新品品鉴 | 多肽分子量测定，稳定高效又便捷

赛默飞色谱与质谱

2024/06/05 14:45

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熊亮胡金胜冉良骥

赛默飞 Vanquish 系列液相色谱历经多年的考验，充分满足了色谱工作者在方法开发、方法转移、标准研发与执行等相关的检测需求。2024 年 5 月 8 日上市的 Vanquish Access 液相色谱新品，将持续提升用户的使用体验。作为一款入门级的液相色谱仪，其在易用性、稳健性、耐用性和合规性等方面展现出的优势，使其成为各大实验室常规检测的理想选择。

胶原蛋白肽是一类以富含胶原蛋白的新鲜动物组织（包括皮、骨、筋、腱、鳞等）为原料，经过提取、水解、精制生产的，并运用现代生物技术，从胶原或明胶原料中提取的保健产品，其相对分子量一般要求低于10000道尔顿。胶原蛋白肽通常可以促进骨形成，用来预防骨质疏松症，同时具有保护胃黏膜和抗溃疡、抗过敏作用。在皮肤美容方面对肌肤美白、延缓衰老，改善体内微循环、祛斑祛皱、收缩毛孔、补水保湿等有一定的效果。因此，胶原蛋白肽在保健品、化妆品和医美等多个行业获得广泛应用。

本应用参照《食品安全国家标准胶原蛋白肽》(GB 31645-2018)，使用 Vanquish Access 液相色谱系统，配合赛默飞 BioBasic SEC 120 体积排阻色谱柱 (7.8×300 mm, 5 μm, P/N: 73405-307846A)，并使用变色龙色谱工作站中的 GPC 扩展包，很好的完成了胶原蛋白肽分子量的测定。

仪器配置

Vanquish™ Access 液相色谱系统 (PN：VA-S22-A-01)，包括：

四元泵 Quaternary Pump AN

自动进样器 Autosampler AT

柱温箱 Column Compartment A

可变波长紫外检测器 Variable Wavelength Detector A（配 11 μL 流通池）

变色龙色谱管理软件 Chromeleon CDS 7.3.2

仪器配置

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标准品溶液色谱图

标准品溶液：细胞色素，抑肽酶，杆菌肽，乙氨酸-乙氨酸-酪氨酸-精氨酸，乙氨酸-乙氨酸-乙氨酸

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样品溶液色谱图

胶原蛋白肽样品溶液连续 10 针进样叠加谱图

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连续进样 10 针，样品的保留时间 RSD 为 0.05%，峰面积 RSD 为 0.06%，体现了 Vanquish Access 良好的稳定性，进而可以更准确的表征多肽的相对分子量。

样品溶液分子量结果

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变色龙色谱工作站 Chromeleon® 7 GPC 扩展包融合了多项先进功能，整合了完整的数据采集、计算、作图和报告功能，可以自动执行计算和报告步骤，实现快速简单地创建 GPC 报告，减少用户出错，为用户提供了一种快速、便捷的 GPC 数据报告方法。针对胶原蛋白肽的分子量测定，变色龙的 GPC 模版除了可以提供数均分子量 (Mn)、重均分子量 (Mw)、Z 均分子量（MZ）、Z+1 均分子量 (MZ+1) 以及分布系数 (PD)，还可以根据用户的需求，提供任意不同分子量区间的占比，更好的帮助用户评估多肽样品的分布情况。

小结

● Vanquish Access 结合 BioBasic SEC 120 体积排阻色谱柱，能轻松满足《食品安全国家标准-胶原蛋白肽》(GB 31645-2018) 中的要求；

● BioBasic SEC 120 色谱柱为全多孔硅胶基质，键合相为二醇基，孔径为 120 Å，基于体积排阻作用机理，排阻范围（蛋白）为 300-12,000 Da，可应用于蛋白、多肽及其他生物大分子的分析，寿命长，柱效高，方法开发简单；

● 通过变色龙色谱工作站中的 GPC 扩展包，可以方便快捷的计算出多肽的相对分子量和分布系数；同时可以根据用户的需求，提供任意不同分子量区间的占比，更好的评估多肽样品的分子量分布情况。

参考文献：

[1] GB 31645-2018 食品安全国家标准胶原蛋白肽

[2] BioBasic™ HPLC Columns Technical Guide - BioBasic™ SEC Columns

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