土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒 微量法

参考价:¥840
供货周期: 一周
品牌: 博尔森
规格: 100T/48S
货号: BES-2254BTK
CAS号:
上海博尔森生物科技有限公司
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产品详情

土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒说明书

微量法

注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。

规格:100T/48S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

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溶液的配制:

1、 试剂一:自备甲苯;

2、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 2.7 mL 蒸馏水,充分溶解待用,用不完的试剂 2-8℃保存 4 周;

3、 试剂四:临用前将 A 液和 B 液按体积比 1:4 混合待用;用多少配多少;

4、 试剂五:液体置于试剂瓶内 EP 管中,使用前需先离心。临用前加入 5.7 mL 蒸馏水,混匀,待用;用不完的试剂 2-8℃保存两周;

5、 标准品:1 mg/mL 氮标准液。

产品说明:

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注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

操作步骤:

一、 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。

二、 测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 630nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2、培养

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3、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。若最终计算得到的ΔA仍大于1则继续稀释。

4、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0(空白管)μg/mL,可参考下表。

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备注:实验中每个标准管需 120μL 标准液。

5、测氨量(在微量玻璃比色皿或96孔板中加入下列试剂)

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充分混匀,微量玻璃比色皿需要用蒸馏水调零,96 孔板不需要调零,于 630nm 处读取吸光值 A,分别记为 A测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算 ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管,每个测定管设一个对照管。标准曲线和空白管只需测 1-2 次。

三、S-UE活力计算

1、标曲绘制

标准曲线的建立:根据标准管的浓度(x,μmol/L)和吸光度 ΔA 标准(y,ΔA 标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将 ΔA 测定(y,ΔA 测定)带入公式计算样本浓度(x,μmol/L)。

2、S-UE活力计算

单位的定义:每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。

S-UE活力(U/g 土样)=x×10×V反总÷W÷T=60×x

10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V反总:反应体系总体积,0.3mL;W:样本质量,0.05g。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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