制备培养基时不同浸粉应该如何选择?
百欧博伟生物:浸粉是将植物或动物组织切开,去除杂质,洗干净后,加适量纯化水后放置2℃~10℃浸泡,然后加热或煮沸适当时长,调整pH值,过滤,喷雾干燥而成。浸出粉中富含生长促进因子、维生素或高碳水化合物,能促进微生物快速生长发育。在微生物培养基中使用很广泛,是一类非常重要的原材料。本节浸粉类原材料的制法、规格标准和微生物限度指标参考国内外主要原材料生产厂家的参数,汇总而成。
一、豌豆浸粉(Peas infusion powder)
1、制法:取豌豆粉50g、氯化钠100g,加入纯化水1000mL,置100℃水浴中煮沸1h~2h,放置2℃~8℃浸泡12h~24h,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮4%~5%,氨基氮≥2%,硫酸灰分<35%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)6.5~7.5。比较适合用于配制血琼脂、巧克力琼脂等。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
二、玉米浸粉(Corn infusion powder)
1、制法:取玉米粉50g,加人纯化水1000mL,置65℃水浴中保持1h~2h,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮1%~2.0%,氨基氮0.3%~0.6%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)6.0~7.0。比较适合于白色念珠菌、假丝酵母菌等真菌增菌培养或产芽管试验
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
三、土豆浸粉(马铃薯浸粉)(Potato extract powder)
1、制法:取去皮土豆500g,切碎后加入1000mL纯化水,煮沸30min~60min,补水,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准;总氮4%~5%,氨基氮≥2%,硫酸灰分<35%,水分含量≤6%, pH值(2%溶液)5.0~7.0,碳水化合物含量高,比较适用于真菌的培养。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
四、麦芽浸粉(Malt Infusion powder)
1、制法:取麦芽浸粉15g,加入纯化水1000mL,置60℃~70℃水浴中保持1h~2h,过滤,调节pH值4.6~5.0,喷雾干燥而成。
2、规格标准;总氮0.8%~1.1%,氨基氮0.3%~0.6%,麦芽糖≥70%,硫酸灰分≤3.5%,水分含量≤6%,pH值(1.5%溶液)6.0~7.0。麦芽糖含量高,比较适用于培养真菌和酵母菌。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
4、说明:麦芽粉的制备流程:用颗粒饱满的大麦粒,置温水中浸透,放入20℃~30℃温暖处,待发出的麦芽2cm~3cm时,沥去水,使其自然干燥或风干,然后将其碾磨或粉碎成粉末。
五、牛肉浸粉(Beef Extract powder)
1、制法:取经过剔除脂肪和筋膜的新鲜牛肉500g,切成小块,用绞肉机绞碎。置适当容器内,加入1000mL纯化水,搅匀,放置2℃~10℃浸泡12h~16h,取出先加热至70℃~80℃保温约30min,再加热至沸腾,约1h~2h,煮沸时不停搅拌,并可加入适量1N氢氧化钠溶液约10mL~15mL。调节pH值8.0~8.2,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮11.5%~12.5%,氨基氮3%~4%,硫酸灰分≤15%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)6.5~7.5。含有多种氨基酸、氮源和部分生长促进因子,比较适合于一般的细菌培养。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
4、说明:低温浸泡和先用低温加热均为使牛肉内所含营养物质尽量浸出。其浸出物约为原肌肉的2%,内有含氮物质,如肌酸、黄嘌呤、次黄嘌呤﹑尿酸、腺苷酸、肌肽、肉毒硷、甘氨酸、脲、谷氨酰胺、丙氨酸等。非含氮物质,如葡萄糖、乳酸、琥珀酸、脂肪、肌醇、磷酸乙糖和各种无机盐等。此外还可含有硫胺素、核黄素、泛酸、尼克酸、生物素、吡哆醇、叶酸、对氨基苯甲酸等维生素。
六、牛心浸粉(Beef Heart Infusion)
1、制法:取新鲜牛心500g,去除脂肪、肌腱、血管,切碎﹐加入纯化水1000mL,放置2℃~8℃ ,浸泡20h~24h,取出50℃水浴保持1h,然后加热煮沸30min,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮≥12%,氨基氮≤3%,硫酸灰分≤12%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)6,5~7.5。含有多种生长促进因子,比较适合于营养要求高的微生物培养;
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
4、说明:牛心浸粉中含有丰富的促进细菌生长发育物质,而且还具有中和蛋白胨和琼脂含有的某些阻碍细菌生长发育的物质。其含肝糖原少,细菌生长发育适度,并可以防止细菌向粗糙型变异。牛心浸粉配制的培养基在保持细菌毒力和毒性作用、荚膜的产生及菌落的大小等方面明显优于牛肉浸粉。
七、脑心浸粉( Beef Brain Heart infusion)
1、制法:取新鲜牛心500g,牛脑400g,去除脂肪、肌腱、血管,切碎,加入纯化水1000mL,放置2℃~8℃,浸泡20h~24h,取出50℃水浴保持1h,然后加热煮沸30min,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮≥12%,氨基氮≤3%,硫酸灰分≤12%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)6.5~7.5。(含有多种生长促进因子,比较适合于营养要求高的微生物培养,例支原体﹑链球菌等的培养。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出。菌落总数≤5000CFU/g。
八、牛肝浸粉( Beef Liver Infusion)
1、制法:新鲜牛肝 500g,去除脂肪、包膜、胆管,切碎,加人纯化水1000mL,放置2℃~8℃,浸泡20h~24h,取出,50℃水浴保持1h,然后加热煮沸30min,过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮≥11%,氨基氮≤3%,硫酸灰分≤18%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)6.0~7.0。富含糖原、维生素和氨基酸,有利于细菌的生长增殖。具有还原作用,可使培养基的氧化还原电位下降,有利于厌氧细菌的生长。常作为一些难生长细菌的生长促进剂使用。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
九、猪胃消化粉(Stomach digestive powder)
1、制法:取新鲜猪胃350g,盐酸8.5ml,加入纯化水1000mL,保持消化液51℃~55℃,消化18h~24h,在消化过程的前12h至少搅拌6~10次,然后静置。以胃组织溶解,液体澄清,为消化完全,如消化不完全,可酌情延长消化时间。过滤,喷雾干燥而成。
2、规格标准:总氮≥12%,氨基氮≥2.0%,硫酸灰分≤25%,水分含量≤6%,pH值(2%溶液)5.5~7.5。(大相对分子质量多肽含量高,比较适合于丹毒杆菌和巴氏杆菌的培养。
3、微生物限度指标:致病菌不得检出,芽孢杆菌不得检出,菌落总数≤5000CFU/g。
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