须全部被用掉，留着也没用。如果有不明白之处，应先与我司联系，避免不必要的损失。

五、培养注意事项

1、微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

2、菌种操作在无菌条件下进行，接种完毕应该灭菌再做丢弃处理；

3、斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月，应根据菌种状况及时结转；冻干粉保存时间通常是 2-25 年；甘油菌保存时间为 2-5 年;

4、冻干首-次活化,干粉要全部用完，不能保留。用0.2-0.5m1的培养液或者无菌水溶解,接种在1-2个平板上，因冻干菌种处于休眠状态,请勿接种多个平板，以免因接种量不足而导致复苏不成功。

5、如果有不明白之处，应先与我中心联系，避免不必要的损失。

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