肠菌群测定仪

第一部分 GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 第一法 大肠菌群MPN法 1、取样原则：本标准中对应的检样量分别为0.1g（mL）、0.01g（mL）、0.001g（mL），根据样品限量值，查阅附录部分MPN表：（1）无论固体或液体，当限量值为“＜3.0”或其它任意能在标准“表1”中查到的数值，则分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：1000的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管； （2）无论固体或液体样品的限量值为“＜0.3”或其它任意为MPN表中查到的数值缩小10倍的数值，则分别取10mL样品1:10稀释液接种到3管双料LST肉汤管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料LST肉汤管（如蜂蜜的限量值为0.3MPN/g，即采取此做法）。 2、凡产酸或产气的LST管，都取1环接种GBLB肉汤管，凡BGLG产气者记为阳性。第二法 大肠菌群平板计数法（常见问题汇总） 1、VRBA培养相关问题（1）所用器皿是否需要灭菌？答：不需要。配制培养基所用到的锥形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要灭菌，但要求一定要清洗干净，表面无污渍、无残留。煮沸完成后，取下锥形瓶，用一般常用的卫生纸（软纸）覆盖瓶口，用橡皮筋缠绕，待冷却至适宜温度即可倾注培养基。在倾注培养基时，须点燃酒精灯，稍微灼烧锥形瓶口。（2）如何保持“煮沸2min”？答：可以用电磁炉或电热板进行加热煮沸，在该培养基即将煮沸时调低温度。实际操作时，不需要严格按照此要求进行，加热煮沸数秒即可。原因：本培养基很难保持煮沸2min，一旦煮沸，则培养基很快上涌、翻腾，若不调低温度或立刻采取其他措施，则培养基可在数秒内喷涌出来，严重者可喷涌2米以上、电磁炉周围1—2米范围内都是培养基飞溅的范围（实验室危险因子之一）。（3）若培养基未用完，是否可以冷藏起来下次用？答：不可以。4789.28中已规定，固体培养基最多允许熔融1次（指的是经过高压灭菌冷却后的培养基还可以熔融一次后使用）。且VRBA培养基冷却后，再次熔融时非常容易喷涌，若温度控制不当，底部培养基熔融后很快就会发生喷涌（即培养基未完全熔融就会发生喷涌现象）。（4）倾注完成后是否需要“覆盖一层”？如何覆盖？答：一般情况下不需要覆盖。在实际操作过程中，若检验员初次接触该食品（或食品品类），则有必要在倾注培养基后再覆盖一层（原因是不清楚该样品是否会发生蔓延）。而如此往复测试几次后，若该样品或食品品类均不存在蔓延现象，则以后的实验中都不需要进行覆盖。若重复多次测试后都有蔓延现象，则以后的检验中最好都进行覆盖，最好是在原培养基已凝固或半凝固（不会发生晃动）时再倾注一层培养基（“一层”是指缓慢倾注培养基至培养基刚好能够覆盖整个平皿）。2、如何确定培养基上长的是不是大肠菌群？答：建议新手们认真按照标准进行证实试验，此证实试验简单易操作，每一次VRBA上有菌落生长都进行证实试验，如此往复3-4次，对于哪种形态才是大肠菌群已经能够了然于心。 第二部分、GB/T 4789.3-2003 《大肠菌群测定》——（标准补充） 1、由于MPN表中给出的检样量为1mL（g）、0.1mL（g）0.01mL（g）三个稀释度，所以：（1）无论固体或液体，当限量值为“＜30”或其它任意能在标准“表1”中查到的数值，则分别取10mL 1：10的样品匀液接种到3管双料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：100的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管（有时限量值≤300，也建议同样操作）； （2）若液体样品的限量值为“＜3”，则分别取10mL样品原液接种到3管双料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL样品原液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管、分别取1mL 1：10的样品匀液接种到3管单料乳糖胆盐发酵管，9管皆为阴性则符合该限量值。 2、大肠菌群在EMB培养基上的典型形态特征，参考GB 5750-2006中总大肠菌群发酵法相关章节。但仍然建议：一旦有菌落数生长，无论是否为典型形态，都应挑取进行革兰氏染色及证实试验。 3、最后一次证实试验，凡乳糖发酵管产气（无论气泡大小）且革兰氏染色镜检为阴性则判定为大肠菌群阳性。第三部分、那如何判断咱们的产品到底是应该用哪个版本的大肠菌群计数方法呢？以GB 2726-2016《食品安全国家标准 熟肉制品》为例，其中大肠菌群指标如下：该标准提到的检验方法并未写明是按GB 4789.3-2016中的第一法还是第二法检测，那现在按检测标准来分析一下：1. GB/T 4789.3-2003的检测结果单位为MPN/100克或MPN/100毫升”2. GB 4789.3-2016中的第一法中的检测单位为“MPN/克或MPN/毫升”

各有关单位：按照《青岛市标准化协会团体标准管理办法》的规定，青岛市标准化协会于2023年12月19日至25日进行了《水质 耐热大肠菌群的测定 高效微生物生长分析仪法》团体标准专家评审，并经研究讨论达成一致，将原标准名称《水体中耐热大肠菌群的测定 高效微生物生长分析仪法》更名为《水质 耐热大肠菌群的测定 高效微生物生长分析仪法》，已通过专家审核，现予以发布。标准实施后，各有关单位可自愿采用。青岛市标准化协会2023年12月29日附件：青标协字〔2023〕68号.pdf

冠亚肉类水分快速测定仪登场，猪肉水分问题无所遁形摘要： 猪肉安全关系到人们的生命与健康，对猪肉及其制品的水分安全控制和检测再怎么重视都不为过。随着该领域关注度的持续升高，将对水分快速测定仪提出更高要求，也为该行业打开更加宽广的市场。 猪肉，作为人们食用量的肉食品之一，猪肉的安全问题一直是老百姓关注的焦点，人们对安全猪肉的需求愈来愈强烈，但是注水猪肉的问题依然存在。2001年，原**国内贸易局制定了《畜禽肉水分限量》（GB 18394-2001），国标规定：牛肉、猪肉和鸡肉的水分含量不得超过77%，羊肉的水分含量不得超过78%。不法屠宰企业或个人注水手段花样百出，注水技术不断更新。不法屠宰企业或个人为牟利，注水手段可谓五花八门——猪、牛待宰前，往其胃里强灌大量水，增加毛重；屠宰后往心脏里强注大量水，水分通过微细血管迅速扩散到肉体，增加净重；将肉块浸泡在水里，以水冒充肉的重量，使水钱变肉钱。一头100公斤的猪，通常可注水十多公斤。根据畜肉是否注水，肉贩子明码标价，注水猪肉的价格甚**低于正常价30%以上。“注水肉”并非只是简单的欺诈，对人体健康也存在相当危害。 多数“注水肉”制造者的生产设备简陋，产品极不卫生。南京市溧水区人民法院（2014）溧刑初字第225号判决书显示，不法分子多次向活体牛内注入井水后宰杀。经鉴定，该井水的总大肠菌群、耐热大肠菌群、臭和味、浑浊度、菌落总数都不符合**生活饮用水卫生标准。除水外，一种名为“沙丁胺醇”的药液，也是不法屠宰户的常用品。沙丁胺醇是一种β受体激动剂，常用作人类平喘药物。待宰畜禽被注射了沙丁胺醇后，会拼命喝水。沙丁胺醇不仅会起到保水作用，还能提高“卖相”，使肉的颜色鲜亮。事实上，沙丁胺醇是“瘦肉精”的一种。早在2002年，农业部公告第176号便将其列为养殖行业违禁药物，禁止在畜禽养殖中添加。“活灌会让动物的胸腹腔受到压迫，呼吸困难，造成其组织缺氧，肌体处于半窒息和自身中毒状态，动物胃肠道的细菌通过血液循环进入肌肉。”中国畜产品加工研究会副会长、西南大学食品科学学院教授李洪军表示，这样的“注水肉”会对人体健康造成伤害。 注水肉的辨别方法 对于消费者来说，用看和摸的感官检验法简单实用。新鲜肉从外观上看，脂肪洁白，肌肉有光泽，红色均匀，外表微干或微湿润，用手指压在瘦肉上的凹陷能立即恢复，弹性好，且有鲜猪肉特有的正常气味。而注水肉，由于含有多余的水分，肌肉色泽变淡，或呈淡灰红色，有的偏黄，显得肿胀，从切面上看湿漉漉的。销售注水肉的肉案子上是湿的，严重的还有积水。注水的冻猪瘦肉卷，透过塑料薄膜，可以看到里面有灰白色半透明的冰和红色血冰。专家还提醒，判断肉品好坏，并不能单纯地认为鲜肉就一定比冻肉或冷鲜肉好。特别是眼下高温天气，如果鲜肉不注意运输、贮藏条件，更容易滋生细菌或变质。而由于低温可以降低或停止食品中微生物的增殖速度，也可以降低食品中具有分解各种营养成分的酶的活力和一切化学反应速度，因此可以说，经过低温处理的冻肉或冷鲜肉的营养成分损失较少，也有利于保证食品质量。但是，只用看和摸的感官检验法来辨别注水肉是不科学的。 注水肉的检测方法水分含量是猪肉品质的重要指标之一。目前猪肉的水分问题形势非常严峻，问题猪肉层出不穷，尤其是注水猪肉，已经在市场上愈演愈烈，屡禁不止，除了不法商贩的造假手段越来越高，现行的一些检测手段也不能满足监测部门的要求。自从肉类水分测定仪的出现，注水肉问题迎刃而解。　　冠亚生产的猪肉水分快速测定仪是用来测量样品中水分含量的仪器，具有检测速度快,只需几分钟，测量准确；体积小、重量轻，用途广泛；操作简单，全自动测试；显示部分采用红色数码管显示（7种参数：水分值、样品重量初值、终值、测定时间、温度初值、终值、判别时间）；具有与打印机连接功能（可选配件）等优点。该仪器可广泛应用于一切需要快速测定水分的行业，包括高校科研院所（科研、毕业设计），粮食、食品、（质检、生产部），饲料（质检、生产部），化工、医药（质检部），农业（质检），林业和造纸业（质检部）质量监督、环保行业，以及纺织、造纸、橡胶、塑胶、纺织等行业中的实验室与生产过程中。