生物组织处理仪

八戒：猴哥救我！悟空：呆子，何事慌张！八戒：猴哥你没听说吗！非洲猪瘟来了，一个被传染，一窝都遭殃啊！我听说辽宁、黑龙江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已经被扑杀了。悟空：呆子！那还不离我远点！问题一、什么是非洲猪瘟？非洲猪瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感染家猪和各种野猪（不传染人）引起一种急性、出血性、烈性传染病。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，且只能依靠实验室监测确诊。 2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。问题二、目前在中国的传染范围？自8月初我国首次发现非洲猪瘟以来，截至11月22日，全国有20个省份47个市（区、盟）发生73起家猪疫情、1起野猪疫情，累计扑杀生猪60万头。全国非洲猪瘟疫情呈现多点散发状态，但在各地动物疾控部门的积极行动下，疫情开始趋于平稳，总体防控有效。问题三、非洲猪瘟检测的样品处理方法介绍一、非洲猪瘟样品处理1. 目的规范ASFV样品和实验材料的处理程序，保证ASFV相关实验的顺序开展和实验室的生物安全。2. 适用范围适用于疑似ASFV临床样品的实验前的处理3. 程序3.1实验材料ASF的易感动物，主要为家猪、野猪和蜱，通常采集的样品为家猪、野猪的血液样品、组织样品以及蜱三类。田间采集的样品通常需要经过简单的预处理，才能进行后续的检测、诊断工作。血清：用于病毒核酸检测、病毒抗原和抗体检测。将采好的猪血的注射器或采血管在室温下倾斜静止2~4h（防止暴晒），或置于37℃温箱内1h，待大部分血清析出后，取出血清，必要时经离心分离血清。（最低建议量5ml）。抗凝全血：用于病毒核酸检测和病毒抗原检测。采血前，在真空采血管或注射器内按比例加入抗凝剂。采集血液，轻轻上下颠倒，使血液与抗凝剂充分混匀，防止血液凝固的同时避免溶血。也可以将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，震荡脱落纤维蛋白。必要时，可加入双抗以抑制血源性或采血过程中可能出现的细菌污染。当血样用于病毒核酸检测时，一般不用肝素而选用EDTA作为抗凝剂。（最低建议量1mL）。组织样本：活体采集，采用扁桃体，用于临床健康动物ASF监测。尸体剖检ASF发病动物或死亡动物经解剖取材，包括：ASFV靶器官的采集：脾脏、淋巴结、肾脏、扁桃体。其他病变组织脏器的采集：采集具有明显病变的肝脏、肺脏、心脏等组织器官，选取部位在病变和健康组织交界处。腐败动物尸体的样品采集：剖检取股骨，将附着的肌肉和韧带等全部剔除，采集骨髓。最低建议量5克。蜱的采集：蜱可进行核酸检测、抗原检测和蜱的形态学鉴定，查找猪圈的墙边、墙缝、木质或瓦质的屋顶，或挖掘猪圈地面均可能找到蜱，也可查看猪表皮，采集蜱。1-1样品保存条件注：用于病毒分离和病理学检测的样品禁止-20℃保存。3.2实验器材和试剂 1）台式高速冷冻离心机、组织研磨仪、水浴锅、计时器、冰箱和移液器等。2）无菌的剪子、镊子、钢珠、2mLEP管、移液器吸头（10μL,200μL、1000μL）等。3）其他试剂和耗材主要包括：0.01mol/L PBS（PH7.2）、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。3.3样品处理程序3.3.1血清及全血样品处理取血清或全血样品1mL于灭菌EP管里，保存备用3.3.2组织样品处理适用于脾脏等组织样品和蜱的处理。尽可能减少污染，每取一个组织块或蜱，用火焰消毒剪镊等取样器械，组织块应分别放入灭菌容器内并立即密封，做好标记，注意防止组织间相互污染。3.3.2.1组织样品的处理应在二级生物安全柜中进行，勿使液体溅到生物安全柜中。3.3.2.2将0.1-0.2g组织块放入2mLEP管中，用剪刀剪成碎块，加1-2mL0.01mol/L PBS（PH7.2）,再加入1-2粒灭菌钢珠，密封后，表面消毒备用。剩余样品放回容器内，重新密封，表面消毒后保存-70℃冰箱。3.3.2.3组织样品的破碎可以利用组织研磨仪在生物安全柜外操作，将样品制成组织悬液。重磅推荐使用Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器3.4病毒灭活病毒的灭活处理应在二级生物安全柜中进行，将处理好的血清、全血或者研磨破碎后的组织样品连同EP管放入60℃水浴中，放置30min灭活。3.5使用后仪器处理剪刀、镊子等均应放入消毒缸进行消毒，放入铁饭盒内，并装入密封袋内进行高压灭菌处理。装有组织样品保存液的容器和盛有组织块的离心管应密封管口，表面消毒后放入密封袋中高压灭菌。钢珠、吸头等废弃物应用0.8%NaOH浸泡30分钟消毒后，置密封袋内高压灭菌。消毒残液应装入密封容器内高压灭菌处理。3.6注意事项操作之前要确认生物安全柜和实验室已进行了彻底的卫生消毒处理，防止样品间交叉感染。二、非洲猪瘟病毒的核酸检测可用实时荧光PCR配套相应实际进行，具体操作步骤以仪器生产公司指南为准。 问题四、病毒杀灭和防控方式非洲猪瘟病毒虽然在环境中比较稳定，但在猪肉烹煮处理过程中较易失活，70℃-75℃加热30分钟以上，病毒就会被杀灭，也就是说我们日常烹饪过程中只要把猪肉熟透(包括最中间部位温度至少达到70℃以上)，即使有病毒也会很快失去感染力并丧失活性。 新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器介绍新芝生物推出的Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器具备以下特征：1.应用场景多样。可以对不同组织进行干磨、湿磨、混合以及均质化处理。2.实验效率高。能提高提取大通量样品中核酸的效率和质量。3.实验过程安全。研磨过程采用封闭式一次性离心管，有效地避免了样品交叉污染。4.仪器稳定性好。对同一组织样品可设定相同的研磨程序，从而获得相同的研磨效率，提高了实验的可重复性。5.研磨效果好。产品采用高效研磨球进行研磨，相较于传统研磨方式对样品的研磨更为均匀、充分。目前，新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器已助力沈阳、大连、朝阳、本溪、鞍山、锦州、葫芦岛等多地动物疾控中心用于非洲猪瘟检测实验的样品前处理。Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器高效、稳定、安全的仪器特性很好地解决了检测过程中检测样品数量多、实验一致性难以控制等问题，得到了广大用户的一致好评。产品用途1.适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的研磨破碎； 2.适用于各种动物组织包括大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌 肉、骨骼等样品的研磨破碎； 3.适用于真菌、细菌等样品的研磨破碎； 4.适用于食品、药品成分分析检测的研磨破碎； 5.适用于易挥发样品包括煤炭、油页岩、蜡制品等样品的研磨破碎； 6.适用于塑料、聚合物包括PE、PS、纺织品、树脂等样品的研磨破碎。主要技术参数1.时间设定：1(秒)-9999(秒)2.频率设定：10—70Hz，即振荡300—2100次/min 3.额定功率：180W4.夹具行程：34mm(垂直)5.温度设置 : -20℃或者-30℃6.电磁锁控制开门7.样品容量：随机标配：铝合金适配器5ml 12孔，2ml 48孔 可选配：铝合金适配器2ml24孔8.电源需求：220V单相交流，宁波新芝生物科技股份有限公司（股票代码：430685）始创于1989年，公司总部位于宁波市国家高新区，注册资金6102万元，是全球知名的生物样品处理设备提供商，也是国内超声波技术应用探索的先行者。依托强大的科研技术实力，公司在超声波、温湿度、高低压、超低温等技术层面积累了丰厚的经验，并先后研究开发包括生物样品前处理仪器、分子生物学仪器、实验室洁净设备、冷冻干燥设备、工业防垢除垢设备、环保除藻防控设备在内的多款产品。公司始终坚持业界前沿的技术研究和应用开发，致力于为科研、教育、环保、医疗、制药、石化、农林、材料等领域客户提供先进的产品设备和行业解决方案。公司目前拥有宁波、杭州两地四大研发中心，拥有高水平研发人员数十人，专利60余项。公司曾多次承担国家科技部、发改委、卫生部重大科研项目，是国家发改委高技术产业化示范工程中心、科学仪器产业化基地、宁波企业工程（技术）中心。公司研制的高压气体基因枪一举打破国外技术垄断，填补国内相关领域空白，荣获浙江省科技进步二等奖。公司高度重视品牌培育和市场开拓，为更好地服务客户，公司在全国各地建有30余个办事处，办事处均配备销售工程师和售后工程师，可随时满足客户需求。全球超过15,000家实验室在使用新芝生物的产品，各类仪器设备市场保有量超过100,000台套，产品远销美、英、法、俄、日、韩等36个国家，公司年度销售收入突破1亿元人民币，已经成为国内乃至全球知名的生物样品制处理设备研制专家。新芝生物30年风雨兼程，以新致心，将继续致力于为各行业客户提供优质的产品和贴心的服务！

昊诺斯第一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动成功开展4月6日下午，昊诺斯第一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动成功开展，活动受到了用户们的大力支持，虽然这一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动仅仅1个小时，但是丝毫没有影响用户们积极参与分享、讨论的热情，大家不仅根据我们活动的主题进行了探讨，而且还将自己实验中遇到的问题进行了交流，整个“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动过程可为全程高能！ 第一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动我们给大家提供了一个很经典的一个案例：人体内脏及肿瘤细胞用于提取RNA。 实验：人体内脏及肿瘤细胞用于提取RNA试用单位：北京某生物技术公司试用时间：2015.3.16-2015-3-17适配器选择：2.0ml试管适配架（2×28×2.0ml）研磨组织：人体肿瘤细胞，胰腺，前列腺，脂肪，肌肉（每个组织各研磨2个样本）操作过程：1、实验前准备：对不锈钢研磨钢珠进行高温灭菌预处理。2、研磨组织：将样本取出，切割成适于研磨的体积，将研磨钢珠加一颗到2ml圆底离心管(进口)，随后加入切好的待磨样本，最后再加入一颗预冷的研磨钢珠，盖好管盖放入取出的适配器中，按上述操作依次处理各样本，随后将适配器安装上机，设置频率，开始研磨，时间结束取出适配器加入裂解液。试用结果：结论研磨效果良好，提取的RNA跑出电泳图条带清晰可见，试用效果良好。提取的RNA电泳图案例中的公司是针对全国医院和公司人体样本测序服务的公司，他们的样本量十分大，而且种类多样！为此他们专门有一个提纯组，做样本提纯！因为样本量大且提纯的是相对难处理的RNA，所以非常有参考价值。 首先他们实验室的卫生级别很高，所有操作尽量保证在超净台中进行！其次，钢珠是经过他们提前的灭菌处理，清洗过程中几乎都是用的超纯水。最后，他们的2ml离心管也是很好的进口无菌无RNA霉的！这样最大可能的保证了我们的实验中外来因素对实验的影响。在这期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动中，我们针对以上案例进行了简单讲解，让用户更加清楚，并针对该案例进行了问答互动，大家也都是积极参与：相信每一位参与“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动的用户都会有收获。最后，让我们共同期待第二期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动吧！下周三，我们不见不散！对了，还有一件很重要的事儿没跟大家讲，就是我们的“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动是在【昊诺斯鼎昊源组织研磨分享】微信群内开展的！如果您也想参与我们的活动，那么就找昊诺斯销售工程师拉您进群，或者回复昊诺斯微信公众号申请进群（申请时要注明所在单位名称+微信号）。扫码关注昊诺斯微信公众号

第16期组织研磨及样品处理分享讨论：q系列（新）vs tl系列研磨仪 本周昊诺斯第16期组织研磨和样品处理分享、讨论，我们给大家分享的内容是——新推出的q系列组织研磨仪与tl系列组织研磨仪的区别。 那接下来，就让我们赶紧看看究竟新推出的q系列组织研磨仪与tl系列组织研磨仪有啥区别吧！ 昊诺斯嘉宾：各位老师，下午好。鼎昊源新出了一款q系列组织研磨仪，今天跟大家分享一下新出的q系列组织研磨仪与tl系列组织研磨仪的区别。 昊诺斯嘉宾：有的老师可能见过彩页，有的老师可能没见过，q系列组织研磨仪有三个型号：q24、q24r、q24rc。 昊诺斯嘉宾：今天主要说下q24r与tl系列组织研磨仪的区别，主要有三点区别：第一点是运动方式，第二点是制冷方式，还有一点是机器的配件不同。 用户：q系列和以前的有什么变化？是更智能了吗？ 昊诺斯嘉宾：也可以说是更智能了，研磨程序，包括研磨速度，研磨时间，间隔时间，制冷的温度，都可以设定成程序，做实验时只要调出程序就可以。 用户：原理一样吗？给大家一点一点仔细介绍一下吧。 昊诺斯嘉宾：第一点是运动方式不同，用过tl系列组织研磨仪的老师都知道，tl系列组织研磨仪是水平往复运动的，而q系列组织研磨仪采用的是8字型运动方式，大家可以看下示意图。 昊诺斯嘉宾：运动方式的不同，可以使q系列组织研磨仪的研磨速度提高，这样对难研磨的样品也有很好的粉碎效果。 昊诺斯嘉宾：第二点是制冷方式不同，tl系列的制冷方式是事前经过液氮浸泡，从而达到制冷的效果。液氮制冷有一个问题，就是短时间内研磨可以保持低温状态，但较长时间研磨，温度还会升高。 昊诺斯嘉宾：目前国内外厂家，除液氮制冷外一般采取外接模块，通入干冰或者液氮，以下就是一台外置的空气制冷机。 昊诺斯嘉宾：虽然外置空气制冷机可以使研磨过程中保持低温状态，但一台组织研磨仪相当于两台机器，不仅价格高，而且还占地方。鼎昊源q系列组织研磨仪的q24实现了内置压缩机，整个组织研磨仪只有一台冷冻离心机的大小。 用户：体积变小了？ 昊诺斯嘉宾：510x370x360，毫米。q24r的制冷范围是0-35℃，这样组织研磨仪不用液氮也可以做到低温研磨。 用户：成本低了，是靠压缩机制冷？ 昊诺斯嘉宾：是的，原理相当于冷冻离心机的制冷方式。 昊诺斯嘉宾：第三点是配置不同，tl系列的配件比较多，从2ml离心管-50ml研磨管都有，适合不同体积的样品。q系列的研磨仪我们定位在动物核酸和蛋白提取，所以目前配件只有2ml研磨管。 昊诺斯嘉宾：一般做动物组织样品量比较小，2ml研磨管已经足够，而且8字的研磨方式对于比较难研磨的动物组织效果也很好。下面给大家看几张研磨的图片。 生猪肉研磨前后 大鼠的食管研磨前后 冻存的小鼠肌肉研磨前后 昊诺斯嘉宾：下面这个是小鼠肝脏rna电泳图，在0℃下充分研磨，提取效果非常不错。 昊诺斯嘉宾：除了q24r冷冻组织研磨仪之外，还有一款q24rc，这款组织研磨仪了除具有q24r所有功能之外，还有离心的功能，最大转速6000转，q24rc实现了在同一台机器中完成研磨、离心的过程。 q系列三款研磨仪的主要参数图 这是q24rc的离心效果图 昊诺斯嘉宾：上面是q24rc的离心效果图，与一般的万转离心机没什么区别。q系列研磨仪大体就是这样了，不知道各位老师有没有什么问题？ 用户：都能研磨什么？ 昊诺斯嘉宾：动物组织，植物组织，微生物都可以研磨，不过q系列研磨仪研磨时需要加入提取液进行研磨。 用户：骨骼呢？ 昊诺斯嘉宾：骨骼也是可以的，但是骨骼不能太大，研磨时间会比其他组织长。 用户：先敲碎了再磨。 用户：什么提取夜？ 昊诺斯嘉宾：比如提rna的试剂盒，提蛋白的那个提取液。 用户：石棉可以研磨不？ 昊诺斯嘉宾：您是要提取里面的核酸还是测成分？ 用户：测成分。 昊诺斯嘉宾：能研磨，不过石棉最好还是选择tl系列的研磨仪，q系列目前定位是动物组织，提取rna及蛋白。 用户：用什么研磨？ 昊诺斯嘉宾：用不锈钢研磨管研磨。 用户：噢。 用户：研磨效果还是不错的。 昊诺斯嘉宾：是的。 最后，让我们共同期待第17期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动吧！下期，我们不见不散！ 温馨提示：我们的“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动是在【昊诺斯鼎昊源组织研磨分享】微信群内开展的！如果您也想参与我们的活动，那么就扫描下方二维码，加群主请微信，由群主拉您进群！ 此外，本群的目的是希望可以给大家提供一个样品处理问题的交流平台，有什么相关问题在群里能够分享和提问答疑……另外我们还能通过这个平台连接用户使用人员和工厂研发人员，看看在这些讨论过程中是否会碰撞出火花来，以为实验室手工的样品处理做出更多更好的自动化的辅助工具或替代仪器备来，更可以为完善我们现有产品的设计打开思路提出建议…… 访问http://www.herosbio.com/pro.asp?thebigclassid=14&bpro_id=93可以了解更多产品信息！