环境荷尔蒙

水质对 LC-MS 分析痕量荷尔蒙的重要性前言随着分析仪器灵敏度不断提高，超痕量的物质也很容易被检测出来，所以实验人员也越来越重视试剂的纯度。如果用含有痕量杂质的水做LC-MS流动相，或制备标样和空白样 品，会导致错误的结果或者数据分析的困难。在很多国家，从环境中（也包括水路）检测出医药产品的存在。饮用水中存在痕量荷尔蒙的报道也越来越多，而这一类化合物很难被传统的水处理方法去除。这也影响到了LC-MS级别纯水，因为无论瓶装或直接纯化的LC-MS级别水都是由自来水制得。 目的本文的目的是研究无论自来水有没有被痕量激素污染，制备 LC-MS 级别超纯水的实验室纯水系统的适用性。 样品制备和检测方法样品收集：自来水：世界上多个国家自来水，包括西班牙、法国、芬兰、中国和印度超纯水：来自世界多个国家实验室纯水系统制备的LC-MS级别超纯水，包括西班牙、法国、芬兰、中国和印度。水样在运输及测试过程中必须使用硅酸盐玻璃器皿。 水纯化系统：1.波兰和印度： Milli-Q Integral with Millipak® final filter (EMD Millipore)2.法国： Milli-Q® Integral with LC-Pak® final filter3.中国和西班牙：Elix® and Milli-Q® Advantage with Millipak® final filter 水纯化系统生产的超纯水质量参数：印度：TOC: 48 ppb, Resistivity: 18.2 MΩcm，25C 其他国家：TOC1.SPE活化：5mL 甲醇(LiChrosolv® LC-MS, EMD Millipore)2.上样：15 mL/min，10 min 真空干燥3.洗脱：3mL甲醇，蒸发至1mL材料和方法：仪器： nLC-MS系统：HPLC：Agilent 1290nMS：Agilent 6420 QQQnHPLC仪器参数：Ø色谱柱：Purospher® STAR RP-18 endcapped(2μm) Hibar® HR 50-2.1 mm(EMD Millipore)Ø流速：0.5 mL/minØ进样量：样品40μL, 标样10μLØ溶剂A：含有1%乙酸的Milli-Q® 超纯水Ø溶剂B：高纯度乙腈(LC-MS LiChrosolv® , EMD Millipore)Ø梯度（min,%B）：TimeA%B%0100%02100%050100%60100%9100%013100%0 nMS参数: Capillary 4000 V, Nebulizer 37 psi, Drying gas N2, 7.5 /min, 300o C ESI+, MRM荷尔蒙检测：水样品中检测出如下荷尔蒙：结果与讨论：从污水处理厂流出的水中检测出低浓度（ng/L）荷尔蒙，这些水被直接排放至水路中，甚至被作为饮用水。如果自来水中存在痕量荷尔蒙，就要在超纯水应用于激素类物质的检测用于制备样品和标样，以及作为LC-MS流动相和空白之前，确保能够被纯水系统除去。使用标准加入法可以检测时9种不同的荷尔蒙。 荷尔蒙分析的方法检出限（MDL）为12-36 pg/L。使用LC-MS/MS检测出（IDL）的荷尔蒙浓度（图1、2和3）：1.Estradiol: 法国样品 265.40 ng/L 西班牙样品 297.92 ng/L2.Androsterone: 法国样品 515 ng/L, 西班牙样品1635 ng/L*西班牙样品*( 可能样品中存在荷尔蒙类似物使得检测含量过高)3.Corticosterone: 中国样品 14.91 ng/L相对应的，在这些水样对应的超纯水样品中并没有检测出荷尔蒙(MDL: 12-36 fg/L, IDL: 0.4-1.1 pg)结果和讨论：图1. 法国和西班牙自来水样品中Estradiol 的LC-MS/MS结果（左图）和Milli-Q® 纯水结果对比（右图，标样为1ppm的Estradiol）图2. 法国和西班牙自来水样品中Androsterone 的LC-MS/MS结果（左图）和Milli-Q® 纯水结果对比（右图，标样为1ppm的Androsterone）图3. 法国和西班牙自来水样品中Corticosterone 的LC-MS/MS结果（左图）和Milli-Q® 纯水结果对比（右图，标样为1ppm的Corticosterone） 结论w自来水中可能含有痕量荷尔蒙。为了满足实验室应用要求，自来水要通过各种纯化手段制备成超纯水。w作为水纯化系统的进水中如果可以检测出荷尔蒙（或类似物），在超纯水系统制备的纯水中已检测不出该类物质。w为LC-MS/MS实验选择合适的超纯水资源可以确保得到高质量的数据。w可以依靠正确的安装和良好的维护纯水系统来满足实验室LC-MS/MS分析对超纯水高质量的要求。

雨衣增塑剂超标，或致儿童性早熟? 　　近日，北京一场60年一遇的大暴雨让人心惊。夏季也是雷雨高发季，细心的父母，往往会为宝宝准备一件雨衣遮风避雨。但近日一项台湾的儿童玩具抽检报告显示，儿童雨衣DEHP塑化剂的含量超标196倍。尽管目前内地还没有专门针对儿童雨衣的国家标准，但儿童雨衣中的塑化剂和环境荷尔蒙壬基酚，究竟会对儿童造成什么样的危害?是否如传闻所说会造成“儿童性早熟以及男童生殖器官受损”? 　　雨衣一般都是人工合成的不同程度的化纤类产品，环保专家、国际食品包装协会秘书长董金狮介绍说：“雨衣的主要成分是聚氯乙烯，在儿童玩具和家具中都广泛使用。为了增加聚氯乙烯的弹性和柔韧性，会添加增塑剂(台湾称塑化剂)。” 　　董金狮解释说，增塑剂是一个大家庭，邻苯二甲酸酯类是使用最广泛、品种最多、产量最大的增塑剂，大约有20多种，其中邻苯二甲酸二辛酯(DEHP)是最重要的品种。这些增塑剂是不允许用于儿童食品和成人用的含油脂类食物的食品包装上的。DEHP等溶于油脂等非极性有机溶剂，但在水中溶解度很低，稳定性高，挥发性低。 　　“就像保鲜膜等膜类产品一样，儿童雨衣中也会添加增塑剂，但如果雨衣发硬、发脆了，其实就是氯乙烯单体没有联结上，增塑剂也会挥发，在挥发过程中，氯乙烯和增塑剂都会分泌出来。”董金狮进一步解释说，去年闹得沸沸扬扬的台湾产奶茶中食品添加剂“起云剂”中含有邻苯二甲酸酯增塑剂的风波历历在目，DEHP与聚氯乙烯塑料主体结构之间并不以化学键相结合，所以在使用过程中会不断从塑料中释放出来，污染环境。 　　增塑剂DEHP可通过呼吸道消化道进入人体 　　近些年来的研究表明，邻苯二甲酸酯可通过呼吸道、消化道和皮肤等途径进入人体，被世界卫生组织(WHO)公告为一种环境荷尔蒙，具有雌性荷尔蒙的作用，在体内会干扰人体的内分泌系统。如果孕妇体内的邻苯二甲酸酯浓度愈高，产下的男婴生殖器官阴茎短小、阴茎先天畸形、尿道下裂与隐睾症的风险就愈高。若在成年男性体内邻苯二甲酸酯浓度愈高，精子的数量就会愈少，精子品质和活动力也愈差，以及增加女性患乳腺癌的几率等等。目前美国、欧盟已针对邻苯二甲酸酯类建立规范，以减少邻苯二甲酸酯类对人体造成进一步的危害。 　　环境荷尔蒙壬基酚可用于服装，会污染环境 　　“与服装方面对于增塑剂含量没有明确规定一样，服装的相关国标中，也没有单个针对环境荷尔蒙壬基酚的标准。”董金狮解释说，环境荷尔蒙壬基酚在纺织品中的作用是染料中的成分，将雨衣染成五颜六色的，它是纺织印染助剂。“实际上在食品包装中壬基酚也是允许使用的添加剂，在服装中也是可以使用的。”董金狮说，之前某些知名运动服装品牌由于在生产过程中往水中大量排放壬基酚的事件，通过水循环进入环境中，富集在食物链中，并放大毒性，穿含有壬基酚过量的雨衣，也有可能通过皮肤进入人体，增加风险。 　　“以前报道的婴儿奶瓶、桶装水的水桶、罐头包装中含有双酚A，与壬基酚一样，都属于酚类物质，也都是环境荷尔蒙的一种，在足够的剂量下，它们会造成胚胎发育畸形，女孩性早熟，很早来月经，男性精子量不够，这些环境荷尔蒙对人类的危害是隐性和慢性的，但不是不存在的。”董金狮说，环境荷尔蒙不溶于水，但溶于丙酮，会造成对环境的污染。 　　国内儿童雨衣目前暂无相应国家标准 　　“今年8月1日开始正式实施的《儿童家具通用技术条件》国家标准中有对儿童用品和玩具中塑化剂含量的要求是小于、等于0.1%，在现行的《国家纺织产品安全技术规范》并不特别针对儿童雨衣，有对儿童使用的纺织产品的甲醛含量要求，a类纺织品需小于等于每公斤20毫克，ph值安全范围为4.0~7.5，要求不得检出分解性的芳香胺，但对塑化剂含量没有明确要求。”董金狮分析，目前国内儿童雨衣并没有与之针对的国家标准，只能由企业自行选择所依照的标准。“许多厂家并不了解这一标准，所以对增塑剂的含量没有控制 第二，标准本身并不明晰，尤其是服装类产品并没有对增塑剂提出明确要求。” 　　担心雨衣DEHP超标，不如少喝有增稠剂的饮料 　　“像奶茶等饮品，保鲜膜，雨衣，水桶、罐头、太空杯等塑料制品中都有可能有增塑剂、环境荷尔蒙物质，它们存在于空气、水、食物、家具等，无处不在。也正是因为其无处不在，它们可以在环境中富集在食物链中，再进入人体体内，与之相比，雨衣中DEHP和壬基酚过量，是会增加患病的风险，但并不能说是直接原因。”董金狮说，尤其是隔着许多衣服穿雨衣，而非直接接触皮肤时，很难说进入皮肤或是剂量大到足以造成直接伤害的证据。与其担心雨衣DEHP超标，不如少喝有添加剂、增稠剂、防腐剂、增塑剂的饮料，加热时揭开保鲜膜，不将其覆盖油脂性食物，不用保鲜膜包裹需要减肥的部位等。 　　不合格雨衣其实更易造成刺激性皮炎 　　北京大学第一医院皮肤性病科主任医师刘玲玲认为，不合格的雨衣在临床上更多的是造成刺激性皮炎和过敏性皮炎。生产雨衣的厂家对增塑剂在产品中的含量应该有明确的安全标准。由于雨衣穿着时间短，虽然皮肤可能会吸收微量增塑剂和环境荷尔蒙的化学物质，但对皮肤的影响不是很大。而对于越来越受重视的环境激素，水污染、海洋污染、土壤污染等都会增加环境刺激因素对人体潜移默化的危害性，这是对人群有危害的潜在因素，而不仅仅是个体安全。

为确保婴儿的安全与健康，欧盟宣布自3月1日起在欧盟境内禁止使用含有化学物质双酚A(BPA)的婴儿奶瓶。 　　尽管BPA的害处有多大还不能完全确定，欧委会认为有必要采取这样的行动，目的是尽量减小民众中最脆弱成员(婴儿)的健康受到BPA的危害。 　　据公报介绍，BPA广泛应用于婴孩奶瓶和食品容器的制造。在给婴儿喂奶过程中，低剂量的BPA物质会在高温状态下从含有BPA的奶瓶材料中分解出来进入溶液中。 　　美国政府卫生机构曾在2008年4月发布一份实验报告称，低剂量的BPA有致癌作用，高剂量的BPA与心血管病发病率有关。此外，BPA还有雌性荷尔蒙效果，可能会导致婴儿出现女性化变化。