供货周期: | 现货 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 0.1ml |
货号: | BES26043C |
CAS号: |
GelStain Red 核酸染料 (10000×)
GelStain Red (10000×,in water)
产品规格:0.1ml、0.5ml
保存条件: 室温避光干燥可保存 12 个月。
GelStain Red 核酸染料特点
1. 安全无毒:独特油性大分子使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏实验表明,该染料的诱变性远远小于 EB。
2. 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色。
3. 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
4. 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
5. 操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需 30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
6. 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
7. 完美兼容:与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或SYBR 滤光片都适用,使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可。
操作步骤:
一.胶染法(推荐方法,用法类似 EB)
制胶时加入 10000X GelStain Red 核酸染料(染料灵敏,每 50mL 琼脂糖溶液中加入 5μL 10000X GelStain Red 原装液即可)。 按照常规方法电泳。
*注:此方法染色染料用量相对较少。染料加入胶中可直接使用微波炉加热,制好的胶溶液可以在室温下保存直至用完。
二.泡染法
(1)按照常规方法进行电泳。
(2)用 H2O 将 10000X GelStain Red 储液稀释约 3,300 倍到 0.1M NaCl 中,制成 3×染色液。(例如将 15μL 10000X GelStain Red 储液和 5mL 1M NaCl 加到 45mL H2O 中)。
(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的 3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色 30min 左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含 3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于 30min 到 1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
*注意事项:用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用 3 次左右;3× GelStain Red 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
优化电泳条件参考事项:
更换电泳缓冲液:新配置的电泳液效果好,TBE 缓冲液比 TAE 缓冲液的效果更好。
降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;降低电压延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
染料过于灵敏,建议 marker 浓度稀释一倍,特别是含大片段多的 marker。
推荐的泳道和已知浓度的样品的上样量为 50-200ng/泳道,对于未知浓度的样品,尝试1/2 或 1/3 的常用上样量。
染料过于灵敏,建议未知浓度的样品的稀释一倍后上样,特别是含大片段多的样品。
如果总是看到条带弥散或分离不理想,为了避免染料可能对 DNA 迁移的干扰,建议使用电泳后染胶。使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关;如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关!
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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