蜡酸

氨基酸是组成生物体中蛋白质的基本单元，主要以下列两种形式存在：一种是以结合态存在于肽和蛋白质中，被称为标准氨基酸，这类氨基酸约有20种，分析这类氨基酸的方法被称为“蛋白水解法（标准分析法）”；另一种是以游离态存在于生理体液（如血浆，尿液等）、食品（如肉制品，饮料等）中，这些氨基酸包含氨基酸代谢物和前体，被称为游离氨基酸，因其直接影响食品的口感与风味，近年来备受关注。游离氨基酸比标准氨基酸的种类丰富，至今已知主要有约40种，分析这类氨基酸的方法被称为“生理体液法”。高效液相色谱柱后衍生法是氨基酸分析最常用的方法，一般通过色谱柱分离后，进行柱后衍生再测定。茚三酮柱后衍生法是通过离子交换色谱柱分离氨基酸后，与茚三酮试剂混合发生化学反应（显色），可在可见光区进行检测，此方法可靠性与稳定性高，被广泛应用。下面使用日立全自动氨基酸分析仪LA8080，分别采用蛋白水解法&生理体液法测定样品中的标准氨基酸和多种游离氨基酸。缓冲液和衍生试剂可使用市售配件，适用于品质管理等常规分析。蛋白水解(PH)法日立全自动氨基酸分析仪LA8080采用长寿命高理论塔板数3 μm分离柱，可在30 min内实现标准氨基酸分离度全部大于1.2分离。并且通过调整洗脱程序，还可把分析时间从30 min更进一步缩短到24 min，实现氨基酸的超高速分析。生理体液(PF)法日立全自动氨基酸分析仪LA8080采用第三代衍生技术—TDE3，填充高效热传导材料，提高传热效率，检出限进一步提高到2.5 pmol，使用寿命是第二代的2.5倍。从上述结果中可见，对于复杂的生理体液，LA8080仍然能够实现高灵敏度和分离度的检测。日立全自动氨基酸分析仪LA8080采用日立独家的长寿命高灵敏度的第三代TDE3尖端衍生技术，以及长寿命高理论塔板数3 μm分离柱使氨基酸的分析进入超高速全自动分析的时代。

1. 前言 1958年，D.H.Spackman，W.H.Stein和S.Moore发明了离子交换分离、茚三酮柱后衍生氨基酸技术，使得氨基酸分析选择性高、分析速度快、准确度高。而且成功实现了自动化，是研究的重要里程碑。自此，氨基酸分析仪被广泛应用到饲料、药物、食物等的氨基酸及其类似物的分析中。 日立从1962年开始潜心研究氨基酸分析仪，并在技术上取得了巨大的进步（图1）。图1 日立氨基酸分析仪的发展史 2. 产品特点 LA8080全自动氨基酸分析仪采用离子交换色谱分离和茚三酮柱后衍生技术，是分析氨基酸的专用仪，主要有以下三大特点： 操作简便设计符合人体工学，充分考虑到用户的视野范围和操作流程。衍生化反应前才将两种溶液进行实时混合，因此茚三酮溶剂无需冷藏。可直接使用市售的缓冲液和衍生溶剂。设计紧凑日立首次采用台式设计。占地空间小，主机体积缩小了约30％。前置设计综合考虑了多种因素，方便放试剂瓶和样品，更换色谱柱和密封配件也十分简便。数据可靠性高秉承了之前型号“L-8900”“L-8800”的优异性能，采用离子交换色谱法，基本分析条件和之前型号一样。茚三酮柱后衍生反应的稳定性高，因此可在蛋白水解和生理体液分析法中获得良好的定量分析数据。3. 应用 图2所示为通过标准分析法来分析蛋白质水解液的色谱图。以0.40mL/min流速输送柠檬酸钠缓冲液，使粒径为3μm的阳离子交换树脂色谱柱（i.d.4.6mm×60mm）保持57℃。然后，以0.35mL/min流速输送茚三酮试剂与缓冲液混合，135℃时衍生，在570nm和440nm的波长处测量吸光度。 分析30分钟后，各成分分离度达到1.2以上。另外，天门冬氨酸（Asp）的检出限为2.5 pmol以下（信噪比=2），峰面积重现性（2 nmol）良好，RSD低于1.0％。图2 蛋白质水解分析实例 在做蛋白质成分分析时，一般我们使用盐酸来水解蛋白，但是半胱氨酸、胱氨酸和蛋氨酸很容易被氧化。因此，目前在分析磺丙氨酸（CySO3H）和蛋氨酸砜（MetSON）时，先用过甲酸氧化，然后再加盐酸水解。如图5所示为仅分析CySO3H和MetSON的短程序分析应用实例。图3 过甲酸氧化水解和短程序分析实例4. 总结 Moore等人发明的氨基酸分析方法能够一直沿用至今，是因为他们在设计分离系统和衍生系统时，经过反复斟酌，精心设计。聚苯乙烯聚合物的离子交换树脂与氨基酸的相互作用十分巧妙，芳香族的中性氨基酸如苯丙氨酸和酪氨酸，增强了与色谱柱填料聚合物之间的疏水相互作用，从而实现了良好的分离。茚三酮的柱后衍生方法对样品中的杂质有较高的选择性，用户只需认真完成去蛋白以及过滤处理，即可获得高可靠性的分析结果。 “前人栽树，后人乘凉”，我十分惊叹于前人的智慧并满怀感激，今后我们会将氨基酸分析技术在日立发扬光大。撰写人*1 伊藤正人，成松郁子，裴敏伶，森崎敦己，福田真人，八木隆，大月繁夫，关一也，丰崎耕作日立高新科学公司 开发设计本部 *2 铃木裕志日立高新科学公司 应用技术部关于日立LA8080全自动氨基酸分析仪的详情，请见链接：https://www.instrument.com.cn/netshow/SH102446/C296474.htm 关于日立高新技术公司：日立高新技术公司，于2013年1月，融合了X射线和热分析等核心技术，成立了日立高新技术科学。以“光”“电子线”“X射线”“热”分析为核心技术，精工电子将本公司的全部股份转让给了株式会社日立高新，因此公司变为日立高新的子公司，同时公司名称变更为株式会社日立高新技术科学，扩大了科学计测仪器领域的解决方案。日立高新技术集团产品涵盖半导体制造、生命科学、电子零配件、液晶制造及工业电子材料，产品线更丰富的日立高新技术集团，将继续引领科学领域的核心技术。

p 　　 strong 仪器信息网讯 /strong 2018年7月26日，日立高新技术公司在其位于上海张江的日立高新技术上海应用中心隆重举行了全新一代氨基酸分析仪——LA8080的新品发布暨技术交流会。日立自1962年推出第一代氨基酸分析仪后，迄今已有50多年的研发制造经验，本次发布的LA8080，是继经典型号L-8900之后，时隔13年再次推出的新品。本次会议邀请到40余名日立氨基酸分析仪的应用专家及用户代表参加，同时日立高新技术科学公司、天美(中国)科学仪器有限公司的高层也出席会场，共同见证了氨基酸分析仪新品LA8080发布的时刻! /p p 　　发布会上，从日本远道而来的日立高新技术科学公司科学· 医用系统营业本部 本部长岡田宗能，以及日立高新技术公司在中国区的总经销商代表，天美(中国)科学仪器有限公司副总裁张海蓉分别致辞。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/33875254-e68d-4cc4-a016-5b22c18f95bb.jpg" title=" 日立高新技术科学公司科学· 医用系统营业本部 本部长 岡田宗能（右）.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " strong 日立高新技术科学公司科学· 医用系统营业本部 本部长 岡田宗能(右) /strong /p p 　　岡田宗能首先代表日立公司，向在百忙之中参加日立氨基酸分析仪发布会的各位嘉宾表示感谢。日立高新是日立集团旗下一家主营分析仪器的全资子公司，产品除了氨基酸分析仪，色谱，光谱等通用分析仪器外，还包括热分析仪，X射线荧光分析仪等。岡田宗能谈到：“本次推出的日立氨基酸分析仪是日立公司产品中历史最悠久，以及销量最好的一款仪器。从2004年至今，日立的氨基酸分析仪在中国已经销售了500多台。氨基酸是组成基体营养所需蛋白质的基本物质，因此对氨基酸的分析十分重要，氨基酸分析仪被广泛应用到食品、医药，以及饲料等领域，未来的发展空间巨大。日立氨基酸分析仪一直深受中国客户的信任和信赖，日立氨基酸分析仪产品近期也呈现出迅猛的发展态势，这离不开各位在场嘉宾的大力支持。日立发布的全新氨基酸分析仪LA8080，秉承了之前的优异性能，还采用了最前沿的衍生方法，性能非常优异。在操作性和人性化设计上，也进行了改进和升级。” /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/d3ad49e6-6dd8-494b-b779-a75c32bc8dfa.jpg" title=" 天美（中国）科学仪器有限公司副总裁 张海蓉.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " 　　 strong 天美(中国)科学仪器有限公司副总裁 张海蓉 /strong /p p 　　张海蓉女士在致辞中也向各位尊敬客户及专家的到来表示了欢迎和感谢。她讲到：“日立的氨基酸分析仪在中国有着非常广大的用户基础，也是日立公司很有代表性的一款拳头产品。该产品自1962年第一代发布以来，已更新至第七代产品，56年的时间更新到第七代，对于一个仪器来说并不算特别快的速度，但这其中隐含着日立高新技术公司对产品精益求精的精神，每一代产品都具有十分鲜明的特色。天美公司是日立长期的合作伙伴，自1997年开始同日立建立起全面的合作关系。天美对于日立产品的代理包含了售前、售后、技术支持和维修的服务，是全方位支持的合作伙伴。日立及天美在中国分析仪器市场取得的成就离不开每一位用户的支持，客户对新产品的信任和支持是莫大的鼓励，希望未来能将更多的新产品、新技术、应用支持、技术服务带给客户，以更好地服务于全国的各所实验室” /p p 　　随后，主持人邀请岡田宗能先生与北京市营养源研究所 所长助理兼分析检测中心主任崔亚娟共同为日立全新一代氨基酸分析仪揭幕，现场观众得以一睹LA8080的风采! /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/9fd15246-a837-4ba3-a541-e73542d89d22.jpg" title=" 岡田宗能（右）与崔亚娟（左）为日立全新一代氨基酸分析仪LA8080揭幕.jpg" width=" 268" height=" 400" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 268px height: 400px " / /p p style=" text-align: center " strong 岡田宗能(右)与崔亚娟(左)为日立全新一代氨基酸分析仪LA8080揭幕 /strong /p p 　　LA8080不仅秉承前代机型的基本性能，同时考虑到用户的需求，有落地式和台式两种机型可供选择。本次亮相发布会现场的是LA8080落地式样机。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/da417d6d-ccd9-4907-937f-5fa30bc0cdf3.jpg" title=" 日立全新一代氨基酸分析仪LA8080.jpg" width=" 268" height=" 400" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 268px height: 400px " / /p p style=" text-align: center " strong 日立全新一代氨基酸分析仪LA8080 /strong /p p 　　发布会结束后，全体与会人员同氨基酸分析仪新品LA8080合影留念。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/260064b4-806b-4540-8712-5af0bfd2cbfe.jpg" title=" 发布会后合影留念.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " strong 发布会后合影留念 /strong /p p style=" text-align: center " strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/3259583f-616c-449e-936d-e5a07d926b61.jpg" title=" 用户围绕LA8080进行交流.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /strong /p p style=" text-align: center " strong 用户围绕LA8080进行交流 /strong /p p 　　在同期进行的技术交流会上，来自日立、天美的技术人员，以及三位来自不同氨基酸分析测试领域的专家向参会人员做了技术报告。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/e6461315-64c2-439e-a5c1-b679fddc08fc.jpg" title=" 技术交流会会议现场.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " strong 技术交流会会议现场 /strong /p p 　　全新一代氨基酸分析仪LA8080的产品首席设计师，来自日立高新技术科学公司光学仪器设计部的高级工程师伊藤正人先生，向大家介绍了氨基酸分析仪的发展历程以及LA8080的技术特点。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/aef644d9-a987-4e00-aef8-e5e3c673ae72.jpg" title=" 日立高新氨基酸分析仪产品首席设计师 伊藤正人（右）.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " strong 日立高新氨基酸分析仪产品首席设计师 伊藤正人(右) /strong /p p 　　Moore博士与Stein博士于1958年发明了氨基酸分析仪，并因这一成就荣获1972年的诺贝尔奖。日立自推出的第一代氨基酸分析仪起就一直沿用他们所采用的离子交换色谱法和茚三酮柱后衍生法，经过56年的技术升级，产品的分离精度也在不断提高，分析速度也在不断加快，直至推出本次的LA8080。依托客户的支持和信赖，氨基酸分析仪的全球累计销量也已突破3000台。 /p p 　　LA8080的特点和开发理念有三：简便、紧凑、数据的高可靠性。(1)操作简便，符合人体工学设计，同时充分考虑到操作人员的视野范围和操作习惯，前置设计理念，试剂和样品的拿取方便，日常试剂的更换、样品安放、以及维修都十分方便 (2)设计紧凑，考虑到越来越多实验室空间紧张的问题，除推出日立传统落地式氨基酸分析仪外，还首次推出了台式分析仪，体积缩小30%，十分节省空间 (3)数据的高可靠性，由于采用高可靠性和高稳定性的茚三酮柱后衍生法，分析方法同之前一样，从而延续了以往型号L-8800和L-8900的优异性能。LA8080新增的TDE3反应器，热传导性强，衍生效率高，与之前L-8900采用的反应柱相比，检测灵敏度有了提升。 /p p 　　天美(中国)科学仪器有限公司负责氨基酸分析仪的产品经理谢堂光继续为各位专家及用户带来了氨基酸分析仪LA8080主要创新点的介绍。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/f0cccc7d-39a1-4de9-bc7b-57115eed5f69.jpg" title=" 天美（中国）科学仪器有限公司氨基酸分析仪产品经理 谢堂光.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " strong 天美(中国)科学仪器有限公司氨基酸分析仪产品经理 谢堂光 /strong /p p 　　产品硬件方面的创新点主要有：LA8080的操作培训仅需30秒钟，操作大幅简化，测试结束可自动运行清洗程序 产品全系标配第三代TDE3反应柱，寿命相比初代产品提高25倍，灵敏度提高4倍，且老仪器用户也可升级该部件 增加茚三酮衍生试剂回流止回阀，避免误操作后仪器损坏。缓冲液无需氮气保护，节省氮气使用，试剂更换更加便捷 脱气机效率更高，缓冲液中存在气泡也可直接使用 优化漏液传感器位置，避免漏液传感器受到漏液损害 整机性能优化，在样品及试剂处理干净的前提下，分离柱柱效下降后可反接使用 超高速分析条件，20分钟可实现18种氨基酸的分离度达到1.4以上 检测器光栅分光系统优化，能量相比上代产品提高约30%。 /p p 　　软件方面的创新点主要有：使用最新的OpenLAB CDS 2软件，联机时间仅需10s 增加专用清洗液排气，可多次大体积排除气泡 报告可直接另存为PDF、Excel、Word、TXT文件 可实现数据库功能 序列模板可编程测试样品序列 三级权限和审计追踪符合FDA、CFDA的需求 软件中英文一体，可根据需求自主选择，无需重复购买。 /p p 　　氨基酸分子含有氨基和羧基，组成人体蛋白质的氨基酸有20种，血液中游离的氨基酸有40多种。氨基酸分析仪被广泛应用到了食品、医药、饲料、生物等各个领域。技术交流会上，还有北京市营养源研究所的崔亚娟老师、浙江省疾病预防控制中心的黄百芬老师和上海味之素氨基酸有限公司的汤志清老师分别带来了日立氨基酸分析仪在食物和卫生检测领域的应用报告，使广大与会者对氨基酸分析仪的应用有了更深刻的体会。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/b39cabdb-50f3-4c09-93e4-79e7282ff928.jpg" title=" 北京市营养源研究所 所长助理兼分析检测中心主任 崔亚娟.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /p p style=" text-align: center " strong 北京市营养源研究所 所长助理兼分析检测中心主任 崔亚娟 /strong /p p style=" text-align: center " strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/b84abf4d-3511-4a96-a1c6-95137a19554e.jpg" title=" 浙江省疾病预防控制中心理化与毒理检验所 黄百芬.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /strong /p p style=" text-align: center " strong 浙江省疾病预防控制中心理化与毒理检验所 黄百芬 /strong /p p style=" text-align: center " strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/58786365-b566-4e2b-8267-4f0d14d7dbd2.jpg" title=" 上海味之素氨基酸有限公司 汤志清.jpg" width=" 400" height=" 267" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 400px height: 267px " / /strong /p p style=" text-align: center " strong 上海味之素氨基酸有限公司 汤志清 /strong /p p br/ /p