方案摘要
方案下载| 应用领域 | 食品/农产品 |
| 检测样本 | 其他食品 |
| 检测项目 | 营养成分>维生素D |
| 参考标准 | 参考GB 5009.296-2023第二法 |
维生素是调节人体各种新陈代谢过程中必不可少的重要营养素之一，它们一般在人体内不能合成或合成数量少，满足不了人体的需要，必须依靠从食物中摄取，因此，维生素作为强化剂已经在食品工业的部分产品中开始使用，测定食品中维生素的含量，不仅可以评价食品的营养价值，而且还可以监督维生素作为营养强化剂的剂量，以防止摄入量过多引起中毒反应。
前言
维生素是调节人体各种新陈代谢过程中必不可少的重要营养素之一，它们一般在人体内不能合成或合成数量少，满足不了人体的需要，必须依靠从食物中摄取，因此，维生素作为强化剂已经在食品工业的部分产品中开始使用，测定食品中维生素的含量，不仅可以评价食品的营养价值，而且还可以监督维生素作为营养强化剂的剂量，以防止摄入量过多引起中毒反应。
维生素D作为促进人体骨骼生长与发育的重要营养素，它的缺失会导致软骨病，但是过量服用维生素D也会导致眼睛发炎、皮肤瘙痒、厌食、恶心、呕吐、肌肉疼痛乏力等症状，因此准确测定食品中维生素D的含量对于产品质量控制具有重要的意义。
2023年9月，GB 5009. 296-2023《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》正式颁布，该标准代替GB 5009.82-2016《食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》中第三法“食品中维生素D的测定液相色谱串联质谱法”和第四法“食品中维生素D的测定高效液相色谱法”，其中最大的变化就是增加了在线柱切换反相液相色谱法，这使得维生素D的检测效率得到了显著的提高。
面对新标准的即将实施，科诺美的技术应用团队制定了符合标准要求的解决方案。本方案采用Chromai Lotus C8作为一维色谱柱，Lotus PAH作为二维色谱柱，基于Chromai Leaps双三元二维液相色谱平台，实现了食品中维生素D2和D3的有效分离，建立了在线柱切换-反相液相色谱测定食品中维生素D的方法，并通过实际样品的测试，确认该方法稳定可靠。
标准曲线的测定
将不同浓度的标准系列工作溶液分别进样100 μL，得到维生素D2和维生素D3标准曲线（图2）。在2.5 -100 μg/L浓度范围内，维生素D2和维生素D3线性良好，线性相关系数均大于0.999。
图2 维生素D2和维生素D3标准曲线图
图3 维生素D2和维生素D3标准溶液（2.5 ng/mL）二维液相色谱图
实际样品测
参考GB 5009.296-2023第二法，对某婴儿配方奶粉样品经皂化、液液萃取等前处理操作后，获得的样品溶液后上机分析，计算得到样品含量结果见表1。
表1 某婴儿配方奶粉实际样品测定数据
样品 名称 | 取样量 g | 定容体积mL | 测定浓度μg/L | 样品 含量μg/100g | 产品标示量μg/100g |
样品1 | 0.5537 | 5 | 14.462 | 13.06 | 12.90 |
样品2 | 0.5526 | 5 | 15.195 | 13.75 | 12.90 |
图4 实际样品色谱图
本方案应用科诺美自主研发的Leaps双三元二维液相色谱系统，参考GB 5009.296-2023第二法在线柱切换-反相液相色谱法，不仅简化了样本前处理过程，检测效率也提高一倍。设备采用模块式组装，仅通过一个双三元泵就即可以实现二维液相操作，解决了设备占据空间大、操作不便的问题，推荐为食品中维生素D测定的首选配置。
对于需要一次进样实现样品中维生素A、维生素D及四种维生素E异构体的同时测定分析，科诺美也可以提供在线前处理—二维液相色谱的完整解决方案。该方案灵敏度高、专属性强，可以有效去除样品中的杂质对维生素A、D、E的分析干扰。
精准助力药物分析
超高效液相色谱解决方案
科诺美目前已经推出了多款液相色谱系统，包括超高效液相、二维液相、生物惰性液相、制备液相等等，产品线全面，覆盖客户各种应用场景，满足多种使用需求。
文献贡献者
文献解读 | 评估维生素D与冠心病、中风和全因死亡率的剂量-反应关系：观察性研究和孟德尔随机化研究分析
色谱法测定动物组织中瘦肉精的含量
二维液相色谱法测定血清中抗真菌药物伏立康唑的案例分享（治疗药物监测/TDM）
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