| 供货周期： | 14天 |
| 品牌： | 雅吉生物 |
| 规格： | 1盒 |
| 型号： | 50次/盒 |
| 货号： | 1418870 |
| 有效期： | 12月 |
| 标准值： | 详见说明 |
本产品仅供科研
更多产品详细信息可免费向客服索取
产品名称：肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Streptococcus pneumoniae
本产品是以染料法荧光定量PCR技术为基础开发的PCR试剂盒，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。
2.引物等组分经过优化，灵敏度高。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他的DNA/RNA发生交叉反应。
5.既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6.本产品足够50次20μL体系的染料法荧光定量PCR反应。
包装规格及成分（具体信息详见说明书）：
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） | |
| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） | |
| 引物混合液 | 100 μL（白盖） | |
| 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） | |
| 使用手册 | 1 份 |
肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒操作过程：
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。
1、液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
2、固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
3、粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
4、其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
三、数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm，最大发射光谱在 530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。
四、数据处理：
14. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。
15. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于40则为阴性，如果小于40，则为阳性。
肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。阳性对照需单独放置，不要污染其他试剂。
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
4、自备试剂：样品DNA。
盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR（具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化）。
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 92℃ | 5 分钟 |
PCR反应30个循环
| 94℃ | 60秒 |
50℃ | 60秒 | |
72℃ | 60秒 |
肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒注意事项
1操作严格按照说明书进行；
2试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3反应液应避光保存；
4反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒相关产品如下
| Streptococcus sanguinis 血红链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418900 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus salivarius 唾液链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418890 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus pyogenes化脓性链球菌（酿脓链球菌）染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418880 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus pneumoniae肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418870 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus oralis口腔链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418860 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus mutans变异链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418850 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus mitis轻型链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418840 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus iniae海豚链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418830 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus equi subspecies equi马链球菌马亚种染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418820 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus canis犬链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418817 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus zooepidemicus兽疫链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418816 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus uberis乳房链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418815 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus thermophilus嗜热链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418814 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus gallolyticus解没食子酸链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418813 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus dysgalactiae停乳链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418812 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus agalactiae无乳链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418810 | 50次 | 2990 |
| Streptococcus spp.链球菌属染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418800 | 50次 | 2990 |
| Heterakis isolonche自然感染雉异刺线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418700 | 50次 | 2990 |
| Leishmania siamensis泰国利什曼原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418660 | 50次 | 2990 |
| Leishmania braziliensis巴西利什曼虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418650 | 50次 | 2990 |
| Leishmania tropica热带利什曼原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418640 | 50次 | 2990 |
| Leishmania major硕大利什曼原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418630 | 50次 | 2990 |
| Leishmania infantum婴儿利什曼虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418620 | 50次 | 2990 |
| Leishmania donovani杜氏利什曼虫(黑热病病原虫)染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418610 | 50次 | 2990 |
| Leishmania spp.利什曼原虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418600 | 50次 | 2990 |
| Rickettsia risticii里氏立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418550 | 50次 | 2990 |
| Rickettsia gravesii白垩立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418540 | 50次 | 2990 |
| Rickettsia tsutsugamushi羌虫病立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418530 | 50次 | 2990 |
| Rickettsia prowazekii普氏立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418520 | 50次 | 2990 |
| Rickettsia mooseri莫氏立克次体（现名伤寒立克次体）染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418510 同18560 | 50次 | 2990 |
| Rickettsia spp.立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 1418500 | 50次 | 2990 |
| Spring Viraemia of Carp Virus(SVCV)鲤春病毒血症病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1418400 | 50次 | 3490 |
| Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1418300 | 50次 | 3490 |
| Bluetongue Virus(BTV)蓝舌病病毒8型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 1418280 | 50次 | 3490 |
相关产品
口腔链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
肺炎链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
化脓性链球菌（酿脓链球菌）染料法荧光定量PCR试剂盒
唾液链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
血红链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
猪链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
猪链球菌2型染料法荧光定量PCR试剂盒
罗斯肉瘤病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
鸽痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
猪星状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
流行性出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
嗜衣原体染料法荧光定量PCR试剂盒
流产嗜衣原体染料法荧光定量PCR试剂盒
猫嗜衣原体染料法荧光定量PCR试剂盒
兽类嗜衣原体染料法荧光定量PCR试剂盒
关注
拨打电话
留言咨询
