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[size=5]超临界流体色谱法分析大豆磷脂[/size] 来源: 作者:王学军, 赵锁奇, 王仁安 摘要:采用以CO2为流动相的超临界流体色谱方法,以含0.05%(体积分数)三乙胺的乙醇作为改性剂,对具有重要生物功能的大豆磷脂组成进行分析,获得了大豆磷脂提取物中6个重要组分的定性结果,并讨论了流动相组成、操作温度和压力对分离的影响。对其中有代表意义的磷脂酰胆碱(PC)进行了外标法定量分析,在PC质量浓度为0.020 g/L-0.075 g/L时具有较好的线性关系,PC加样回收率为96.7%( =5),重现性好。此方法可用于实际样品的分析。关键词:超临界流体色谱;磷脂酰胆碱;大豆磷脂2 实验部分2.1 仪器与试剂 所用SFC装置由本实验室设计组装而成。Rheadyne进样器配有lOμL的定量管,Spectra 100可变波长紫外检测器为美国TSP公司产品,色谱信号由色谱工作站记录。无水乙醇、三乙胺均为国产分析纯试剂。PC,PE,PI标准品购自Sigma公司大豆磷脂分别为本实验室超临界流体抽提萃取物和北京化学试剂公司产品。2.2 色谱条件 参考文献[2,7,8]所报道的内容,本实验所用色谱柱选择Sphefisorb C18 10μm(中科院大连化学物理研究所),250 mm×4.6mm i.d.不锈钢柱;流动相为超临界CO2和改性剂(体积比为10:1),其中改性剂为含0.05%(体积分数)三乙胺的乙醇溶液;流动相流速为1.1mL /min~1.3 mL/min;柱温为3O℃~60℃ ;压力为20MPa~30MPa;进样体积为10μL;经紫外扫描,选择检测波长为214nm。2.3 混合标准溶液和样品溶液的制备 称取各磷脂标准品适量,加人同一容量瓶中,加乙醇至刻度,配成标准品的混合溶液,其中每一标准品的质量浓度均在0.2 g/L到10.0 g/L之问;分别称取两种大豆磷脂样品1.0 g,并各自配成质量浓度约为50 g/L的乙醇溶液。