三氰基

液相色谱法测饲料中三聚氰胺时，前处理最后定容体积是多少？

[em09503]三聚氰胺现场快速检测试剂盒说明书【简 介】三聚氰胺是一种合成有机含氮杂环化合物，含氮量很高（66％），加之其生产工艺简单、成本很低，在采用凯氏定氮法测定粗蛋白时，可提高表观粗蛋白含量；不法生产商为了降低生产成本，提高经济效益，在原料奶及其它生产加工环节中非法加入三聚氰胺。一次大量摄入或长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。【检测原理】 样品中的三聚氰胺经特异性层析柱富集、净化，然后与试剂盒中的试剂发生反应，最终生成红色物质。【检测范围】 1、固体样品：饲料、饲料原料、奶粉、蛋糕、奶茶粉等固态样品。2、液体样品：液态生鲜奶、酸奶、巧克力奶、咖啡奶等液态奶制品。3、生鲜蛋类等。【特 点】 检测速度快，测量一个样品只需15分钟左右；操作简便，无需专业技术人员及化学实验室设备。【技术指标】 最低检测限：1.5~2.0mg/kg【操作过程】1、样品处理 固体样品处理 向三聚氰胺试剂A瓶中加入2.0ml纯净水或蒸馏水，称取粉碎的样品1.0 g于三聚氰胺试剂A瓶中，摇动至少1min后，静置分层，取2ml上清液到5ml离心管中，加2ml三聚氰胺试剂B，混匀，待过固相萃取柱A柱。液体样品处理 向试剂A瓶中加入0.5ml纯净水或蒸馏水，吸取液体样品约1ml于三聚氰胺试剂A瓶中，摇动至少1min后，静置分层，取2ml上清液到5ml离心管中，加2ml三聚氰胺试剂B，混匀，待过固相萃取柱A柱。生鲜蛋类样品处理 向三聚氰胺试剂A瓶中加入0.5ml纯净水或蒸馏水，将待测定的生鲜鸡蛋蛋清打入玻璃杯内搅匀，用盒内吸管吸取约1ml样品于三聚氰胺试剂A瓶中，摇动至少1min后，静置分层，取2ml上清液到5ml离心管中，加2ml三聚氰胺试剂B，混匀，待过固相萃取柱A柱。2、固相萃取柱处理A柱： 取出一支三聚氰胺固相萃取柱A柱，用吸管向A柱中加入2ml三聚氰胺试剂B，用洗耳球在A柱上端加压使液体呈滴状自下端出液口匀速流出，流出液弃去。（注意：不要将A柱内填料层的液体挤干，应使A柱内填料层保持湿润状态）B柱： 取出一支三聚氰胺固相萃取柱B柱，用吸管加入2ml盐酸水溶液，用洗耳球在B柱上端加压使液体呈滴状自下端出液口匀速流出，流出液弃去。（注意：不要将B柱内填料层的液体挤干，应使B柱内填料层保持湿润状态）3、净化将步骤1中的待检液分次加入已处理好的A柱中，用洗耳球加压，使液体呈滴状自下端出液口匀速流出，将A柱用洗耳球挤干，然后用吸管向A柱中加2.5 ml三聚氰胺试剂C，洗耳球加压使三聚氰胺试剂C呈滴状自下端出液口匀速流出，用5 ml离心管接收流出液。然后用吸管向5 ml离心管中加0.5 ml纯净水，再用吸管向5 ml离心管中加1.75 ml三聚氰胺试剂D，压紧离心管盖子，上下用力震荡50次以上，静置2min，待其自然分层。4、显色用一次性注射器吸取离心管中下层液体约1 ml（注意：不可带入上层液体），注入到已经过纯净水活化的固相萃取柱B柱中，取出三聚氰胺试剂E，迅速向B柱中滴加4滴，用洗耳球加压使液体流出，流出液弃去。然后向B柱中滴加10滴三聚氰胺试剂F，用洗耳球加压挤干，5min内观察柱体内填料颜色。5、判断含三聚氰胺的样品可见有砖红色物质生成，未含三聚氰胺的样品层析柱内上层填料呈浅黄色或黄绿色。【注意事项】 在使用试剂时，必须注意安全，若不小心将试剂溅到皮肤上时，要立即用清水冲洗。 由于该方法为显色判断的方式，因此对颜色观察的光线要求以白天自然光线或晚上照明不会引起明显色差为准。不可在光线昏暗或采用普通照明外杂色光源的环境下判断。 三聚氰胺试剂B、C和D可固定使用对应的吸管，切忌交叉使用。5mL离心管、注射器、固相萃取柱A柱和固相萃取柱B柱不可重复使用，附带的纯净水为实验过程中的用水，仅限本盒使用，用后立即盖好瓶盖，剩余水不得饮用，应视为废弃物处理。废液参照化学废弃物处理。 液体在过固相萃取柱时，若发现堵柱现象时，相应的萃取柱作废。 按“步骤1”吸取上清液时，吸管头位于液面表层，以避免沉淀物吸入，从而导致A柱堵塞。 固相萃取净化的过程中液体流速控制很重要，不可过快，应控制好在出口处液滴匀速下落。 生鲜奶在常温下易酸败，初筛应尽快进行。4℃冰箱保存的生鲜奶48小时内应完成检测。若产生局部结块、发泡的变化，不可用于进行初筛。 可进行多样品的同时初筛，但“步骤4”需独立连续操作，B柱加三聚氰胺试剂E加压液体流出后，应立即加三聚氰胺试剂F进行显色反应。 提取和萃取时使用漩涡混合器，提取和萃取效果会更好。 如果检测出疑是阳性样品，建议在实验室用仪器方法进一步确认。【保存条件】 试剂在4-30℃阴凉干燥处常温保存，有效期为1年。【三聚氰胺标准品配置方法】 三聚氰胺标准贮备溶液的配置：准确称取100mg三聚氰胺标准品，用甲醇定溶到100ml容量瓶中，既是1000ppm三聚氰胺标准贮备溶液。 三聚氰胺标准工作溶液的配置：取适量三聚氰胺储备溶液用蒸馏水稀释既得三聚氰胺标准工作溶液。

本报讯 (特派香港记者 陈颖镭)香港食物安全中心昨天公布新一轮检测三聚氰胺的结果,有2个样本不合格,其中包括大连生产的“佳之选新鲜鸡蛋(特大装)”,是香港首次发现鸡蛋含过量三聚氰胺,百佳超市随即全面撤架,食物及卫生局局长周一岳表示会尽快抽检全港所有鸡蛋。在香港食安中心昨天抽检的77个样本中,2个不合格,包括“佳之选新鲜鸡蛋(特大装)”和“蓝莓味向日葵夹心饼干”。被验出含有过量三聚氰胺的新鲜鸡蛋来自大连,食用期限是昨日到期,被检出的三聚氰胺含量为百万分之4.7,食安中心说,假如一个三岁幼童每天食用12个这样的鸡蛋,三聚氰胺摄入量会超标。另一不合格样本为“蓝莓味向日葵夹心饼干”,被检出的三聚氰胺含量为百万分之3.2。根据香港法例,产品的三聚氰胺法定上限为百万分之2.5。食安中心已经通知业界检测结果,并要求他们停止售卖不合格的产品,也发信警告零售商及进口商,并指出如有足够证据,中心会提出检控。香港百佳超市表示,有问题的鸡蛋已经从货架收回,买了这批鸡蛋的市民可以退货,同一牌子但不同批次的鸡蛋,也会酌情处理。这是香港食物安全中心首次发现,有鸡蛋含过量三聚氰胺。食物及卫生局长周一岳表示,未来四五天会尽快抽验全港所有鸡蛋,特别是内地鸡蛋,由于据专家意见表示,可能与饲料有关,因此亦会加强检验肉类。周一岳说,暂时认为这是单一事件,若短期内其他鸡蛋没有问题,便会较放心,但若然发现更多超标样本,则会扩大检验样本范围。http://news.ifeng.com/hongkong/200810/1026_19_846858.shtml