供货周期: | 现货 |
品牌: | 百欧博伟生物 |
规格: | 5×10?cells/T25培养瓶 |
货号: | bio-72958 |
CAS号: |
A549人非小细胞肺癌细胞使用说明书!
一、细胞简介
平台编号:bio-72958
规格:5×10?cells/T25培养瓶
拉丁属名:A549
细胞名称:A549(人非小细胞肺癌细胞)
种属:人
年龄(性别):男;58岁
组织来源:肺癌
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
背景描述:A549细胞是由D·J·Griad通过肺癌组织移植培养建系,源自于一位58岁白人男性;A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
生长培养基:Ham's F-12K(货号:PM150910)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120)
推荐传代比例:1:3-1:4
推荐换液频率:2~3次/周
倍增时间:~22 hours
冻存条件:冻存液:55% 培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
抗原表达情况:The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.
保藏机构:ATCC; CCL-185 ATCC; CRM-CCL-185 ATCC; CRL-7909 BCRC; 60074 BCRJ; 0033 DSMZ; ACC-107 ECACC; 86012804
说明书下载:A549.pdf
二、细胞传代
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代,一般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入3-5 ml PBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为z佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
三、细胞保存
冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO
(备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),用4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)
保存条件:液氮存储
四、供应限制:仅供研究之用。
五、常见问题及解决方案
1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)
3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
中国微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
相关产品
单孢共头霉原变种
Thamnostylum Repens
Zychaea Mexicana
Piptocephalis Cylindrospora
Piptocephalis Indica
Piptocephalis Repens
Companilactobacillus nodensis
Companilactobacillus nantensis
Companilactobacillus mishanensis
Companilactobacillus mindensis
Companilactobacillus metriopterae
Companilactobacillus kimchiensis
Companilactobacillus kedongensis
Companilactobacillus jidongensis
Companilactobacillus hulinensis
关注
拨打电话
留言咨询