| 供货周期： | 14天 |
| 品牌： | 雅吉生物 |
| 规格： | 1盒 |
| 型号： | 50次/盒 |
| 货号： | 1443900 |
| 有效期： | 12月 |
| 标准值： | 详见说明 |
本产品仅供科研
更多产品详细信息可免费向客服索取
产品名称：枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Dicrocoelium dentriticum
本产品是以染料法荧光定量PCR技术为基础开发的PCR试剂盒，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。
2.引物等组分经过优化，灵敏度高。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他的DNA/RNA发生交叉反应。
5.既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6.本产品足够50次20μL体系的染料法荧光定量PCR反应。
包装规格及成分（具体信息详见说明书）：
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | |
| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | |
| 引物混合液 | 100 μL（白盖） | |
| 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | |
| 使用手册 | 1 份 |
枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒操作过程：
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。
1、液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
2、固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
3、粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
4、其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
三、数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm，最大发射光谱在 530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。
四、数据处理：
14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。
15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于40则为阴性，如果小于40，则为阳性。
枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。阳性对照需单独放置，不要污染其他试剂。
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
4、自备试剂：样品DNA。
盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 92℃ | 5 分钟 |
PCR反应30个循环
| 94℃ | 60秒 |
50℃ | 60秒 | |
72℃ | 60秒 |
枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒注意事项
1操作严格按照说明书进行；
2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3反应液应避光保存；
4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒相关产品如下
| Sinorhizobium spp.中华根瘤菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444800 | 50次 | 2990 |
| Trichinella spiralis旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444760 | 50次 | 2990 |
| Trichinella pseudospiralis伪旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444750 | 50次 | 2990 |
| Trichinella papuae巴布亚旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444740 | 50次 | 2990 |
| Trichinella nativa乡土旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444730 | 50次 | 2990 |
| Trichinella murrelli米氏旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444720 | 50次 | 2990 |
| Trichinella britovi布氏旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444710 | 50次 | 2990 |
| Trichinella spp.旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444700 | 50次 | 2990 |
| Epidermophyton floccosum絮状表皮癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444600 | 50次 | 2990 |
| Trichophyton rubrum红色毛癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444520 | 50次 | 2990 |
| Trichophyton mentagrophytes须毛癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444510 | 50次 | 2990 |
| Trichophyton spp.毛癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444500 | 50次 | 2990 |
| Bear Canyon virus(BCNV)熊峡谷病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1444400 | 50次 | 3490 |
| Campylobacter sputorum唾液弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444340 | 50次 | 2990 |
| Campylobacter jejuni空肠弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444330 | 50次 | 2990 |
| Campylobacter fetus subsp. Venerealis胎儿弯曲杆菌性病亚种染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444320 | 50次 | 2990 |
| Campylobacter coli大肠弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444310 | 50次 | 2990 |
| Campylobacter spp.弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444300 | 50次 | 2990 |
| Duck Hepatitis B Virus(DHBV)鸭乙型肝炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444200 | 50次 | 2990 |
| Strongylus vulgaris 寻常圆线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444100 | 50次 | 2990 |
| Bovine Parvovirus (BPV)牛细小病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1444000 | 50次 | 2990 |
| Dicrocoelium dentriticum枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443900 | 50次 | 2990 |
| Boheliridovirus(BIV)饰纹汀蛙虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443800 | 50次 | 2990 |
| Saprolegnia parasitica寄生水霉染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443700 | 50次 | 2990 |
| Border Disease Virus(BDV)羊边界病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1443600 | 50次 | 3490 |
| Peptostreptococcus anaerobius厌氧消化链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443510 | 50次 | 2990 |
| Peptostreptococcus spp.消化链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443500 | 50次 | 2990 |
| Haplosporidium nelsoni尼氏单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443420 | 50次 | 2990 |
| Haplosporidium costale沿岸单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443410 | 50次 | 2990 |
| Haplosporidium spp.单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443400 | 50次 | 2990 |
| Subulura brumpti布氏锥尾线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443300 | 50次 | 2990 |
| Avian Pneumovirus(APV)禽肺病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1443210 | 50次 | 3490 |
| Turkey Enteritis Coronavirus (TCoV)火鸡肠炎冠状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1443200 | 50次 | 3490 |
| Photobacterium damselae美人鱼发光杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443100 | 50次 | 2990 |
| Varroa destructor狄斯瓦螨染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443020 | 50次 | 2990 |
| Varroa jacobsoni雅氏瓦螨染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1443010 | 50次 | 2990 |
| Varroa spp.瓦螨（大蜂螨病）染料法荧光定量PCR试剂盒，暂停 | 1443000 | 50次 | 2990 |
| Porphyromonas gingivalis 牙龈卟啉单胞菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1442900 | 50次 | 2990 |
| Riemerella anatipestifer鸭疫里默氏杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1442800 | 50次 | 2990 |
| Leucocytozoon sabrezis沙氏住白细胞原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1442720 | 50次 | 2990 |
相关产品
饰纹汀蛙虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒Boheliridovirus(BIV)
枪状肝吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒Dicrocoelium dentriticum
牛细小病毒染料法荧光定量PCR试剂盒Bovine Parvovirus (BPV)
寻常圆线虫染料法荧光定量PCR试剂盒Strongylus vulgaris
Duck Hepatitis B Virus(DHBV)鸭乙型肝炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
胎儿弯曲杆菌性病亚种染料法荧光定量PCR试剂盒Campylobacter fetus subsp. Venerealis
空肠弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒Campylobacter jejuni
唾液弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒Campylobacter sputorum
熊峡谷病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Bear Canyon virus(BCNV)
须毛癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒Trichophyton mentagrophytes
红色毛癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒Trichophyton rubrum
絮状表皮癣菌染料法荧光定量PCR试剂盒
旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒Trichinella spp
布氏旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒Trichinella britovi
米氏旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒Trichinella murrelli
关注
拨打电话
留言咨询
