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记得多年前,曾经梦想着能够好好做一份事业,不要安逸地生活,离开了原来工作几年的某食品研究单位,来到一个销售公司,从事装色谱柱工作。这段经历,让我感受到了酸甜苦辣,也明白了世态炎凉。也让我懂得,不能做机器的奴隶,而是要成为真正的社会人。当时,装色谱柱主要销售给浙江的一些医药企业。因为使用的填料和柱管都是进口的,而装填确实是我装填的,所以,说它进口也一点不为过。因为中国人也能装出好的色谱柱嘛。在我之前,该销售公司已经请别人装了30多支色谱柱。原本是先装填5μm填料的C18柱,本来领导以为需要花个一两个月才能够装填出来,但是,在领导的压力和同事帮助下,2周搞定。然后就开始了把采购的柱管和填料装填完成,测试,包装,登记入库……一切在哪炎热的夏季,每天装8根。不一会儿,两百根完成了。呵呵。自我感觉超级好。说到装色谱柱,也许很多朋友以为这个工作很细致,一定要在超级干净的环境中生产。实际上不然。环境差不多就可以了。到农村借一间平房,装个什么抽风的设备,就可以生产。但是,那些废液不要乱倒哦。装色谱柱,实际上要考虑两个关键指标,第一,压实了。填料压实了,那么柱效就越高,对吧。第二,均匀。填料填在色谱柱中均匀,不要一边松,一边紧的,那么,跑出来的色谱峰才是 正态分布的。说说简单,但是实际上做起来不是很容易。真的需要有点技巧。这个技巧,我说不出来,只是手上或者脑子里面的感觉,就像写毛笔字一样,说不出啥为中锋,但是,手上能表现的。以下请大家看看简单的装柱子原理图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112201130_339631_1626663_3.jpg一个空压机,一台气动泵,调压器,色谱柱管,匀浆管,溶剂,洗脱液,废液瓶。不需要我表明了吧,图上大家一看就明白了。大致介绍下装色谱柱的工序吧。首先,称取合适质量的填料,计算以下,管子里面能装多少,不要少了,也不要多,略微多一点点。用匀浆液使之分散。匀浆液的选择可是有讲究的。要让填料悬在溶液中,不能很快沉下,也不能漂在溶液上。要保证填料能够均匀地被压下。匀浆液倒入匀浆管中,这个匀浆管在之前应当和加入有机溶剂的色谱柱连好,一头装上筛板和盖帽,一头连在匀浆管上;加入溶剂使得管子中没有气泡,立刻盖上盖帽,调节高压力,用甲醇作为洗脱液,压匀浆液到色谱柱中。这样,待压力稳定下来,保持2-3分钟,然后调低压力,使之稳定。接着,慢慢调小压力,略微稳定下,到0。卸下色谱柱,一般来说,填料应当略微冒出柱管且填料应当是很平整的。盖上筛板和盖帽,色谱柱就装填完毕了。接着就放HPLC上测试柱效。柱效一般有相应的标准物质,通过计算,得出其塔板数和对称因子。当时,一般每填一次,都能得出相当高的理论塔板数,对称性也相当好。我很欣慰。大家都知道,装色谱柱使用的溶剂有点毒而我发现,一直装色谱柱,人会傻掉的。人需要和社会接触,才能够成长。综合考虑,我不做了。过了一两年,去一家药厂化验室,看到他们用我装填的色谱柱(因为当时色谱柱报告签的名是我的笔迹),我问他们,你们这款色谱柱用得怎样?他们说,这款柱子便宜,而且耐用,进口的就是好。我酸楚了,心里想,这不就是我装的嘛,但是嘴上说,是啊,这款不错……我心里一阵阵地酸楚。是自己装的,还不能承认。一晃,几年过去了,当年刚进大学的学生们都已经出来工作了。我也慢慢成熟。这段经历,我也时常回忆,这是年轻才敢尝试,才敢闯啊。
小伙伴儿们,你的凝胶色谱柱是自己装填还是买现成的呢? 如果是自己装填,哪些步骤出现过小插曲呢?欢迎大家来分享你的装填过程哦! 如果是买现成的,您是用什么类型的凝胶色谱柱呢,也欢迎大家来分享哦!
[img=,690,462]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103042237533431_1674_4233791_3.jpg!w690x462.jpg[/img]该图为自己装的硅胶基质反相色谱柱,在分离单取代苯(苯、甲苯、丙、戊、庚、壬时,出现上图的情况,请指点一下问题出在哪?固定相合成的不好还是色谱柱装填问题:(装柱条件为40Mpa,匀浆液为氯仿,顶替液为甲醇)。万分感谢