蜂蜜掺假

蜂蜜是一种常见的健康食品，口味香甜，营养丰富。蜂蜜主要成分是糖类，包括单糖、二糖、低聚糖和多糖等，此外还含有人体需要的大部分矿物质和各种维生素、有机酸、氨基酸、生长素等营养物质，所以其药用价值也非常广泛，可作为中成药辅料，也对神经衰弱等慢性疾病有良好的辅助疗效。由于蜂蜜广泛的营养价值，在市场上广受欢迎，但假冒伪劣产品随之而来，且名目繁多，对食品安全构成重大威胁。有关蜂蜜掺假检测方法较多，这里分两类进行简单汇总：现有标准和法规方法、近年来新技术新方法。蜂蜜掺假相关综述文章也比较多[1-3]，感兴趣的读者可查阅相关文章。一、现有标准和法规方法国标GB14963-2011食品安全国家标准蜂蜜中定义，蜂蜜是“蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物混合后，经充分酿造而成的天然甜物质”,其中明确规定果糖和葡萄糖含量至少要达到60%，蔗糖含量不得超过10%。市场上蜂蜜掺假形式主要包括添加葡萄糖、果糖、蔗糖、C3 植物糖浆（甜菜糖浆、大米糖浆）、C4植物糖浆（玉米糖浆、甘蔗糖浆）、高果糖浆和果葡糖浆等等。针对添加C4植物糖浆掺假，依据国标GB/T 18932.1-2002 蜂蜜中碳-4植物糖含量测定方法-稳定碳同位素比率法可鉴定，但其不能鉴别添加C3植物糖浆的蜂蜜。国标GB/T 21533-2008 中，以淀粉糖浆中含有的五糖以上的低聚糖为标志物， 将低聚糖富集后采用阴离子交换色谱－脉冲安培检测器（HPAEC -PAD） 检测，可以实现对蜂蜜中淀粉糖浆掺假的检测。2020版药典也是按照五糖以上的低聚糖为标志物，检测方法为薄层色谱法。国标GB/T 18932.2-2002 蜂蜜中高果糖淀粉糖浆测定方法-薄层色谱法对蜂蜜中寡糖多糖进行定性测定，也可鉴别蜂蜜中是否含有淀粉糖浆。二、近年来新技术新方法现代分析技术的发展为蜂蜜的鉴别提供了越来越多的新方法，屈亮亮等[4]采用基质辅助激光解吸电离质谱（MALDI-MS）分析了蜂蜜及其掺假样品中的糖类以及小分子代谢物。在正离子模式下，通过比较蜂蜜样品和掺假样品的MALDI-MS谱图在多糖聚合度以及糖类分布趋势上的差异，可对掺假样品进行快速鉴别。在负离子模式下通过寡糖异构体组成上的差异，可对掺假样品进行高通量鉴别。刘彩云等[5]采用高效液相色谱-电化学联用技术对中蜂蜂蜜中所含的 12 种酚类化合物进行了鉴别和含量测定，构建了陕西不同地区中蜂蜂蜜的酚类色谱指纹图谱。并对共有峰进行匹配，提取特征峰信息，可对掺假蜂蜜进行鉴别。杨远帆等[6]通过测定蜂蜜和果葡糖浆中脯氨酸含量后发现，蜂蜜中氨基酸的量随果葡糖的掺入量的增加呈线性减小趋势，由此建立了一种基于测定脯氨酸含量鉴别蜂蜜掺假的有效方法。杨心浩等[7]通过研究，建立了采用红外光谱测定蜂王浆品质并基于 NIR 光谱结合水光谱组学建立了检测麦卢卡蜂蜜掺假糖浆的新方法。核磁共振技术结合化学计量学分析方法也成功运用于蜂蜜和其它食品的分析检测中。Bertelli 等[8]比较了一维（1D）和二维（2D）高分辨核磁共振（nuclear magnetic resonance，NMR） 对掺杂糖浆的蜂蜜的检测效果， 发现1D 核磁谱有较高的预测正确率（95.2%）。不同的蜂蜜来源组成不同产生的气味不同， 从而在电子鼻气体传感器中产生的指纹图谱也不同。裴高璞等[9]发现电子鼻对掺假蜂蜜比较敏感，LDA模式识别算法可以将纯蜂蜜样品与掺假蜂蜜样品很好的区分开，识别正确率可达94.7%。江瑶等[10]基于代谢组学技术，采用超高液相色谱串联四级杆轨道离子阱高分辨质谱（UHPLC-Q Exactive Obitrap LC-MS）对样本原始数据进行采集，获取的数据通过多元统计分析实现对比较样品组的区分，找到的可能的标志性代谢物进行二级质谱分析寻找碎片离子，初步完成标志性代谢物的定性工作。对真蜂蜜与已知劣质蜂蜜进行区分。由于蜂蜜成分的复杂性，单一的鉴别方法也可能无法达到鉴定目的，这时可以考虑将多种方法联合使用, 多组分多指标对蜂蜜进行检测。 根据2020版药典蜂蜜含量测定项[11]下方法采用聚合物氨基柱分析4种常见糖，使用电雾式检测器（CAD）替代示差检测器进行测定取得了较好的效果。CAD作为一款通用型检测器，被2020版药典所收载，其具有良好的动态范围、一致的响应和出众的灵敏度，适用于大部分非挥发性和半挥发性有机物的检测，该检测器用于糖的检测，较示差检测器灵敏度更高，而且适用于梯度洗脱条件。图1是CAD测定某蜂蜜样品中4种常见糖的谱图。图1 蜂蜜中4种糖含量测定1:果糖 2:葡萄糖 3:蔗糖 4:麦芽糖近年来常用的蜂蜜掺假手段中，利用果葡糖浆掺假[12,13]形式最为普遍。果葡糖浆是由植物淀粉水解制得，如玉米或红薯淀粉，加工简单，成本低廉。蜂蜜中不含五糖（DP = 5）以上的寡糖，但在果葡糖浆中却广泛存在。2020版药典据此在蜂蜜检查项下采用薄层色谱法对寡糖进行鉴别[11]，该方法灵敏度差、误差较大，存在很大的局限性。 赛默飞采用液相色谱法，聚合物氨基柱分离、电雾式检测器（CAD）检测，可以测定不同聚合度的寡糖，并依据五糖（DP = 5）以上寡糖的存在作为蜂蜜中果葡糖浆的判定指标，方法灵敏度高，并且具有很好的普及性。混合对照品与样品测定谱图见图2和图3。图2 寡糖混合对照品1:麦芽糖和异麦芽糖 2:麦芽三糖 3:麦芽四糖 4:麦芽五糖 5:麦芽六糖 6:麦芽七糖图3 果葡糖浆和蜂蜜样品叠加（1-果葡糖浆，2-蜂蜜样品）1:麦芽五糖 2:麦芽六糖图3可以看出该样品中未检出聚合度5以上（DP 5）的寡糖。为了考察方法准确度，我们在空白蜂蜜样品中添加麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖进行了加标回收率实验，添加浓度水平分别为为0.10、0.25和0.50mg/g，加标回收率在95.2%-100.7%之间，证明方法准确度较高。另外本方法灵敏度较高，添加1%果葡糖浆即可明显检出。HPLC-CAD方法可以方便地测定蜂蜜中糖类营养物质含量，对掺假蜂蜜中的果葡糖浆具有高灵敏度的检出，方法操作简便，保障了蜂蜜的品质，为百姓餐桌食品安全保驾护航。参考文献：1. 岳锦萍, 徐雨欣, 范佳慧, 邢 璇, 任 虹. 食品安全质量检测学报, 2018, 9（19）: 5138-5145.2. 郑优，王欣，毛锐. 食品与发酵科技, 2018,54（6）:76-82.3. 杜宗绪.保鲜与加工, 2015, 15（5）: 67-71.4. 屈亮亮. 基于MALDI的高通量蜂蜜糖浆掺假检测及植物源鉴别分析［D］. 南昌：南昌大学.5. 刘彩云. 中蜂蜂蜜酚类色谱指纹图谱构建及加工对蜂蜜中酚类物质影响［D］. 西安：西北大学.6. 杨远帆，倪辉，吴黎明．茚三酮法测定蜂蜜及果葡糖 浆中的氨基酸含量［ J］．中国食品学报, 2013, 13 (2) : 171 －176．7. 杨心浩，基于红外光谱分析蜂王浆品质及鉴别麦卢卡蜂蜜掺假的方法研究［D］.广州：暨南大学.8. BERTELLI D, LOLLI M, PAPOTTI G, et al. Detection of honey adulteration by sugar syrups using one-dimensional and two-dimensional high-resolution nuclear magnetic resonance ［J］. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2010, 58（15）: 8495-8501.9. 裴高璞, 史波林, 赵镭, 等.典型掺假蜂蜜的电子鼻信息变化特征及判别能力［J］.农业工程学报, 2015, 31（1）: 325-331.10. 江瑶, 基于代谢组学技术寻找蜂蜜标志性代谢物并探究其应用［D］.济南: 山东师范大学. 11. 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典 [ M ] . 一部. 北京: 中国医药科技出版社, 2020: 374-375. 12.任雪梅, 胡梅, 周传静, 王文特, 吴裕健. 山东农业科学, 2013, 45(2): 117-119.13.黄文诚, 蜜蜂杂志, 2010, 4: 18-19.赛默飞世尔科技（中国）有限公司刘兴国供稿附：食品安全事关人民群众的身体健康和生命安全，关系中华民族的未来。俭以养德、诚信为本是中华民族的传统美德，保障食品安全更需要尚俭崇信、德法并举。进入全面小康社会，人民群众对食品安全营养健康的需求不断提升，必须坚持“四个最严”，严格源头治理，严格过程监管，严厉打击食品安全违法犯罪。全国食品安全宣传周（China Food Safety Publicity Week），是国务院食品安全委员会办公室于2011年确定在每年六月举办的，通过搭建多种交流平台，以多种形式、多个角度、多条途径，面向贴近社会公众，有针对性地开展风险交流、普及科普知识活动。2021年全国食品安全宣传周活动已于6月8日正式启动，而本次活动的主题为“尚俭崇信 守护阳光下的盘中餐”。作为保障食品安全的不可或缺一环，科学仪器在“保护舌尖安全”的过程中发挥了非常重要的作用！为此仪器信息网在食品安全宣传周期间特推出专题“关注食品安全——仪器人在行动”，一起领略下仪器人守护食品安全的风采！

布鲁克近日推出了NMR Honey-Profiling™ 模块的最新版本，用于对不断变化的蜂蜜掺假模式进行高级检测。新模块将不断增长的数据库扩展到28000个蜂蜜参考样本，涵盖50多个国家、100个单花品种和许多多花品种。它使蜂蜜生产商和经销商能够检查纯度、植物来源、原产国，并识别非典型特征，以便进一步检测。 美国马萨诸塞州比勒里卡，2021年7月12日报道。布鲁克近日推出了NMR Honey-Profiling™ 模块的最新版本，用于对不断变化的蜂蜜掺假模式进行高级检测。新模块将不断增长的数据库扩展到28000个蜂蜜参考样本，涵盖50多个国家、100个单花品种和许多多花品种。它使蜂蜜生产商和经销商能够检查纯度、植物来源、原产国，并识别非典型特征，以便进一步检测。基于核磁共振（NMR）技术的快速、全面Honey-Profiling 3.0筛选工具，以一种可靠的、完全自动化的按键式简便方法评估蜂蜜品牌和真实性。此模块分析蜂蜜样品的1H-NMR谱图，确定构成其独特“指纹图谱”的特定成分，并将其与精心设计的蜂蜜参考数据库进行比较。全新的核磁共振Honey-Profiling模块包括额外的地理和品种标记，这进一步加强了对掺假的检测，比如糖浆或低成本蜂蜜等等。 作为一种高价值食品，蜂蜜特别容易受到出于经济动机的掺假行为的影响，这可能会影响整个价值链，不仅影响消费者的信任，还可能损害蜂蜜生产商或分销商的声誉。掺假是过去十年来原蜜价格下跌的部分原因，使养蜂人的生计受到威胁，而由于需求增长，向消费者收取的蜂蜜价格一直在增加。采用这种复杂的、能够检测新的掺假模式的分析方法，对于保护蜂蜜的真实性、完整性和经济可行性至关重要。 布鲁克食品分析解决方案高级市场经理Thomas Spengler评论道：“这不仅仅是蜂蜜中掺入糖浆问题。出于经济动机的蜂蜜掺假影响了养蜂业的生存能力，鉴于蜜蜂在农作物授粉中发挥的重要作用，养蜂人数量的持续下降也对全球粮食安全构成了威胁。核磁共振（NMR）作为一种强大的多标志物和非靶向技术，在世界范围内被越来越多地采用，以解决新的和更复杂的掺假模式。” 全球监管机构、政府和行业正在迅速认识到NMR在打击欺诈活动、保护消费者和品牌以及加强供应链完整性方面的潜力。例如，印度的出口检验委员会规定，从2020年8月起，所有出口到美国的蜂蜜都必须进行NMR检测。美国、加拿大、澳大利亚、新西兰、爱沙尼亚、西班牙和德国的政府机构正在采用NMR，国际养蜂人协会联合会（APIMONDIA）也建议采用NMR等更先进、更强大的方法来检测多种掺假模式。 为满足市场需求，布鲁克还推出了NMR FoodScreener Essential Honey，这是一个仅用于蜂蜜分析的系统，专为蜂蜜行业量身定做。这一极具成本效益的解决方案采用NMR Honey-Profiling方法，允许蜂蜜包装商实地进行蜂蜜分析，不需要NMR专业知识就可以操作谱仪。 阿根廷NEXCO S.A.的高级顾问Norberto Luis Garcia教授是NMR FoodScreener Essential Honey的首批采用者之一，他表示："NEXCO在世界各地拥有一众高净值客户，从商业角度讲，他们的选择是万众瞩目的，但他们对购买的蜂蜜也有最高的质量要求。在向欧盟、美国和日本等市场销售具有最高纯度和真实性保证的蜂蜜时，核磁共振检测已成为不可或缺的一步。" NMR Honey-Profiling 3.0 是布鲁克持续为蜂蜜行业提供强大检测工具的最新研发成果，以维持可持续和公平的业务，并捍卫蜂蜜作为天然健康食品的声誉。全新的布鲁克 NMR Honey-Profiling 模块可在布鲁克 NMR FoodScreener Essential Honey 和整个 NMR FoodScreener™ 平台上使用，这是一个自动化的核磁共振解决方案，同时也支持布鲁克 NMR Wine-Profiling™ 和 NMR Juice-Profiling™ 模块。 参考文献： APIMONDIA Statement on Honey Fraud, APIMONDIA, Jan 2020, http://honeycouncil.ca/wp-content/uploads/2020/02/STATEMENT-2020-FINAL-VERSION.docx.pdf [Accessed 05/10/21] 关于布鲁克布鲁克致力于支持科学家取得突破性的科学发现并开发新的应用以提升人类的生活质量。布鲁克的高性能科技仪器以及高价值分析和诊断解决方案，让科学家能够在分子、细胞和微观层面上探索生命和材料的奥秘。通过和用户的紧密合作，布鲁克致力于科技创新、提升生产力并实现用户的成功。我们的业务领域包括生命科学分子研究、应用和药物应用、显微镜和纳米分析、工业应用、细胞生物学、临床前成像、临床表型组学、蛋白质组学研究以及临床微生物学等。

为了促进蜂蜜优质优价，确保消费者权益，日前，中国蜂产品协会发布实施中国蜂产品协会团体标准《蜂蜜》。中国蜂产品协会负责人表示，制定团体标准必须严于和高于国家标准、行业标准和地方标准，这是国家规定的标准制定的基本原则。　　中国蜂产品协会制定的《蜂蜜》团体标准与《蜂蜜》国家标准相比主要增加了以下四项内容：　　一是增加了蜂蜜真实性判定的检验方法。新出台的中国蜂产品协会《蜂蜜》团体标准，明确了对蜂蜜掺假检测碳-4植物糖检验方法，并在“真实性要求”中增加了可以涵盖其他若干检验方法的语句表述“采用GB/T18932.1和已实施的国家标准、行业标准、本团体标准规定的其他方法”。　　二是蜂蜜中的主要理化指标优于国家标准。《蜂蜜》团体标准中规定的优级品和特级品两个等级的蜂蜜中水分、果糖和葡萄糖等蜂蜜的特征指标都优于《蜂蜜》国家标准。　　三是《蜂蜜》团体标准增加了《蜂蜜》国家标准中没有设定的一些理化指标，以确保蜂蜜的高质量。相比《蜂蜜》国家标准，《蜂蜜》团体标准增加了蜂蜜中酸度、羟甲基糠醛、淀粉酶活性、灰分和甘油等指标的检测并提出数值要求。　　四是《蜂蜜》团体标准划分了产品等级。《蜂蜜》团体标准根据蜂蜜的理化指标不同，分为合格品、优级品、特级品三个等级。符合《蜂蜜》国家标准的为合格品，符合《蜂蜜》行业标准的为优级品，符合协会《中国蜂产品证明标志》的蜂蜜质量要求并加贴《中国蜂产品证明标志》的为特级品。