氟可龙

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  • 单克隆抗体克隆化技术

    经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细胞丧失产生抗体的能力，所以需要再次或多次克隆化培养。克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。一般说，免疫性强的抗原克隆次数可少一些，但至少要3～5次克隆才能稳定。克隆化的方法很多，包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。一、有限稀释法1．材料① 微量培养盘，盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞（即饲养细胞）每孔2万～4万。② HT培养基2．操作方法① 取出抗体阳性孔细胞，用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色，计数。② 用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。③ 用吸管将细胞悬液分别种入微量培养盘，每孔0.05ml，细胞含量分别为10个/孔、2个/孔、1个/孔和0.5个/孔。④ 5％CO2饱和湿度，37℃培养。⑤ 每天用倒置显微镜观察克隆生长情况，选择只有一个集落生长的孔，弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。⑥ 克隆大量繁殖后，布满孔底的1/3～1/2时，测培养液抗体。⑦ 抗体阳性孔细胞，移到有饲养层的组织培养瓶中，并传2～4代就可以脱离饲养细胞，建成克隆株。二、软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长，而达到克隆化，具体操作如下：1．配2.5％的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。2．将117ml完全DMEM液和3ml 10倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5％琼脂糖的完全DMEM液，并加75×108 脾细胞。4．每块平皿加10ml，于室温中凝固。5．DMEM中的细胞与DMEM―琼脂1:1混合，将细胞琼脂混合物2ml铺于凝固的平板上，使其全部覆盖。6．放入CO2箱饱和湿度，37℃培养10天。7．用PBS配制0.6％琼脂糖，于沸水浴溶解后，置45℃，在保温情况下取一试管，迅速加入0.1ml 25％羊红血球，0.2ml豚鼠补体，2.7ml 0.6％琼脂糖。8．用3ml琼脂糖―羊红血球混合液覆盖克隆。于37℃CO2箱孵育1h~2h。从克隆上部溶解羊红血球的溶血范围，可筛选抗羊红血球Ig。三、显微镜操作法在直径6cm培养皿中，加入1ml 1.0×108 细胞悬液放置5％CO2饱和湿度，37℃温箱中放置30min以上，倒置显微镜下，寻找那些与周围相距甚远的单个细胞，将毛细管口（一头有直角弯头毛细管，一头连接一尺长乳胶管，用口控制液体进入）水平置放于液面上，左右微动，直到看见管口，对准细胞，吸入毛细管，将管中细胞移到预先加有2.0×104~5.0×104 饲养细胞96孔板内，培养后，即可获得单个细胞形成的克隆。四、荧光激活分离法用一种荧光激活细胞分类器（Fluorescein Activafed Cell Sorter，FACS）。其基本原理是：将细胞经荧光抗体染色后，经喷嘴形成单个细胞的线形液滴，在莱塞光激发下，荧光素发射荧光，此信号由光电倍增管接收，再结合细胞形态大小产生光散射信号，经电脑处理，产生信号并与预定的信号对比，根据细胞荧光强度及细胞大小不同，将细胞分成不同级别，在电场中发生偏离，而分别收集于不同容器中。

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  • 重大仲裁公告！天隆要求科华支付105亿投资款，圣湘收购科华或流产？
    7月13日，科华生物发布重大仲裁公告。公告涉及西安天隆和苏州天隆创始人彭年才等四位申请人，要求科华生物按照2018年收购天隆的投资协议执行约105亿人民币的剩余投资价款以及约10亿人民币违约金。天隆科技还申请，若科华生物不能支付以上价款，则请求天隆科技股东彭年才、李明等四位申请人以约4.28亿人民币回购西安天隆62%股权，以约3300万人民币回购苏州天隆62%股权。仲裁缘由：收购协议规定以25倍净利润支付剩余38%股权所有的一切皆由于西安天隆在疫情中的优异表现，收入大增。2018年，彭年才、李明等4位申请人与科华生物签订《投资协议书》，约定科华生物以现金方式向西安天隆和苏州天隆进行增资并收购四申请人持有的天隆公司股权。但协议书规定天隆公司的全部股权收购共分两个阶段完成，第一阶段为本公司以人民币553,750,000元的对价获得天隆公司62%股权；第二阶段为科华生物需在2021年度以按照天隆公司2020年度净利润情况相应计算的股权价值完成对剩余38%股权的收购，最终完成对天隆公司100%股权的整体收购。而当年《投资协议书》中规定了以2020 年度经审计的扣除非经常性损益后的净利润×25 倍为剩余38%股权收购的价格。而天隆公司 2020 年度经审计的扣除非经常性损益后的净利润金额合计为人民币 1,105,719,905.78 元，扣除非经常性损益后的净利润×25倍的标准向四申请人支付剩余38%天隆公司股权的投资价款共计人民币10,504,339,104.91元（约105亿）。有失公平？科华股价下跌，提出反仲裁请求科华生物今日股价应声跌了9.97%。其实在今年5月至6月间，彭年才等4位申请人已经发函要求科华生物按照天隆公司2020年度经审计的扣除非经常性损益后的净利润×25倍的标准支付天隆公司剩余38%股权的股权转让价款共计人民币10,504,339,104.91元。而科华生物认为，2020年度，受新冠肺炎疫情影响，天隆公司收入和利润均出现了爆发式增长，该项增长情况已超出了各方在订立《投资协议书》时正常可预见及可预测的范围。进一步完成《投资协议书》第十条“进一步投资”条款项下交易的基础已经发生了各方在订立《投资协议书》时无法预见的、不属于商业风险的重大变化，已经构成了法律规定的“情势变更”情形。科华生物认为彭年才等申请人罔顾新冠肺炎疫情爆发等客观因素的重大影响，无视科华公司基于情势变更而依法提出的重新协商之诉求，执意提起本次仲裁，有悖于公平原则，与法律规定不符，已经向上海国际经济贸易仲裁委员会提出反仲裁请求。有意思的是，科华刚公布2021年上半年度业绩预告。预告显示科华生物在截止于6月30日的2021年上半年净利润约4亿元，而去年同期为1.9亿元。目前，科华生物在收到仲裁通知后，部分财产被人民法院冻结。被冻结的银行账户资金余额共计1,608,962.7元，子公司西安天隆科技有限公司的股权被冻结。圣湘生物收购科华或流产？除了注意到科华生物与天隆生物的爱恨情仇，今年5月斥资20亿收购科华18.63%股份的圣湘生物也坐不住了。7月14日，圣湘生物董事会紧急发布公告，称公司与保联资产涉及科华生物18.63%股份转让事宜尚在办理过程中，交易双方会积极推进本次交易。但受这次仲裁事件的影响，圣湘收购科华股份能否顺利实施仍存在不确定性。
    时间： 2021-07-14
    作者： 筱婕
  • HORIBA | Nature：新发现颠覆历史观点——最早的恐龙蛋是软壳蛋 | 光谱技术头条
    供稿 | 周灵编辑 | 孙平校阅 | Lucy、Joanna在人们以往的印象中，恐龙蛋应该和现代的鸟蛋一样拥有坚硬的蛋壳。而鸟类蛋壳之所以坚固，是因为其中含有大量钙质，使其能够支撑雌鸟“坐”在蛋上孵化雏鸟。由于鸟类正是从兽脚类恐龙中的一支演化而来，所以古生物学家过去一直认为，恐龙的蛋也是硬壳的，并推测恐龙很有可能也采取类似的育幼方式。然而美国自然历史博物馆古生物学家Mark Norell的研究团队，却提出了颠覆历史的观点——不是所有恐龙的蛋都是硬壳的，而且最初的恐龙蛋很可能都是软壳的，之后才演化出带有钙质的硬壳蛋。相关研究工作以“The first dinosaur egg was soft 第一颗恐龙蛋是软壳蛋”为题发表在著名期刊Nature正刊上。今天，就让我们了解一下这个重大发现吧！01两地发现恐龙蛋，引发猜想不寻常事情还得从美国自然历史博物馆古生物学家Mark Norell的团队在蒙古考察说起。在那次考察中，他们发现了十几只保存完好的原角龙胚胎化石（如图1所示），这些胚胎化石距今已有7200万年的历史，属于白垩纪晚期。从这些胚胎化石的状态推断，它们并未孵化，但奇怪的是化石周围却找不到钙化蛋壳的痕迹。图1 原角龙胚胎化石图巧合的是他的博士生Diego Po——一位生物学家，在阿根廷也发现了一具恐龙胚胎化石，它们属于距今2亿年前的鼠龙胚胎化石，并且同样在周围没有找到钙化的蛋壳（如图2）。图2 鼠龙胚胎化石图正是因为这两个在不同地方发现的恐龙蛋化石周围都没有找到钙化蛋壳的痕迹，所以他们才萌生了“最早的恐龙蛋是软壳”的这个假设。那么Norell团队是如何证实这一颠覆历史观念的结论的呢？02多项辨别加区分，软壳猜想获证实图3 鼠龙原角龙和鼠龙胚胎切片周围的“光晕”拉曼光谱信息Norell团队使用了HORIBA LabRAM HR 高分辨拉曼光谱仪，对原角龙和鼠龙胚胎切片进行拉曼光谱测试，获得化学特征信息（如图3所示），同时又通过拉曼光谱建立了区分沉积物和化石蛋壳的方法（如图4所示），从图中可见，沉积物中主要成分是过氧脂肪族化合物（拉曼特征峰在1775，1805，1868，1928cm-1）和共轭脂肪族化合物（拉曼特征峰在1415，1440，1461cm-1）,而化石蛋壳的主要成分是蛋白质中的肽键（拉曼特征峰1212，1684cm-1）和N-，S-，O-杂环化合物（拉曼特征峰在1349,1379，1565，1607，1700cm-1）。图4 通过拉曼光谱区分沉积物和化石Norell团队又通过拉曼光谱仪建立了区分硬壳蛋和软壳蛋的方法（如图5所示），图中可见：硬壳蛋主要有羰基、O-杂化化合物（1688,1723,1806cm-1）、N-杂化化合物（1414，1448,1584cm-1）和肽键（1686cm-1）拉曼特征峰；软壳蛋主要有硫醇类、S-杂环化合物（510，568,578,623cm-1）和芳香烃类（1004cm-1）拉曼特征峰。最后通过对比发现这些数据与其他爬行动物所产的软壳蛋的化学数据非常相似，从而证明了这两种恐龙所产的蛋是软壳的！ 图5 通过拉曼光谱区区分软壳和硬壳化石蛋03拉曼光谱破难题，考古领域显实力在此项研究中拉曼光谱仪起到了重要的作用，众所周知，考古地质样品中的拉曼光谱测试会有很多难点，如：考古地质样品中的拉曼光谱信息非常复杂，要想获得更好的拉曼光谱质量，就需要高的分辨率；考古地质样品中会存在很多有机质，会存在荧光信号，这会影响拉曼光谱的质量，导致有些特征峰无法获得等等。LabRAM HR Evolution 新一代高分辨拉曼光谱仪作为 LabRAM HR 的升级换代型号，在考古地质应用，具有如下优势，可以很好的克服这些难题：01具有800mm焦长，光谱分辨率可达0.35cm-1光谱分辨率越高，对相邻的峰就越容易分开。在此项研究中，用拉曼光谱区分硬壳蛋和软壳蛋的时候，需要寻找很多特征峰，因此光谱分辨率这一性能就会显得尤其重要。02采用针孔真共焦，三维空间滤波针孔共焦的好处在于焦点处的信号恰好汇聚在共聚焦针孔处，所以会全部通过共聚焦针孔，其它没有在焦点处的信号并不能通过，这样就有效抑制了荧光信号。在Norell团队中用拉曼光谱测量化石蛋壳的时候，含有的脂肪族化合物和芳香烃类物质就具有较强的荧光信号，但是LabRAM HR Evolution解决了这个难点。LabRAM HR Evolution 新一代高分辨拉曼光谱仪如果您对本次研究中使用的HORIBA产品技术感兴趣，欢迎留言咨询。Norell 团队的研究结果不仅推翻了过去几十年对恐龙蛋都是硬壳的认识，填补了恐龙繁殖和演化的空白，同时也让人们对恐龙更感兴趣了。它们是如何演化的？它们经历了哪些巨变？相信随着更多发掘工作的进行，我们将来能够串起这些地球上曾经的霸主们的演化历史，描绘出更加接近事实的生命画卷。 免责说明HORIBA Scientific 公众号所发布内容（含图片）来源于文章原创作者或互联网转载，目的在于传递更多信息用于分享，供读者自行参考及评述。文章版权、数据及所述观点归原作者或原出处所有，本平台未对文章进行任何编辑修改，不负有任何法律审查注意义务，亦不承担任何法律责任。若有任何问题，请联系原创作者或出处。
    时间： 2020-10-29
    作者： HORIBA
  • 克隆动物食品将遍布英国超市 政府承认无法监管
    据英国《每日邮报》9月16日报道，英国食品标准局15日承认，两年之内克隆动物及其产品将在消费者不知情的情况下遍布英国的超市和农场，但是却无法建立追踪及标注这些克隆动植物食品的有效机制。 　　据英国8月5日媒体报道，英国农场主将产自“克隆母牛”的公牛屠宰后暗中销往市场，由于“克隆牛肉”没有通过食用安全检测，消息一经曝光，立即在英国消费者当中引发轩然大波。英国食品标准局随后对此展开调查。 　　9月15日英国食品标准局的表态令人震惊，他们承认无法对克隆动物产品的贸易进行制止和规范，其结果就是消费者在不知情的情况下购买了来自克隆动物的肉奶制品。 　　苏格兰国家农场联合组织主席麦克莱伦称，“这一问题不只是英国的问题，是个世界范围的问题。”麦克莱伦建议政府修改法律，在无食品安全担忧的情况下，将克隆动物制品合法化。 　　英国食品标准局称，克隆动物的后代种群将不断扩大，将很难追踪他们的所在国家和地区，还有他们的数量。 　　“克隆并不是转基因，其克隆的产物并没有发生基因序列的变化。”英国国立医学研究院主任罗宾教授指出，“产自克隆奶牛后代的牛奶和牛肉都是正常的。克隆可以提高后代质量，对人体是完全无害的。”事实也表明，目前世界范围内尚未发现因克隆原因而导致的食品安全事件。但是世界农场动物福利协会首席政策顾问彼得说：“现在在没有完全弄清楚克隆动物的肉类是否能食用的情况下，最好的办法是严格控制克隆动物，将其列在监控之内。” 　　上世纪90年代疯牛病疫情暴发后，英国人开始小心购买牛肉制品和乳制品，这次虽有专家保证克隆牛后代肉制品“安全”，但不少英国人仍不免为此担心，他们认为克隆动物食品违反了自然法则。
    时间： 2010-09-17
    作者： sunny
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  • 多功能全自动细胞克隆分析及分离系统 400-805-0826
    多功能全自动细胞克隆分析及分离系统CellCelector Flex 将高内涵成像系统，高精度全自动细胞挑取机械臂和强大的成像处理分析软件相结合，可对单细胞、细胞团、球体、类器官、单细胞克隆以及贴壁细胞进行全自动检测、筛选、挑取和分离。挑取技术：已经获得专利的挑取技术支持极快的细胞扫描和挑取，从而快速分离细胞。温和地进行细胞转移，保证高度的细胞完整性和生长速率。对于一些应用，如单细胞克隆，可以实现高达 100% 的挑取/转移效率。CellCelector Flex关键特征多功能 &bull 适用于贴壁细胞、悬浮细胞或半固体培养基中的细胞 &bull 单细胞、细胞团、球体或菌落 &bull 原代细胞或细胞系 &bull 活细胞或固定细胞灵活 &bull 明场、相差和荧光成像 &bull 自动、半自动或手动细胞筛选，以供挑取分离 &bull 兼容标准或定制源容器和目标容器，如微孔板、培养皿、载玻片、过滤器、芯片、PCR板或管&bull 可升级的定制解决方案，可整合至大平台可靠 &bull 对特定细胞亚群超过95%的挑取准确性 &bull 对移动的检查对象进行自动重新定位 &bull 如果挑取失败，可重新挑取 &bull 软件自动检测是否成功挑取温和挑取 &bull 不影响细胞特性 &bull 可分离准备用于分子表征或下游培养的纯完整细胞 &bull 挑取后的细胞完整性和存活率高（包括单细胞克隆应用中高达95%及以上的存活率）快速 &bull 实验操作时间短 &bull 每次挑取仅20至30秒上游|下游兼容 &bull 无需复杂的样本制备，无需昂贵的耗材 &bull 与多个上游富集技术（免疫磁珠富集、基于尺寸的分离等）兼容 &bull 抽吸和点样体积小（降至约1 nL） &bull 单细胞PCR、NGS、RNA-Seq、细胞克隆、滴度分析、放大工艺等记录 &bull 符合GLP和GMP标准的完整工作流程记录 &bull 通过在每次挑取事件前后拍摄的实时、高质量图像进行质量控制 &bull 每一个被检测/捕获的对象都可以通过其唯一的ID进行识别，并可以在整个过程中从源板到终板进行完整的追踪，方便导出所有捕获的图像和数据 CellCelector Flex 关键应用单细胞分离&bull 稀有单细胞分离&bull 循环肿瘤细胞CTCs分析和分离&bull 胎儿细胞cbNIPT&bull 精子细胞分离&bull 原生质体/植物细胞&bull 单细胞异质性分析&bull CRISPR单细胞克隆细胞系开发&bull 用于细胞系开发的单细胞克隆 &bull mini Pool建立及筛选 &bull 从半固体培养基中进行菌落挑取及转移抗体发现&bull 单B细胞筛选 &bull 基于纳米孔的杂交瘤筛选 &bull 来自半固体培养基的杂交瘤克隆的筛选和挑取 &bull 杂交瘤亚克隆 &bull 基于微球的检测干细胞&bull iPS单细胞克隆 &bull 干细胞克隆挑取 &bull 造血干细胞克隆挑取 &bull 球体分离 CellCelector Flex 挑头我们根据CellCelector Flex 在不同领域的应用提供多种挑头。针对特定的细胞类型和挑取捕获模块对所有毛细管和挑头进行了优化，以保证温和、精准地挑取挑取细胞、细胞团以及克隆，整个过程无污染。CellCelector Flex 纳米孔板CellCelector Flex 纳米孔板含有十万到数百万个纳米孔，将细胞悬液接种后，数万个纳米孔有效地将细胞隔离开来，并确保共培养环境以促进单克隆生长。有效替代有限稀释法，FACS。&bull 高通量：每孔可获得400-600个单细胞（相当于有限稀释法25块96孔板！）&bull 高效节约：避免重复稀释，单次试验即可获得单克隆性、活力且高产的克隆&bull 100%单克隆性：自动图像鉴别单细胞并跟踪其生长到克隆，避免交叉污染&bull 单细胞活率超95%，无需昂贵外源生长因子CellCelector 机柜当处理活细胞时，无菌条件和经过调节的生理相关环境是关键因素。FlowBox 孵育箱可提供以下独特组合： &bull 经过HEPA过滤的垂直层流 &bull 对温度、湿度和CO2水平的精确控制 &bull 即使在检修门打开时，也能智能控制风速和排气量 &bull 高能紫外线灯，用于表面灭菌 &bull 源板和终板的最优细胞存活率 &bull 用户友好型控制面板 &bull 在不失去受控条件的情况下，充分方便地接触放置在里面的仪器和实验装置
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    厂商： 德国赛多利斯集团
    品牌： 赛多利斯/SARTORIUS
    型号： CellCelector Flex
    价格： 面议
  • 奥立龙氟离子复合电极 400-860-5168转4927
    产品名称：奥立龙氟离子复合电极（货号：9609BNWP）英文名称：Orion Fluoride-ISE Electrode型号规格：9609BNWP品牌：Thermo Orion测量范围：0.02ppm饱和温度范围：0-80°C电极填充液货号：900061氟离子标准液货号：100ppm F-，940907离子强度调节剂货号：940909奥立龙氟离子复合电极Orion 9609BNWP 氟离子复合电极（ISE）简介 Thermo Scientifi c Orion 是研制出*支离子电极—钙离子电极的制造商，公司发展40年来已开发30 多种具有技术的离子电极，为众多行业广泛使用，成为同业中著名的离子电极制造商。 奥立龙氟离子电极分析方法已被众多国家的政府组织列为相关行业中的标准方法，例如：牙膏中氟化物的测定（国家牙膏标准GB 8372-2008）。当今采用离子电极从事物质研究分析的科研机构中有70% 以上使用的都是Thermo Scientifi c Orion 离子电极，Thermo Scientific Orion 离子电极是您进行离子分析可信赖的SOU选品牌。Orion 9609BNWP 氟离子复合电极（ISE）的应用 离子选择性电极是一种简单、迅速、能用于有色和混浊溶液的非破坏性分析工具，一般不需进行化学分离，不要求复杂的仪器，可以分辨不同离子的存在形式，能测量少到几微升的样品，所以十分适用于野外分析和现场自动连续监测。与其他分析方法相比，它在阴离子分析方面特别具有竞争能力。电极对活度产生响应这一点也有特殊意义，使它不但可用作络合物化学和动力学的研究工具，而且通过电极的微型化已被用于直接观察体液甚至细胞内某些重要离子的活度变化。离子选择性电极的分析对象十分广泛，它已成功地应用于环境监测、水质和土壤分析、临床化验、海洋考察、工业流程控制以及地质、冶金、农业、食品和药物分析等领域。测量常识 离子测量前，要尽可能先查阅相关的技术文献，选择正确的离子测量方法和离子浓度测量仪与电极 由于各种溶液的成份不一样，离子价态也不一样，其温度系数也不一样，故分析仪要做到对任何溶液都做出温度补偿那是办不到的，在进行离子浓度的准确测量时，需要将离子标准液和样品温度调节到同一温度 离子浓度的测量，需要配合相应的离子强度调节剂和标准液。
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    厂商： 广州博勒泰科技有限公司
    品牌： 奥立龙/Orion
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    价格： 1万 - 1.5万元
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    厂商： 沈阳登峰伟业科学仪器有限公司
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