量蛋白稳分析仪

美国Unchained 高通量多功能蛋白稳定性分析仪Unit/Uncle是得到蛋白分子结构稳定性、聚集稳定性、胶体分散稳定性等多种类型数据的设备。该设备既能使用经典方法处理数据，又新增多种分析模式；既可获得单一类型数据，又可对多种类型数据同时测定整合分析；既保证了数据质量，又实现了数据种类和通量；并且样品用量少，操作简单快捷，更能够解决蛋白样品数据获得过程中的问题。Unit高通量蛋白稳定性分析仪Unit 同其它测定蛋白稳定性参数的设备相比，需要的样品量更低。基于客户所了解的蛋白结构和稳定性知识，2小时内同时可以得到熔解温度（Tm）和聚焦温度（Tagg），是蛋白稳定性筛选zui好的平台。1. Tm & Tagg的温度2. 9μl （0.5 μg）样品量3. 全密封样品4. 全光谱荧光和静态光散射5. 无标记技术，6种应用6. 可选择基于蛋白染物Uncle 高能量多参数蛋白稳定性分析仪Uncle 整合了3种不同的检测模式：荧光，静太光散射SLS，和动太光散射DLS，提供11种特色的应用及组合。用更少的样品，在短短几个小时得到所需的数据。熔解温度（Tm）和聚焦温度（Tagg），检测 Tm(Dsf法），G（2~4state, G分析）等温稳定性试验，热恢复试验，颗粒大小 & 多分散性，颗粒升温试验，B22/KD/粒度/G2。

PR 系列蛋白稳定性分析仪生物制品的开发过程漫长而复杂，从候选分子到最终变成产品都需要检测一系列重要参数作为支持。从上游筛选、构建或改造候选分子，到制剂优化、可开发性评估，以及下游生产工艺优化，PR Panta 都可以始终如一地为候选分子提供全面的参数稳定性表征和可信赖的结果，精准比较不同团队和不同批次样品的构象与胶体稳定性数据时保持一致性。产品优势： 【同时且实时】：实现在整个升温过程中实时监测和记录，同时提供构象稳定性、粒径及聚集数据，并在结构域水平上获得全面且完整的稳定性信息； 【超高分辨率】：误差值在±0.008的高分辨率，检测多个热变性时可有效区分具有相似Tm的结构域，弥补由于监测技术瓶颈而忽略掉的关键信息； 【高特异性】：可有效区分生物制剂信号与缓冲液或细胞间质信号； 【数据精准、重复性好】：Tm误差范围仅为±0.1℃，提供真实的检测结果； 【通量灵活、操作简便】：无论是上游制剂开发还是下游工艺优化，无论浓度高低，一台Panta即可满足整个流程的稳定性检测需求，节约成本和时间。 实体参数：可以让您在单次运行中测量热稳定性，聚集，粒径大小和分散性- 无标记检测，仅需使用微量样品。依靠 Prometheus 获得可靠的、高分辨率的蛋白质稳定性数据，检测出不易被发现的稳定性行为， 让您对目标最佳候选分子和条件都更加充满信心。 &bull 超高分辨率的生物物理检测方法：通过了解影响蛋白稳定性的温度和化学条件，对蛋白功能进行更深入的剖析，从而全面了解蛋白质的折叠特性和结构域。使用 PR 系列蛋白稳定性分析仪，轻松改善蛋白纯化工作流程，快速排查各种生物制剂功能研究中的问题。 &bull 全面检测：快速测定不同缓冲液、盐浓度、pH 和离子对蛋白质热变性的影响。确定不同批次实验之间的相似性。 &bull 优化储存和制剂条件：精确测定不同贮藏条件对蛋白质稳定性的影响。确定最佳制剂条件，确保蛋白稳定性。 &bull 预测聚集：轻松预测蛋白聚集趋势，更全面地了解影响蛋白质稳定性的各类因素。1. 技术优势（1）天然条件下检测：无需添加染料或改变样品缓冲液。可检测粘稠样品。（2）样品准备：样品直接吸入毛细管，上样极简单。（3）数据精准：高密度的数据点意味着高质量的数据，其他技术遗漏的细节我们却可以得到。（4）同步测量：同步得到 Tm、Tonset 和 Tturbidity 等多个实验结果。（5）样品消耗少：10 μL 样品量 ，浓度 5 μg/mL 即可检测。（6）检测更多条件：一次测试得到多个参数，使您更快获得结果。（7）通量选择自由：灵活的样品数量，一次实验可做 1 个、48个或任意数量的样品，也可以选择全自动上样。2. 技术原理（1）微量差示扫描荧光技术 (nanoDSF)PR 系列基于微量差示扫描荧光技术 (nanoDSF) 技术，可在天然条件下检测蛋白热变性和化学变性。蛋白中色AN酸和LUO氨酸的荧光与其所处的环境密切相关。免标记的 nanoDSF 技术可以准确检测蛋白热变性和化学变性过程中内源荧光的变化。因此，通过检测荧光变化，可实现在非标记环境下测定蛋白的热稳定性或化学稳定性。更重要的是，数据质量不会受样品聚集影响。高质量的数据助您做出更好的决定。 PR 系列是通过检测蛋白的内源性荧光来跟踪其折叠状态。荧光信号的比值会随着温度的增加或化学变性剂浓度的增加 而变化，从而测定蛋白稳定性参数 Tm值。（2）背反射技术（Backreflection）NanoTemper 公司研发的背反射光学模块主要用于检测蛋白的聚集现象。 蛋白的聚集检测主要基于颗粒的光散射效应。归功于 PR 系列产品使用的高精度毛细管和自动化的内部参比，聚集检测的重复性和灵敏性均优于传统方式。同时，由双通道 UV (Dual - UV Technologies) 检测模块获得的高密度数据能够同步监测蛋白的去折叠过程。热稳定性和聚集起始温度的同步检测，能非常快速的给您够提供精确、信息全面的蛋白稳定性分析数据。 （3）动态光散射技术（DLS）用于检测水力学半径，均一性以及自相互作用 KD 图 1：激光 (紫色虚线) 被溶液中的粒子所散射，散射光（紫色波浪线）被用于检测粒子的布朗运动。 图 2 ：仪器采集散射光强度随时间的波动，较小的粒子扩散得更快，导致波动强度比较大的粒子更大。因此， 散射光强度的波动可用于提取扩散系数和计算粒子尺寸。 图 3：自相关函数描述了一个粒子在一段时间内在同一位置被发现的概率 (用 Tau 表示 )。当较大的粒子经 历较慢的布朗运动时，它们的自相关函数经历较慢的衰减，而较小、较快的粒子的自相关函数衰减得更快。 图 4：拟合自相关函数来确定扩散系数 D，并代入 Stokes-Einstein 方程。该方程与粒子的大小 (半径) 和扩 散系数有关，由此可以确定溶液中粒子的大小。 （4）静态光散射技术（SLS）与动态光散射不同，静态光散射检测的是溶液中所有粒子的平均散射光强度 , 计算样品的分子量以及第二维里系数 B22。 3. 简单、灵活的分析软件Prometheus Panta 配备了 Panta Control，Panta AutoControl 及 Panta Analysis 三个软件，助您轻松完成多参数蛋白稳定性分析。您可通过 Panta Control 软件在一次升温过程中同时且实时检测样品的Tm 、Tonset、Tturbidity、Tsize 和 Tscattering，单独运行光散射模块进行自相互作用分析，通过化学变性实验检测样品去折叠的自由能 ΔG 或进 行加速实验。Panta AutoControl 软件可帮您完成 1356 个样品的自动化筛选。Panta Analysis 软件可进行重复样品的统计分析以及数据叠加呈现。您可自定义所需呈现的检测参数，设定模板进行标准化分析并批量导出数据。4. 典型应用（1）抗体可开发性评估（2）可比性研究（3）多参数高通量制剂筛选（4）化学变性实验（5）高浓度样品聚集预测-DLS（6）高浓度样品聚集预测-SLS（7）片段化合物库筛选（8）结合分枝杆菌延伸因子药物筛选（9）蛋白液 - 液相分离药物开发（10）核苷酸糖转运蛋白底物调控机制（11）酶库高通量筛选（12）高通量膜蛋白去垢剂筛选

多功能蛋白稳定性分析仪—PSA-16 技术原理：蛋白质是生物体中广泛存在的一类生物大分子，具有特定立体结构的和生物活性以及诸多功能，根据这些功能我们可以将其应用于蛋白质的分子设计、蛋白质功能的改造、疾病的基因治疗以及新型耐抗药性药物的开发与设计甚至是发现生物进化的规律等先进科研领域上。因此，蛋白质具有非常重要的研究价值。进行蛋白质性质和功能研究的前提是获得稳定的蛋白质样品，而由于蛋白质自身性质的复杂性，难以保证获得的蛋白质样品是否具有正确的三维结构以及功能，因此急需一种技术手段或设备，对蛋白质的稳定性进行分析，确定获得蛋白质最ZUI适宜的缓冲液条件、蛋白质的长期储存稳定性等。另外在进行蛋白质-配体小分子相互作用研究时，因为需要筛选的小分子配体数量巨大，因此也急需一种技术手段或设备，可以高通量的对配体结合进行筛选。蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280 nm的紫外光激发并释放出荧光，其荧光性质与所处的微环境密切相关。蛋白变性过程中，色氨酸从疏水的蛋白内部逐渐暴露到溶剂中，荧光释放的峰值也从330 nm逐渐转移到350 nm。差示扫描荧光法(differential scanning fluorimetry, DSF)是一种方便快捷的高通量药物筛选及靶标发现的方法，通过荧光染料或蛋白内源荧光信号监测升温过程中蛋白构象的变化计算其熔解温度Tm（折叠蛋白与去折叠蛋白相等时的温度）。该方法具有蛋白样品损耗少、通量高、温度变化范围广及数据准确等优点，被广泛用于蛋白质稳定性（蛋白质热稳定性参数及其影响因素）、蛋白结构和构象、蛋白-配体相互作用及蛋白质稳定剂、抑制剂、辅助因子等领域的研究。染料法DSF最常用的是SYPRO Orange染料，SYPRO Orange 是一种环境敏感的疏水染料，当温度升高时，蛋白去折叠，疏水部分暴露出来，染料与蛋白质的疏水部分特异性结合，荧光增强。在有特定化合物或配体结合的情况下，蛋白稳定性会上升，表现为熔解温度的上升。内源DSF（intrinsic DSF）则是基于蛋白去折叠过程中色氨酸发射光谱的位移进行检测。通过检测温度变化/变性剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光（350 nm/330 nm比值）的改变，获得蛋白的热稳定性(Tm值)、化学稳定性（Cm值）等参数。相比传统的方法，无需添加染料，通量高，样品用量少，数据精度高。 产品介绍：多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16是一款无需加入荧光染料、高通量、低样品消耗量检测蛋白质稳定性的设备。该设备基于内源差示扫描荧光技术（intrinsic fluorescence DSF），通过检测温度变化/变形剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光的改变，获得蛋白质的热稳定性(Tm值)、化学稳定性（Cm值）等参数。可应用于蛋白缓冲液条件筛选及优化、小分子与蛋白结合情况的定性测定、蛋白质修饰及改造后的稳定性测定、蛋白变/复性研究、不同批次间蛋白稳定性对比等多个方面。基于内源差示扫描荧光技术（intrinsic fluorescence DSF），在无需添加外源染料的条件下，对蛋白进行升温变性，通过内源荧光和散射光的变化与三级结构变化的关系，PSA-16可用于测定不同buffer中蛋白的Tm值变化，获得蛋白质正确折叠的最ZUI优buffer条件；测定不同detergent条件下膜蛋白Tm值，进行detergent筛选；测定不同添加剂对蛋白稳定性的影响；测定添加配体后Tm值变化进行配体结合筛选；测定蛋白中变性部分的比例，进行质量控制；测定蛋白Tm值与浓度的相关性，获得最ZUI优蛋白浓度进行后续结晶等实验；测定蛋白去折叠过程，进行蛋白复性条件筛选；测定蛋白folding enthalpy，研究蛋白的长期稳定性；测定不同批次和存储后的蛋白的稳定性，并进行相似性评分，对蛋白进行质量控制。多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16，无需对蛋白进行荧光标记，可以直接测定蛋白在不同缓冲液条件中的Tm值，进行缓冲液筛选和优化；同时还可以测定添加不同配体化合物对蛋白稳定性的影响，通过Tm值变化进行配体结合筛选。PSA-16满足我们目前对于蛋白质稳定性分析的迫切需求。主要功能：多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16可用于评估蛋白（抗体或疫苗）热稳定性、化学稳定性、颗粒稳定性等特性，实现非标记条件下的高通量的抗体制剂筛选、分子结构相似性鉴定、物理稳定性、长期稳定性、质量控制、折叠和再折叠动力学研究等功能。★ 蛋白热稳定性分析★ 蛋白化学稳定性分析★ 蛋白等温稳定性分析★ 蛋白颗粒稳定性分析★ 免标记热迁移实验（dye-free TSA）★ 蛋白去折叠、再折叠、结构相似性分析★ 蛋白质量控制分析 主要特点：多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16基于内源差示扫描荧光（ifDSF）技术，广泛应用于蛋白质稳定性研究、蛋白质类大分子药物（抗体）优化工程、蛋白质类疾病靶点的药物小分子筛选和结合力测定等领域，具有快速、准确、高通量等诸多优点。蛋白质中色氨酸/酪氨酸的荧光性质与它们所处的环境息息相关，因此可以通过检测蛋白内部色氨酸/酪氨酸在加热或者添加变性剂过程中的荧光变化，测定蛋白质的化学和热稳定性。PSA-16采用紫外双波长检测技术，可精准测定蛋白质去折叠过程中色氨酸和酪氨酸荧光的变化，获得蛋白的Tm值和Cm值等数据；测定时无需额外添加染料，不受缓冲液条件的限制且测试的蛋白质样品浓度范围非常广（10 µ g/ml - 250 mg/ml），因此可广泛用于去垢剂环境中的膜蛋白和高浓度抗体制剂的稳定性研究。此外，PSA-16具有非常高的数据采集速度，从而可提供超高分辨率的数据。同时PSA-16一次最多可同时测定16个样品，通量高；每个样品仅需要15 uL，样品用量少，非常适合进行高通量筛选。PSA-16操作简单，使用后无需清洗，无维护成本。主机参数：★ 测定参数：Tm、Cm、ΔG等；★ 样品通量：16个；★ 样品体积：≤20 uL；★ 检测器：检测330+/-5 nm和350+/-5 nm两个波长的信号；★ 检测模式：快速逐个扫描，1秒钟采集一次信号；★ 激发光源：LED，波长280 nm；★ 蛋白检测浓度范围：0.01-200 mg/ml；单次实验即可涵盖此浓度范围；★ 测定过程无需外源染料，无需标记；★ 温控范围：15-110度；★ 变温速度：0.1-15度/分钟；★ 温度准确性：+0.05度；★ Tm重复性：同一台机器16个重复样品CV小于1%；★ 对缓冲液条件无限制，可测定去垢剂环境中的膜蛋白；★ 能够实现热稳定性、化学稳定性、胶体稳定性、等温稳定性、质量控制等测定；★ 仪器无需定期更换配件，实验完成后无需对仪器进行清洗维护； 耗材参数：★ 耗材：一次性耗材，无需清洗；成本小于10人民币/样品；★ 样品管采用高纯度石英材质，紫外透过率高，可检测低浓度的蛋白样品★ 一次性耗材样品管，样品不接触仪器内部，无需清洗和再生★ 八联排设计，使用灵活，适配多通道移液器进样★ 可密封式设计，防止实验过程中的样品蒸发应用领域：多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16应用涵盖植物、生物学、动物科学、动物医学、微生物学、工业发酵、环境科学、农业基础、蛋白质工程等多学科领域。蛋白质是最终决定功能的生物分子，其参与和影响着整个生命活动过程。现代分子生物学、环境科学、动医动科、农业基础等多种学科研究的很多方向都涉及蛋白质功能研究，以及其下游的各种生物物理、生物化学方法分析，提供稳定的蛋白质样品是所有蛋白质研究的先决条件。因此多功能蛋白质稳定性分析系统在各学科的研究中都有基础性意义。 1. 抗体或疫苗制剂、酶制剂的高通量筛选2. 抗体或疫苗、酶制剂的化学稳定性、长期稳定性评估、等温稳定性研究等3. 生物仿制药相似性研究（Biosimilar Evaluation）4. 抗体偶联药物（ADC）研究5. 多结构域去折叠特性研究6. 物理和化学条件强制降解研究7. 蛋白质变复性研究（复性能力、复性动力学等）8. 膜蛋白去垢剂筛选，膜蛋白结合配体筛选（Thermal Shift Assay）9. 基于靶标的高通量小分子药物筛选（Thermal Shift Assay）10. 蛋白纯化条件快速优化等 抗体蛋白16次平行测定结果样品Tm值（℃）样品Tm值（℃）176.9976.0276.81076.1376.61176.3476.21276.2576.11376.5676.51476.8776.71576.7876.81677.5Tm平均值（℃）76.5CV0.58%l 仪器无需定期更换配件，仪器使用时无需预热及预平衡，实验完成后无需对仪器进行清洗维护 l 整机为一体化设计，内置仪器控制和数据分析电脑 l 样品管采用高纯度石英材质，紫外透过率高，可检测低浓度的蛋白样品 l 一次性耗材样品管，样品不接触仪器内部，无需清洗和维护 l 八联排设计，使用灵活，适配多通道移液器进样 l 可封闭设计，防止实验过程中的样品蒸发软件具备数据比对功能，可通过热变性曲线对蛋白进行相似性评分完善的数据管理功能 账户及权限管理功能 用户操作记录功能实际案例：多功能蛋白稳定性分析仪PSA-16推出市场后，在短短时间内测试过各种不同类型的样本，在多个客户实验室进行现场DEMO，数据显示测试结果良好，重复性优异，相关参数达到甚至超过国外同类产品的水平。