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刚接触液相,测定矢车菊素含量,根据文献,选用的0.5%的甲酸和乙腈溶液梯度洗脱50min,却不出峰。还请各位交流指导!
[font=&]ABPP[/font][font=宋体]技术近年来被广泛用于揭示天然活性分子的作用靶标,如黄芩苷、青蒿素、辣椒素及姜黄素等等,利用该技术可以实现对花色苷与蛋白质结合模式的深入探究。首先选择了最优活性的[/font][font=&]C3G[/font][font=宋体]进行修饰,将可点击的炔基引入[/font][font=&]C3G[/font][font=宋体]的[/font][font=&]A[/font][font=宋体]环,再根据此前开发的全合成路线[/font][font=&](Org. Lett. 2023,25, 13, 2289–2293)[/font][font=宋体],获得了共价结合探针[/font][font=&]C3G-Probe[/font][font=宋体]和非共价光亲和探针[/font][font=&]C3G-Diazirine[/font][font=宋体]。探针识别靶蛋白后,炔基通过点击化学与荧光染料或生物素连接的叠氮基发生反应。对于非共价分子,需要额外的光亲和基团和紫外光照才能形成稳定的标记。荧光染料直接表征探针的标记,而生物素通过链霉亲和素富集靶蛋白。进一步用胰蛋白酶消化,并通过[/font][font=&][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS[/font][font=宋体]进行鉴定[/font][font=宋体]。[/font] [size=15px][font=宋体]花色苷是广泛存在于深色果蔬中的天然活性分子,具有多酚取代的黄酮类结构,其特征为母环的鎓盐氧离子。传统观点往往将其活性作用的分子机制归因于非共价相互作用及对信号通路的影响。然而,这忽略了其鎓盐氧离子骨架的亲电反应性质。实际上,自然界中存在的多种花色苷衍生物,如吡喃花色苷、[/font][font=&]A[/font][font=宋体]型原花青素及二聚体等,都是源于花色苷骨架结构的亲电性而生成。此外,前期文献也报道了花色苷类似结构与氨基酸残基的共价反应,以及结合[/font][font=&]SO[/font][/size][font=&][size=12px]2[/size][/font][size=15px][font=宋体]以实现特异性检测,但却一直缺乏围绕花色苷与蛋白质共价作用的系统性研究。因此,迫切需要彻底阐明花色苷与蛋白质的作用方式,以期指导日常膳食及未来的研究。[img=,690,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409101347529911_4834_6561489_3.png!w690x426.jpg[/img][/font][/size]
花青素含量(g/L)=(A×M×DF×m×V)/(E×L)A 吸光值, M 矢车菊—3—O—葡萄糖苷的分子量,449.2,DF 稀释倍数,m 样品的质量,V 提取液的总体积,E Cy—3—glu的消光系数29600, L 比色皿的宽度 1cm用这个公式对么?如果对,是不是用M 矢车菊—3—O—葡萄糖苷作为调零的试剂?