细胞增殖是生命重要的活动。细胞增殖的过程中,DNA会进行复制,因此可以通过检测DNA复制来检测细胞增殖的情况。通过检测DNA复制来判断细胞增殖的方法主要有2种,分别是Brdu法和EDU法。
菲恩生物FN-Click EdU细胞增殖检测试剂盒在Brdu法基础上进行换代升级,帮助您更快,更好,更准确检测到单一细胞的增殖。
Brdu法和EDU法比较 | ||
BrdU | EDU | |
检测分子 | 大 | 很小 |
检测方式 | 免疫反应 | 化学反应 |
是否影响其他标记 | 是 | 否 |
DNA变性 | 变性 | 不变性 |
实验时间 | 长 | 短 |
灵敏度 | 一般 | 灵敏 |
是否高通量 | 否 | 是 |
一、原理简介
EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名5-乙炔基-2-脱氧尿苷,是胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸腺嘧啶脱氧核苷掺入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针,通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction)。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,从而可以使用适当的荧光检测设备检测到增殖的细胞。
二、产品优势
BrdU和EDU试剂盒都可以精准的检测到单一细胞的增殖。与BrdU检测方法相比, EdU试剂盒优势如下:
1.反应迅速:无需复杂抗体反应,2.5小时内完成检测。
2.检测灵敏:能精准捕捉单个增殖细胞。
3.操作简便:试剂盒配套完善,使用便捷。
4.结果精准:小分子易扩散,无需DNA变性,保持细胞核清晰完整。
5.兼容性强:可与其他抗体或荧光蛋白共染,实现多参数检测。
三、实验过程
EDU实验可以分为做荧光成像实验和流式实验,依据具体的实验情况选择实验方法。
EDU荧光成像流程如下:
EDU流式实验流程如下:
四、菲恩生物 FN-Click EdU试剂盒结果展示
1.用于流式检测的试剂盒
Test:HL-60 cells were treated with 10 μM EDU for 4 hours.
Negative:HL-60 cells without EDU.
2.用于荧光成像的试剂盒
Test:Hela cells were treated with 10 μM EDU for 3 hours.
Negative:Hela cells without EDU.
五、常见问题与建议
1.整个细胞都有EdU信号或背景信号很强:
可能原因:染色后洗涤不充分,导致非特异性染色。
建议:在染色后,务必充分洗涤细胞,以去除未结合的EdU和荧光染料,减少背景信号。
2.无阳性信号:
可能原因:EdU浓度过低或孵育时间不足,导致细胞摄取的EdU量不足以形成可检测的荧光信号。
建议:增加EdU浓度或延长孵育时间,确保细胞摄取足够的EdU。此外,不同的细胞类型可能需要不同的孵育时间,应根据细胞类型进行调整。
3.信号不均匀或局部过强:
可能原因:细胞分布不均匀或染色过程中存在局部浓度差异。
建议:在铺板时确保细胞分布均匀,避免细胞过密或过疏。同时,在染色过程中注意操作的一致性,避免局部浓度过高或过低。
菲恩生物EDU细胞增殖相关ELISA试剂盒检测工具
货号 | 产品名称 | 规格 | 应用 |
FNCK112 | FN-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(红色,FineTest®647) | 50T/200T | 细胞增殖 |
FNCK111 | FN-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(红色,FineTest®594) | 50T/200T | 细胞增殖 |
FNCK110 | FN-Click EdU细胞增殖成像检测试剂盒(绿色,FineTest®488) | 50T/200T | 细胞增殖 |
FNCK108 | FN-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒(红色,FineTest®647) | 50T/200T | 细胞增殖 |
FNCK107 | FN-Click EdU细胞增殖流式检测试剂盒(绿色,FineTest®488) | 50T/200T | 细胞增殖 |
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