胃粘膜素

[size=14px] [/size] [size=14px]过量饮酒会带来巨大的健康风险，酒精会对胃粘膜造成氧化损伤，随后引起胃肠功能障碍、慢性萎缩性胃炎，与胃癌的发生密切相关。天然产物是治疗重大疾病的药物或先导化合物的主要来源。辣椒素（Capsicum）是辣椒（Capsicum annuum L）的主要活性化合物和辣味成分的主要决定因素，已有研究表明辣椒素（CAP）对乙醇诱导的胃粘膜损伤具有显著的保护作用，但其作用是否是通过CAP的抗氧化活性以及相关作用靶点尚不清楚。KEAP1-NRF2-ARE轴是最重要的抗氧化系统。然而，现有的小分子抑制剂都与KEAP1共价结合，这意味着一旦结合，它们不易解离，而持续抑制KEAP1则表现出严重的副作用，越来越多的研究人员专注于开发与KEAP1的非共价结合剂。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、辣椒素激活NRF2/ARE信号通路保护人胃黏膜上皮细胞免受氧化应激[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者首先评估了辣椒素对GES-1氧化应激的保护作用。在乙醇（EtOH）处理的人胃黏膜上皮（GES-1）细胞中建立了氧化应激模型，发现辣椒素预处理改善EtOH导致的细胞活力降低，逆转EtOH组导致的细胞形态改变，降低EtOH导致的ROS水平升高，上调SOD水平，降低MDA的产生。这些结果表明，CAP有效地减弱了暴露于EtOH的GES-1细胞中的ROS水平并调节了氧化还原平衡。进一步作者通过蛋白质组学分析以鉴定差异表达蛋白，GO分析显示“抗氧化活性”“氧化还原酶活性”条目显著富集，此外，关键的抗氧化相关蛋白（GSS、SOD1、TXN）的表达显著升高，这些蛋白与抗氧化反应元件（ARE）相关，并作为转录因子NRF2的下游靶标发挥作用，结果表明CAP可能会激活氧化应激模型中的NRF2-ARE信号通路。进一步采用乙醇处理的GES-1细胞和过氧化氢（H2O2）处理的人脐带间充质干细胞（UC-MSC）的氧化应激模型，均显示CAP预处理同样提高了NRF2及其下游基因 TXN、HMOX1和NQO1的转录和蛋白质表达水平。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、辣椒素促进NRF2转位到细胞核中，并抑制NRF2的降解，保护线粒体功能[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者接着研究CAP预处理对NRF2的影响，免疫荧光以及核质分离后开展WB均证实发现CAP有效地促进了NRF2向细胞核的易位。进一步研究发现CAP可抑制NRF2会发生蛋白酶体降解，起到类似蛋白酶体抑制剂PS-341相同的效果。线粒体是 ROS的主要细胞内来源，作者发现，EtOH处理后破坏线粒体完整性，而CAP预处理保留了GES-1细胞中线粒体的结构完整性，改善EtOH导致的线粒体膜电位降低，稳定了细胞内ATP水平，降低乳酸以及PKM2、LDHA的转录水平，表明从糖酵解到氧化磷酸化的潜在代谢重编程。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、CAP破坏KEAP1-NRF2相互作用[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]为了探索CAP是否通过KEAP1调节NRF2，作者发现KEAP1表达在转录和蛋白质水平上都没有显著改变。鉴于CAP对KEAP1表达没有影响，表明CAP可能会破坏KEAP1和NRF2之间的相互作用。作者采用SPR和CO-IP均显示发现，KEAP1与NRF2体外直接结合，而CAP的添加减弱这种结合，结果表明CAP有效地损害了KEAP1-NRF2的互作。为了确定KEAP1 是否作为 CAP 介导的抗氧化特性的关键靶标，作者敲除KEAP1后发现，CAP显著激活野生型细胞中的NRF2和HO-1，导致细胞活力显著增加，而在KEAP1-KO细胞中CAP激活NRF2和HO-1的能力降低，结果表明KEAP1作为CAP赋予的抗氧化作用的关键介质，并在KEAP1-NRF2-ARE信号通路中起关键作用。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、辣椒素直接与KEAP1相互作用[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]接着作者研究了KEAP1和CAP之间的相互作用。通过CETSA证实了两者的直接结合，通过分子对接和分子动力学模拟发现KEAP1表面口袋内可能的CAP相互作用残基的位置，特别是负责与NRF2互作的Kelch结构域，模拟结果证实了CAP可以作为蛋白质-蛋白质界面抑制剂发挥作用。鉴于已知大多数先前鉴定的KEAP1抑制剂是通过对KEAP1的半胱氨酸残基进行共价修饰，从而破坏 KEAP1-Cul3 和 KEAP1-NRF2 之间的相互作用，从而激活下游 NRF2-ARE 信号通路，作者通过质谱鉴定发现尽管CAP直接与KEAP1结合，但它并不是通过共价相互作用实现。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、CAP在变构位点结合KEAP1[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]根据分子对接和动态模拟结果，作者纯化了野生型Kelch蛋白结构域（WT）和8种突变型（Mut），包括Y334A、R380A、N382A等，据报道，这些残基与NRF2和经典Keap1抑制剂结合。BLI和Pulldown实验发现KEAP1 上的CAP结合口袋和NRF2结合界面可能彼此不同，这意味着CAP是KEAP1的变构调节剂。为了探索CAP对Kelch结构域进行变构调节的潜在机制，作者进行了HDX-MS测定，发现CAP的加入导致Keap1的构象发生了变化，因此CAP可能通过变构调节削弱了KEAP1和NRF2之间的相互作用。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、IR-HSA@CAP的制备和表征[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者进一步开发了一种方便的纳米药物递送平台用于在体内有效利用CAP。利用人血清白蛋白 （HSA）、IRDye800成功配制了CAP封装的IRDye800-HSA纳米颗粒（IR-HSA@CAP），成功进行结构表征后，发现该纳米颗粒毒性低，且能够被细胞迅速内化，在胃环境中显著实现CAP的快速释放。在给药后的不同时间间隔进行成像显示CAP主要通过胃肠道处理，在胃内表现出明显的定位。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、IR-HSA@CAP NPs激活体内Nrf2/ARE信号通路改善胃粘膜损伤[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]接着体内评估了该纳米颗粒对体内Nrf2/ARE信号通路的影响。发现该纳米颗粒不会对胃组织造成明显损害，而暴露于EtOH的胃组织中，明显的出血和糜烂明显。纳米颗粒显著改善胃粘膜溃疡损伤（UI）指数，使用 H&E染色和Masuda评分系统量化了病理损伤的程度，发现CAP治疗显著降低病理损伤指数。此外，IR-HSA@CAP纳米颗粒的治疗效果超过了单独施用的CAP。还有，CAP或IR-HSA@CAP纳米颗粒进行预处理可显著减少ROS的产生，降低脂质过氧化水平，提高了细胞内HMOX1和NQO1基因的表达水平。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图7 IR-HSA@CAP NPs激活体内Nrf2/ARE信号通路改善胃粘膜损伤[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]进一步免疫组化和蛋白质印迹分析均显示IR-HSA@CAP预处理导致Nrf2，以及HO-1和Trx表达显著上调，这些结果表明,IR-HSA@CAP能够协调Nrf2/信号轴,从而为氧化应激和稳态平衡提供快速有效的调节机制。接着作者研究了IR-HSA@CAP的抗炎潜力，发现IR-HSA@CAP预处理可显著抑制促炎细胞因子的表达水平，增强抗炎细胞因子IL-10的表达。最后，作者证明了IR-HSA@CAP纳米颗粒在体内的高生物安全性。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]研究在体外和体内建立了乙醇诱导的急性氧化损伤模型，验证了CAP预处理对KEAP1-NRF2-ARE信号级联的影响，发现CAP的治疗效果，并通过BLI、CETSA、Pull-down、Co-IP和HDX-MS分析，发现CAP可以直接与KEAP1结合并抑制KEAP1与NRF2之间的相互作用，且该结合为变构结合。机制上，CAP 改善了线粒体损伤，促进了NRF2的核易位，从而促进了下游抗氧化反应元件HO-1、Trx、GSS和NQO1在GES1细胞中的表达。研究结果表明CAP是一种安全且新颖的NRF2激动剂，通过变构调节KEAP1，这可能有助于开发用于氧化应激相关疾病（例如衰老，癌症，神经退行性和心血管疾病）的先导药物。[/size]

[b][size=15px][color=#595959]小建中汤(XJZD)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]出自《伤寒论》，由饴糖、桂枝、芍药、生姜、大枣、炙甘草组成，常用于治疗[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]胃炎、胃溃疡、[/color][/size][size=15px][color=#595959]溃疡性结肠炎[/color][/size][size=15px][color=#595959]、[/color][/size][size=15px][color=#595959]肠易激综合征[/color][/size][size=15px][color=#595959]等[/color][/size][size=15px][color=#595959]消化[/color][/size][size=15px][color=#595959]系统疾病[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]，临床疗效显著。现代药理学研究证实，生姜能有效促进胃黏膜的合成，减弱胃蛋白酶的[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]消化[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]作用，对胃黏膜具有有效的保护作用；肉桂醛是桂枝的主要成分，具有抗溃疡和修复粘膜损伤的作用；芍药苷是芍药的主要成分，具有抗炎、抗氧化作用，可减少细胞损伤；甘草黄酮是甘草的主要成分，通过调节炎症介质和氨基酸代谢来治疗胃溃疡。以上提示XJZD可能具有[b]预防和治疗胃黏膜损伤[/b]的作用。然而，这种效应背后的确切机制尚不清楚。[/color][/size][size=15px][color=#595959]因此该研究采用[b]阿司匹林诱导胃黏膜损伤[/b]，[b]评价XJZD对阿司匹林诱导的小鼠胃黏膜损伤的拮抗作用并探索其潜在的作用机制[/b]。[/color][/size][align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]将C57BL/6小鼠随机分为6组(n =10)，对照组给予无菌水、模型组(阿司匹林300 mg/kg)、XJZD高剂量(12 g/kg)、XJZD中剂量(6 g/kg)、XJZD低剂量(3 g/kg)、奥美拉唑(20 mg/kg)组，每天灌胃，连用14 d。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]分析胃黏膜损伤面积、黏膜损伤指数及组织病理损伤程度。检测胃粘膜上皮[b]细胞凋亡[/b]。观察上皮[b]细胞自噬[/b]。分析紧密连接蛋白及凋亡、自噬和戊糖磷酸通路相关蛋白的表达水平。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959][/color][/size][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959]经XJZD（12、6、3 g/kg）处理后，黏膜损伤面积减少(83.4%、22.6%、11.3%)，ZO-1、occludin表达水平上调，上皮细胞凋亡率降低(40.8%、25.4%、8.7%)，自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达降低，p62表达升高，PI3K/AKT/mTOR/ULK1(ser757)信号通路被激活；AMPK/ULK1(ser317)信号通路被抑制。此外，XJZD还能拮抗阿司匹林引起的氧化还原稳态失衡，保护胃黏膜。[/color][/size] [color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][font=&][/font][font=&][/font][/color][/size][size=15px][color=#595959]XJZD通过[b]减少胃黏膜上皮细胞凋亡和抑制自噬[/b]，恢复了胃紧密连接蛋白的表达水平，保持了胃黏膜屏障的完整性，并抵抗阿司匹林诱导的胃黏膜损伤。该机制可能与[b]PI3K/AKT/mTOR/ULK1（ser757）途径[/b]的激活和[b]AMPK/ULK1（ser317）途径[/b]的抑制有关。同时，XJZD可以激活[b]磷酸戊糖途径[/b]，维持[b]氧化还原稳态[/b]，保护胃黏膜。[b]提示XJZD是预防和治疗胃黏膜损伤的有效药物。在自噬方面，该研究为XJZD改善阿司匹林诱导的胃黏膜损伤的机制提供了新的见解[/b]。[/color][/size][size=15px][color=#595959][font=&][/font][font=&][/font][/color][/size][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959] [/color][/size]

现代人由于快节奏的生活以及强大的工作压力，大部分人的胃都处于亚健康状态。不少人对此不屑一顾，认为胃病不是什么大病，挺一挺就过去了，往往疏于预防，延误治疗，造成严重问题。伤胃的“十大恶习”为什么白领阶级、职业记者、专业司机、空中小姐、影星歌星以及新兴的SOHO族们，容易患胃病，这与职业带来的不良生活习惯密切相关。归纳起来，伤胃的恶习有十种：一曰精神紧张长期精神紧张会通过大脑皮层影响植物神经系统，使胃粘膜血管收缩，胃功能紊乱，胃酸和胃蛋白酶分泌过多，导致胃炎和溃疡发生。二曰过度劳累无论从事体力劳动还是脑力劳动，都不能过度劳累，否则就会引起消化器官供血不足，胃粘膜分泌失调，从而导致种种胃病发生。三曰饥饱不均饥饱不均对胃有很大的伤害，饥饿时胃中空空，胃粘膜分泌的胃酸和胃蛋白酶很容易伤害胃壁，导致急、慢性胃炎或溃疡发生。暴饮暴食甚至会导致急性胃扩张、胃穿孔。四曰酗酒无度酒精会使胃粘膜发生充血水肿、甚至糜烂出血而形成溃疡。长期饮酒还损害肝脏，会引起酒精性肝硬化，胰腺炎的发生也与酗酒有关，这些损害反过来又会加重对胃的伤害。五曰嗜烟成癖吸烟会引起胃粘膜血管收缩，使胃粘膜中的前列腺素合成减少，使胃粘膜受到伤害。吸烟又会刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌，所以嗜烟成癖是引起各种胃病的重要诱因。六曰浓茶咖啡浓茶和咖啡都是中枢兴奋剂，能通过神经反射以及直接的影响，使胃粘膜发生充血、分泌功能失调、粘膜屏障破坏，促成发生溃疡病。七曰狼吞虎咽进食时狼吞虎咽，食物未经充分咀嚼，势必增加胃的负担。细嚼慢咽时唾液分泌增多，在保护胃粘膜的作用，可避免不良刺激物对胃粘膜的损害。八曰睡前进食睡前进食不仅影响睡眠，而且会刺激胃酸分泌，容易诱发溃疡。九曰不讲卫生幽门螺杆菌感染是导致胃炎、溃疡和胃癌发病的元凶，它可以通过餐具、牙具、接吻等相互传染。因此，讲究卫生，可以预防幽门螺杆菌感染，从而可以预防各种胃病。十曰监用药物常用的能损伤胃粘膜的药物有三类：一类是解热镇痛药如阿司匹林、保泰松、消炎痛等；一类是激素类药如强的松、地塞米松；还有一类是抗菌药如红霉素等。注意应用这类药物时，要严格遵医嘱慎而用之，以避免对胃造成损伤。保胃的“十字诀窍”胃病三分治七分养，合理的膳食结构是健康的基础、“保胃”的前提，如何才是合理的膳食结构呢，《健康快车》有个很好的归纳，就是十个字：“红黄绿白黑”＋“一二三四五”：所谓“红黄绿白黑”，就是五种对健康大有裨益的食物：“红”是一天一个西红柿，熟吃西红柿，效果更好。“黄”是指老玉米、胡萝卜、老南瓜、红辣椒等，这些食物维生素A多。“绿”是指绿茶，绿茶含有多种抗氧自由基物质。 “白”是指燕麦片，它不但可降低胆固醇，还对糖尿病、减肥有特别好的功效。“黑”是指黑木耳，科学实践证明黑木耳能降低血黏度，每天吃5－15克就行了。 所谓“一二三四五”，是关于每个人每天健康膳食的五个要点：“一”是每天一袋牛奶。我们中国的膳食有很多优点，但是缺钙，几乎90％的人都缺钙。大多数中国人的伙食里只有500毫克钙，还有300毫克的缺口———正好一袋牛奶就有300毫克的钙，所以每天补充一袋牛奶，就齐了。“二”是250克主食。每天250克碳水化合物，即半斤大米或麦面粉，体力劳动多的可以多一些，一些稍胖体力劳动又较少的女性可以适量减少一点。但吃饭要按四条规矩进行：饭前喝汤，进食速度慢，多咀嚼，晚饭吃得少，这样体重就很容易维持正常。 “三”是三份高蛋白。可从“一两瘦肉、一个鸡蛋，2两豆腐、2两鱼虾、2两鸡鸭、半两黄豆”中任意选择，每天要有三份———比如早上吃了一个荷包蛋，中午吃一个肉片苦瓜，晚上吃2两豆腐或2两鱼。“四”是四句话：有粗有细、不甜不咸、三四五顿、七八分饱。有粗有细，就是要粗细粮搭配，营养有互补作用。不甜不咸，是说不要净吃甜的，或不要吃太多甜的；也不要吃得太咸，一天吃6克左右的盐就适中。三四五顿，是指变每天三餐为四五顿，少吃多餐。早餐与午餐中间加一顿点心餐，下午四五时吃一顿，晚饭吃得晚一些，这样总量不变而不是越吃越多。七八分饱，是指要低热量膳食，七八分饱即可，这点非常重要。“五”是500克蔬菜和水果。 这是预防癌症的最好办法，对食道癌、胃癌能减少一半以上。