供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 100T/48S |
货号: | BES-2291BTK |
CAS号: |
蔗糖合成酶(SS)活性检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/48S
产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
试剂二:临用前加 1 mL 水,配制成 10 mg/mL 蔗糖溶液,再将其用蒸馏水稀释为 500μg/mL 备用。
产品说明:
蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。SS(EC 2.4.1.13)催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。
SS 催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定(在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂):
混匀,80℃水浴保温 20min,冷却后,吸取 200μL 于微量玻璃比色皿或者 96 孔板中,在 480nm 下测定各管吸光值(标准管和空白管只做 1-2 管,每个测定管需要设定一个对照管)。计算 ΔA 测=A 测定管-A 对照管,ΔA 标=A 标准管-A 空白管。
三、SS 活力单位的计算
注意事项:
尽量在30min内完成测定
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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