昂丹司琼

PureCube His Affinity Agarose (NTA)是针对组氨酸标签的亲和层析产品，组氨酸标签是应用广泛的亲和层析标签，这种标签具有小尺寸、低免疫原性的特点和在多种天然或变性条件下的广泛适用性，NTA相对于IDA具有更高的洗脱液纯度。 产品优势：1）德国制造，品质与信誉的坚实保证；2）结合载量可高达80mg/mL，目前市面上高结合能力；3）更优越的DTT和EDTA稳定性和耐受性；4）凝胶的多孔性和均匀粒径，使蛋白与凝胶之间有很好地相互作用；5）适合低压环境下的纯化过程（大规模纯化制备或预装柱均可使用）；6）高性价比，为研发、生产降低成本；7）适用于大肠杆菌和真核细胞的裂解液和上清液；8）同时可装载Co, Cu, Zn和其它金属离子。 优势详解： 1. 收率高，纯度高Fig. 1: Over 20% more yield obtained with PureCube Ni-NTA Agarose. SDS-PAGE of GFP expressed in E. coli and purified in gravity columns with PureCube Ni-NTA Agarose and Ni-NTA resin from Competitor Q. 80 mg/mL protein yield was obtained with PureCube Ni-NTA Agarose (E1–E4, Cube) compared to 65 and 48 mg/mL, respectively, with the widely used alternative resins G and Q (E1–E4, Competitor G / Competitor Q). Cube Biotech蛋白结合能力 80mg/mL 2. 优越的DTT和EDTA稳定性Fig. 2: NTA is robust in the presence of reducing and chelating agents. GFP-His was purified on gravity columns containing PureCube Ni-NTA Agarose after exposing the resin for 1 h to 3 concentrations of DTT or EDTA. NTA exhibits a shallow decay rate in binding capacity. PureCube Ni-NTA琼脂糖在DTT和EDTA存在下非常坚实，在稳定性测试中，将PureCube Ni-NTA琼脂糖置于DTT与EDTA浓度逐渐升高的环境中处理1小时。再用处理过的凝胶在重力层析柱中纯化大肠杆菌表达的GFP-His，凝胶的蛋白结合能力因存在DTT与EDTA而下降，但是衰减率平缓，即使在1.5 mM EDTA，凝胶依然具有其大结合能力的54%。 Cube BiotechDTT稳定性10mMEDTA稳定性1.5mM 产品特性：应用Specific binding and purification of 6x his-tagged proteins特异性Affinity to His-tagged proteins结合能力80?mg/mLBead LigandNi-NTA粒径大小40 μm螯合剂稳定性Stable in buffer containing 10 mM DTT and 1 mM EDTA保存Delivered as a 50?% suspension所需试剂耗材Lysis BufferWash BufferElution BufferIce bathRefrigerated centrifuge for 50?mL tube (min 10,000 x g)50?mL centrifuge tubeMicropipettor and Micropipetting tipsDisposable gravity flow columns with capped bottom outlet, 2 ml?pH meterEnd-over-end shakerSDS-PAGE buffers, reagents and equipment Optional: Western Blot reagents and equipment 订货信息：31101PureCube Ni-NTA Agarose (1 ml)31103PureCube Ni-NTA Agarose (10 ml)31105PureCube Ni-NTA Agarose (50 ml)31110PureCube Ni-NTA Agarose (250 ml)31112PureCube Ni-NTA Agarose (500 ml)31115PureCube Ni-NTA Agarose (1000 ml)31120PureCube Ni-NTA Agarose (5000 ml)

一个逐渐变细的螺旋形蜗壳通过一圈导向叶片将水输送到转轮，导向叶片的角度可调节，以改变通过涡轮机的流量。水在外围切向进入转轮，通过叶片径向向内流向轮毂，然后通过导流管轴向流出。涡轮机产生的动力由 Prony 摩擦制动器吸收，该制动器由一对弹簧平衡组成，弹簧平衡连接到制动带上，制动带缠绕在由转轮驱动的滑轮上。通过张紧两个弹簧平衡来改变涡轮机上的负载，这会增加滑轮上的摩擦力。制动力由两个弹簧天平上的读数差和由该力与皮带轮半径的乘积计算得出的扭矩确定。进入涡轮机的水头在波登计上显示，旋转速度使用非接触式转速计（未提供）测量。&bull 福昂西斯转子周围有6个风向标环绕，内部为PVC涡形，透明的丙烯酸前板便于观察实验&bull 涡轮机运行的时候可调整风向标，刻度可表明开口角度，夹具可组织涡轮机运行&bull 福昂西斯转子直径为60mm，带有12个叶片&bull 利用普朗尼制动测力计可确定制动力&bull 入口压力计范围为0-2巴&bull 备选的教学软件

产品介绍：PureCube Rho1D4 Agarose是针对Rho1D4标签膜蛋白的亲和层析产品，Rho1D4是一种含有9个氨基酸的长链亲和标记物(TETSQVAPA)，可用于高特异性亲和蛋白纯化。库柏生物的PureCube Rho1D4琼脂糖纯化树脂是为FPLC蛋白的纯化测定而制造的。具有Rho1D4标签的膜蛋白可以通过PureCube Rho1D4 Agarose，利用Rho-tag高特异性来纯化，它在蛋白质产量和纯度方面甚至胜过更常用的Flag-Tag标记。本产品由通过Rho1D4抗体进行功能化40 μm琼脂糖微球组成。德国Cube Biotech研发团队拥有逾40年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究经验，为您提供专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列高质量PureCube Rho1D4琼脂糖填料、磁珠和预装柱，以及具有较高流速XL琼脂糖同系列产品。产品优势：1）德国制造，欧美优质膜蛋白纯化产品供应商；2）膜蛋白纯化的理想解决方案，可以获得纯净且活性的膜蛋白；3）结合能力可高达3-4mg/mL；4）高度特异性纯化带有标签的重组膜蛋白；5）可重复再生使用；6）良好的流量分布和最小空隙体积；7）兼容常用的色谱仪器；8）配合Nanodisc使用，是目前非常有效的膜蛋白提取解决方案，数家科研院校正在使用；9）高性价比的膜蛋白纯化产品！ 产品详解：对膜蛋白提取有高特异性和高产量每个批次的PureCube凝胶均是按照严格的质量标准体系生产并严格检验，以确保每一批分装的产品都有高的蛋白结合能力。通过与特异性抗原表位相互作用，辅以优化过的纯化操作步骤，能使目标蛋白在洗脱组分中有高产出量。图1是对CXC趋化因子受体4(CXCR4)的纯化溶于Fos-Choline-14的带标签蛋白通过大肠杆菌表达，再经由含PureCube Rho1D4琼脂糖的层析柱纯化。用Rho1D4多肽作为洗脱液，4次洗脱组分每毫升共收集到0.8mg、1.0mg、0.85mg和0.6mg目标蛋白。蛋白印迹结果说明CXCR4大约是65 kDa和35 kDa。这些条带是39.7 kDa膜蛋白的二聚体和单体。单体、二聚体的分离以及去除洗脱肽段，可以通过排阻层析的方法实现。 图1：用PureCube Rho1D4琼脂糖纯化CXCR4。大肠杆菌裂解液（TL）溶解在Fos-Choline-14中，溶解的组分（SF）与装有Rho1D4抗体的免疫亲和层析柱相结合。平衡组分中没有测得损失目标蛋白，经分光光度计测定，CXCR4在洗脱组分（E1-E4）中得浓度范围在0.6-1.0mg/mL。 蛋白表达系统纯度产率（所有回收蛋白）采取的纯化步骤hVN1R1G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物）90%1mg/1g细胞Rho1D4 IAC+SECFPR3G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物）90%2mg/6g细胞Rho1D4 IAC+SECTAAR5G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物）90%1mg/9g细胞Rho1D4 IAC+SECOR131-2G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物）90%2.9mg/10g细胞Rho1D4 IAC+centrifugationhOR17-4G蛋白偶联受体可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物）90%7.5mg/2.5L培养物Rho1D4 IAC+SEChOR17-4G蛋白偶联受体无细胞小麦胚芽提取物70%*0.3mg/mL反应溶液*Rho1D4 IAC+SECCD81四次跨膜蛋白可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物）＞95%26μg/3×10^7个细胞Rho1D4 IACAE1溶质载体S.啤酒系BJ545793%2.5mg/18L培养物Rho1D4 IAC 表1：有文献报道的使用Rho1D4系统纯化膜蛋白的纯度和产率。尽管很多用Rho1D4系统纯化的膜蛋白均为G蛋白偶联受体家族，该系统也可以有助于辨别其他如转运体之类的膜蛋白。 IAC：免疫亲和层析；SEC：排阻层析。在20世纪80年代发现Rho1D4表位和配对抗体，当时通过将抗体偶联到Sepharose上来纯化在猴肾细胞中表达的牛视紫红质。自此，Rho1D4系统（标签，偶联抗体的亲和基质，洗脱肽）开始用于少量膜蛋白的纯化，包括G蛋白偶联受体（GPCR），ATP结合转运体，溶质反向转运体和一个四次跨膜蛋白。 图2：假设有3个跨膜域的膜蛋白。Rho1D4标签加到膜蛋白C端，它的序列是T-E-T-S-Q-V-A-P-A通过转基因修饰在目标膜蛋白的C端（或N端）加上Rho1D4标签（如图1）。一旦配有该序列，即可用装载有Rho1D4抗体的亲和基质捕获目标蛋白，并随后通过添加过量Rho1D4多肽，产生竞争性结合基质表面抗体来洗脱目标蛋白，用此方法洗脱比改变pH值等方式更加温和。Rho1D4系统的一大优势是抗体与表位相互作用特异性非常高。而其另一大优势是洗脱目的蛋白收率相当高。利用Rho1D4纯化的目标蛋白可用于功能性研究，如：配体结合的特性，蛋白与蛋白间的相互作用。*纯度是从低浓度经一步Rho1D4 IAC在反应溶液中得出的；产率是在洗脱成分浓缩并过SEC柱后计算。 技术参数：用途Rho1D4 (TETSQVAPA)标记蛋白的高特异性亲和纯化特异性与Rho1D4标记蛋白的亲和性特殊功能强烈推荐用于膜蛋白的纯化 结合力3-4 mg / ml 琼脂糖磁珠配体Rho1D4 抗体粒径大小40 μm螯合剂稳定性在含有10 mM DTT 和 1 mM EDTA的缓冲液中稳定 罐装量以 50?%悬浮液进行运送所需设备 裂解液 洗涤缓冲液 洗脱缓冲液 冰水浴 可用50?mL离心管的可预冷离心机 (最小转速 10,000 x g) 50?mL 离心管 微量移液枪和微量移液枪尖 一次性重力柱，带盖底出口，2ml pH计 回转摇床 SDS-PAGE缓冲液，试剂和设备 可选择：Western Blot试剂和设备 推荐流速和保存温度0.25-1.0mL/min，4℃相关产品:1. 所有PureCube系列琼脂糖产品均提供用于自动液相色谱系统（如：FPLC）的预装柱（提供1mL）；2. 用于稀释样品或用于pull-down实验，我们推荐使用PureCube Rho1D4 Magbeads磁珠；3. Rho1D4抗体：这种抗体作为分离物质来生产PureCube的Rho1D4琼脂糖。也可以在Western Blot实验或者ELISA实验中检测rho-tagged蛋白；4. Rho1D4多肽：在洗脱缓冲液中，Rho1D4多肽竞争结合到亲和层析凝胶上然后释放标签蛋白,相对于改变洗脱液的pH值来说提供了更温和的洗脱环境。Cube Biotech 提供了一系列的Rho1D4肽段，这些肽段已经被PureCube Rho1D4琼脂糖验证；5. 配合Nanodisc产品使用，是有效的膜蛋白提取解决方案。6. Rho1D4多肽可以单独购买，也可以购买PureCube Rho1D4试剂盒套装。详情请参见订货信息以及公司官网。What our customers say:订购信息:33101PureCube Rho1D4 Agarose (1 ml)33102PureCube Rho1D4 Agarose (5 ml)33103PureCube Rho1D4 Agarose (10 ml)33301PureCube Rho1D4 Cartridge (1x1 ml)33305PureCube Rho1D4 Cartridge (1x5 ml)33199Rho Starter Set 1: PureCube Rho1D4 Agarose (1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)33299Rho Starter Set 2: PureCube Rho1D4 MagBeads (1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)33399Rho Starter Set 3: PureCube Rho1D4 Cartridge (1x1 ml) + Rho1D4 peptide (5 mg)16201Rho1D4 peptide (5 mg)16203Rho1D4 peptide (25 mg)40020Rho1D4 Antibody (200 μg)