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全自动分立式分析技术来源于目前广泛应用于临床检测的全自动生化分析仪。二十多年前,全自动生化分析技术在临床检测领域的出现,使临床检测从此告别了的手工、半自动的检测时代,迈入到自动化、标准化和信息化的新阶段。每小时多达数百乃至上千测试的分析系统相继出现在各医院的理化实验室,临床检验也由此建立起了越来越完善的实验室内和实验室间的质量控制系统。近年来,国家相关部门越来越重视对水质研究和检测工作,全国各地水质实验室的常规检测任务日益繁重,样本数量的快速增长,报告周期的逐步缩短,特别是应对水质突发事件时,亟需实验室在标准化、自动化和信息化的基础上提升快速、准确、低成本的批量检测能力。针对水质分析实验室的应用特点和检测要求,将临床全自动分析系统加以改进和重新设计研发的全自动分立式水质分析仪符合水质环境检测对样本多样性和灵活性的需求,同时完好地发挥了操作简单、检测通量高、运行成本低等优点。全自动分立式检测技术克服了通道型仪器(如流动注射分析仪)的限制和流通技术(如流通比色池分析仪)的诸多弊端,采用分立式反应和直读技术,将手动的比色法检测完全实现自动化,通过机械式移液针自动进行加样品、加试剂、搅拌、冲洗、孵育显色和比色检测,再通过校准曲线自动计算待测物质的浓度值。从样本加入到结果报告的完整控制和自动化运行无需人为介入,彻底消除了由手工操作造成的人为误差。全自动分立式水质分析仪可实现水质样本中不同指标的任选式并行检测,其开放性和灵活性更为实验室的科研工作提供了一个很好的分析检测平台。另外,该技术采用微升级反应体系,提高了检测速度,微量的样品和试剂消耗极大地降低了每个测试的检测成本。自动化分析流程中各个精密部件的灵活运行能够确保系统误差在可接受范围之内,大大提高了检测结果的准确性和重现性。目前,全自动分立式水质分析技术可广泛应用于饮用水、地表水、地下水、生活污水、工业废水和土壤浸出液的快速检测。
Qsep100全自动核酸分析系统,基于毛细管电泳原理。毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE),又叫高效毛细管电泳(HPCE)是利用带电性不同的粒子在电场中迁移,在泳动过程中物质的各组分被分离。被分离物质的迁移率取决于分子的结构、形状和电荷数量等因素,同时受溶液pH值、离子强度、粘度和两性电解质因素的影响。是近年来发展最快的分析方法之一。Qsep100全自动核酸分析系统,能代替传统的凝胶电泳,无需制胶,无需接触到核酸染料,无需照胶,PCR产物直接上样,全自动;仪器会自动生成电泳峰图,和凝胶电泳图。很大节省了我们实验室的工作量,并且提高了我们对PCR产物研究的精度,以及提高了我们检测PCR的标准化。 这个仪器的使用很简单,只需简单几个步骤即可完成设置,进行检测。我今天检测两个样本的扩增相同引物,目的是首先检验PCR体系中有无,有效的扩增;在有扩增的基础巡航比较两个样本的大小,下面为大家介绍下机器的使用和分析流程。第1步,打开机器电源,通过数据线与电脑连接,在电脑上插入机器密钥(一个类似U盘的东西,为了保证使用者的数据不被他人随意乱动,设计了密钥,不使用密钥无法打开程序),打开程序,进行设置;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120921_390351_1908808_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120922_390352_1908808_3.jpg第2步,设置新的检测Project(此步骤的目的类似建立一个文件夹将本次所做的DATA存储在这里),将机器与电脑连接,这是仪器画面呈现彩色,将待检样本和Buffer放入指定位置;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120923_390353_1908808_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120923_390354_1908808_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120924_390355_1908808_3.jpg 第3步,插入卡夹(内含一个毛细管,产物都在卡夹中进行电泳并检测),卡夹与机器连接,卡夹图片呈现彩色,这是我们可以看到机器和卡夹的图片都变成彩色,这也就说明机器是正常待机状态,可以正常使用;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120925_390356_1908808_3.jpg第4步,选择检测的方式(一个类似检测程序一样)和我的2个检测样品的位置(给检测样本定位,这样才好确认吸取检测样本进行检测),点击RUN;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120926_390357_1908808_3.jpg第5步,点击RUN后,机器为您自动检测,所选位置的样本,并把相应样本的数据(电泳峰图和模拟的凝胶电泳图),保存到你选择的路径;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120926_390358_1908808_3.jpg第6步,对所得的2个样本的数据进行分析,包括用自建的Maker对所得样本进行大小计算,或者对几个样本之间进行比较;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209120930_390359_1908808_3.jpgSample A计算得出273bp,从峰看此体系扩增产物比较特异,20bp前面那个峰通过判断是杂峰,不计算如内。
自动生化分析仪的原理、构成及使用一、自动生化分析仪的功能及特点 自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、混合、保温、比色、结果计算、书写报告等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。它可进行定时法、连续监测法等各种反应类型的分析测定。除了一般的生化项目测定外,有的还可进行激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析方法的应用。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。 二、自动生化分析仪的分类 自动生化分析仪有多种分类方法,最常用的是按其反应装置的结构进行分类。按此法可将自动生化分析仪分为流动式和分立式两大类。所谓流动式自动生化分析仪是指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。过去说得多少通道的生化分析仪指的就是这一类。存在较严重的交叉污染,结果不太准确,现已淘汰。 分立式自动生化分析仪与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的,不易出现较差污染,结果可靠。 三、自动生化分析仪的构成 因为自动生化分析仪是模仿手工操作的过程,所以无论哪一类的自动生化分析仪,其结构组成均与手工操作的一些器械设备相似,一般可有以下几个部分组成: 1、样品器:放置待测样本、标准品、质控液、空白液和对照液等。 2、取样装置:包括稀释器、取样探针和输送样品和试剂的管道等。 3、反应池或反应管道:一般起比色皿(管)的作用。 4、保温器:为化学反应提供恒定的温度。 5、检测器:如比色计、分光光度计、荧光分光光度计、火焰光度计、电化学测定仪等。不同仪器配置不同。 6、微处理器:是分析仪的电脑部分,又叫程序控制器。控制仪器所有的动作和功能,使用者可通过键盘与仪器“对话”,同时电脑还能接受从各部件反馈来的信号,并作出相应的反应,对异常情况发出一定的指示信号。分析软件和分析结果一般贮存在磁盘中,可共查询。 7、打印机:可绘制反应动态曲线和打印检验报告单等。 8、功能监测器:显示屏就是其中一部分,可查看反应状态、人机“对话”的情况、当前仪器工作状态、分析结果等。 四、流动式自动生化分析仪 流动式自动生化分析仪又可分为空气分段系统和非分段系统。前者是流动式分析仪中最典型的一种。 (一)空气分段系统 这种分析仪的特点是通过比例定量泵挤压弹性样品管、空气管和试剂管(通称“泵管”),将样品依次连续地吸入并沿样品管输送,另一方面由空气管吸入的气泡将由同样原理吸入并在试剂管道中连续流动的试剂分成均匀的节段,样品流和试剂流在连续向前流动的过程中相遇、混合、透吸(必要时)、保温、反应及被测定。整个分析过程是液流在管道中连续流动的过程中完成的。 (二)非分段系统 非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液,这样,在管道中连续流动的液体不被分段。非分段系统可再分为流动注入系统和间隙系统。 1、流动注入系统:该系统的组成与空气分段系统相似,但某些结构和工作原理有所不同,空气分段系统是利用气泡分段来防止管道中各反应液在流动过程中的交叉污染,而流动注入系统则是通过将样品依次注入连续流动的试剂流管道中来达到防止交叉污染的目的的。 2、间隙系统:该系统的结构、组成和工作原理与流动注入系统相似,但其特点是每一次进样都必须在前一样品的分析过程结束后(包括管道的清洗)才能开始,而不能连续地依次进样,每次进样间有一时间间隙,故有人称为不连续流动式分析仪。 五、分立式自动生化分析仪 分立式为第二代自动生化分析仪,它与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的。 称为第三代自动生化分析仪的离心式自动生化分析仪,也应属于分立式。因为在离心式分析仪中,每个待测样品都是在离心力作用下,在各自的反应槽内与试剂混合,并完成化学反应,继而被测定的。离心式分析仪属于“同步分析”,在离心力的作用下,各待测样品几乎同时与试剂混合、反应并被测定后打出报告;而其它分析仪是“顺序分析”,即各待测样品依次与试剂混合、反应先后被测定。 袋式自动生化分析仪也应属于分立式,它是用试剂袋代替反应管和比色皿,测定时每个待测样品在各自的试剂袋内进行反应并被检测。还有一种称为“干式自动生化分析仪”也属于分立式。它的主要特点是采用固相化学技术,即将试剂固相于胶片或滤纸小片等载体上。测定时使一定量的待测样品分布于一张试纸片上,一定时间后用反射光度计测定。 分立式自动生化分析仪,是目前各实验室普遍使用的自动生化分析仪,一般都可以任意选择测定项目,故称为任选式自动生化分析仪。下面将重点介绍任选式自动生化分析仪。 六、任选式自动生化分析仪的主要部件 (一)加样系统 1、样品转盘:可放置小型样品杯数十只。有的分析仪可直接用盛样本的试管,有的还附有条形码阅读装置,能识别样本试管上的条形码信息,不需给样本编号,也不必输入病人资料即可打印出该病人的化验报告。 2、试剂室(仓):不同的分析仪试剂室可容纳的试剂盒数量不同,一般可容纳20多种试剂。有的试剂室带有冷藏装置,带有条形码识别装置的试剂室试剂可以任意放置试剂盒位置。 3、取样装置:有的分析仪取样本和取试剂公用同一采样针,由内部的分流阀控制取样本和取试剂;有的仪器有两套取样装置,分别取样本和取试剂。采样针前端有液面传感器防止空吸或采样针外壁液体挂淋,采样臂中有预温装置。如果采用多试剂分析方法,将占用试剂室中试剂盒位置,会减少测定项目。 (二)比色系统 1、光源:大多数分析仪使用卤素钨丝灯,工作波长325~800nm。有的分析仪使用氙灯,工作波长285~750nm。 2、比色杯:有分立式比色杯、分立式转盘式比色杯、离心式比色盘、流动池。干式生化仪不需要比色杯,袋式生化仪由试剂袋经挤压自动形成比色杯。比色杯光径6-7mm,少数为10mm。 比色杯中的反应液需要恒温,有37℃、30℃、25℃三档可选择,有的固定为37℃。多数用吹入恒温空气的方式,也有用恒温水浴或半导体温控装置的。为了保证比色杯中反应液有±0.1℃的精确度,分析仪的环境温度必需保持18~30℃,室温波动不宜超过2℃。 3、单色器:(1)干涉滤光片(2)光栅 4、检测器:(1)光电倍增管,已很少用。(2)列阵固态光敏二极管。(三)供排水系统 自动生化分析仪中有很多供水管道与电磁阀。只读存储器中软件参数控制电磁阀与输液泵供给各个部件的冲洗与吸液,最后排出机外。随机存储器内的分析参数控制电磁阀与注射器的步进电机,供应样本、试剂和稀释用水。有的生化仪还能自动冲洗比色杯供反复使用。(四)数据处理系统 每个项目的检测结果暂时储存在随机存储器中,待某个样本所需的项目全部检测完毕,由微机汇总打印出综合报告单。微机的存储器中可以存储相当数量的病人数据与逐日的室内质控数据,随时可以按指令调出,在荧光屏上显示或打印,也可存储在软盘中长期保存,随时调阅。 七、任选式自动生化分析仪的分析顺序 每份样品可以任选试剂室内预置试剂盒的一项或全部项目的检测。微机按输入的指令,安排项目检测次序,一般先做孵育时间长的终点法,后做监测时间短的速率法,以便恒速打印综合报告单。当指定样本进入待测位置时,微机指令试剂盒进入试剂取样位置,按所测项目的参数由加样系统定量取样,同时比色杯按微机的指令到达指定位置加样。生化仪的分析速度与仪器加样周期的时间有关。加样周期的时间越短分析仪的速度越快。双试剂法占用两个加样周期,分析速度减半。 八、任选式自动生化分析仪的主要分析参数 1、试验代号 14、连续监测时间 2、试验名称 15、标准液数量 3、试验方法 16、标准液浓度 4、试验类型 17、重复校标次数 5、温度 18、计算因子(F值)6、波长:可选择主波长和次波长。 19、计量单位 7、反应类型 20、小数点位数8、终点法零点读数 21、底物耗尽 9、样本量与稀释水量 22、线性度 10、试剂量与稀释水量 23、试剂吸光度上限与下限 11、样本空白 24、线性范围 12、孵育时间 25、参考范围 13、延迟时间 26、等等等等