雷公藤甲素

适用范围 ✦蜂蜜中雷公藤甲素的定性定量测定。色谱条件 ✦色谱柱：月旭Boltimate® C18 Core Shell (2.1×100mm，2.7μm) 。柱温：25℃；流速：0.3mL/min；进样量：5μL。质谱条件 ✦离子源：ESI ；检测方式：MRM；干燥气：氮气，500℃；流速：1000L/Hr；碰撞气：氩气；离子喷雾电压：3.0 kV。谱图和数据 ✦1.试剂空白2.雷公藤甲素标准品溶液3.蜂蜜本底4.加标回收结论 ✦该方法能很好的净化基质中的杂质，对目标物的回收率适中，液相柱能将各物质良好分离，检测时间短，分析效率高，能作为可靠的日常检测方法。产品信息 ✦

2011年7月7日，第二届质谱论坛在北京师范大学英东学术讲堂成功举办。来自北京周边地区各研究院所、高校、检测机构的共计200余位专家和科研人员参加了此次论坛。质谱论坛由北京师范大学质谱中心发起，并得到中国质谱学会的大力支持。第二届质谱论坛的主题是质谱技术在生物医药中的应用。本期论坛合办和赞助方为赛默飞世尔科技公司。此次报告邀请的专家有：中科院生物物理所杨福全研究员，清华大学生命学院邓海腾教授，军事医学科学院谢剑炜研究员，以及赛默飞世尔科技公司的刘婷工程师。 质谱论坛会场 　　首先来自北京师范大学质谱中心主任谢孟峡教授致开幕词并做质谱中心相关情况介绍。质谱论坛的宗旨是为质谱技术在各学科的应用提供一个高层次的学术交流平台，推动质谱技术的学科建设发展中的支撑作用。首届质谱论坛于去年10月份举办后受到了社会各界的广泛关注。首届质谱论坛邀请的报告人有中国科学院北京基因组研究所刘斯奇研究员、中国医学科学院基础医学研究所的李智立教授、北京师范大学生命学院的何大澄教授。 　　第二届质谱论坛得到了赛默飞世尔科技的大力支持。谢老师提到，北京师范大学和赛默飞世尔的合作长达30多年，从上世纪80年代初，北师大购买的第一台质谱就来自赛默飞世尔科技前身即菲尼根公司；之后在1999年购置菲尼根气质联用，2005年购置了气相稳定同位素质谱仪，2009年购置了赛默飞世尔公司第一台线性离子阱LC/MS等等。 　　北京师范大学质谱中心采用分散放置，统一管理的运行模式，现在运行12台大型质谱仪器设备，分别放置在分析测试中心、生命科学学院、化学学院、环境学院、减灾与应急管理研究院和二炮总医院。仪器种类包括气质联用仪、气相色谱-四极杆飞行时间质谱、液相色谱-三重四极杆质谱、液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱、液相色谱-四极杆线性离子阱串联质谱、气相稳定同位素质谱等，可以对生物大分子、药物、环境等方面的研究提供技术支撑。作为北京师范大学教师和研究人员开展科学研究的技术支撑体系，质谱中心在开展质谱检测技术、方法学及在相关领域的应用研究、促进不同学科间的交流合作、培养高水平、高素质专业人才等方面发挥着非常重要的作用。谢孟峡教授还向大家介绍了质谱中心管理委员会成员和学术委员会成员。学术委员会还新聘请了中国科学院生物物理研究所杨福全研究员、清华大学邓海腾教授、军事医学科学院毒物药物研究所谢剑炜研究员。 来自赛默飞世尔科技的应用工程师刘婷为大家作了题为《高分辨质谱提高代谢物鉴定的数量和可靠性》的报告。 　　代谢物鉴定的重要性 　　刘工程师讲到，DMPK贯穿新药研发的始终，FDA以及SFDA里面都有药物DMPK的相关指导原则，即：新药研发中，为了评价药物的安全性和有效性，需要阐明药物的代谢过程，并考察可能的药物相互作用。2002年MIST法案和2008年的FDA指南都规定了必须要鉴定出主要的代谢产物、活性代谢产物和具有毒性的代谢产物。并且FDA指南规定，在人血液里，在稳态条件下，血液中的代谢产物达到了母药暴露水平的10%则必须进行定量研究。 　　高分辨质谱提高代谢物鉴定的数量和可靠性 　　从代谢物鉴定方法的发展来看，1989年以前主要是利用TLC和HPLC 来进行鉴定，耗时长，效率不高，鉴定几种代谢物通常需花费几周甚至几个月的时间，且缺乏定性能力；90年代后，LC/MS技术得到应用，主要应用离子阱质谱和三重四极杆质谱，可以较好地定性，将几个代谢产物鉴定的时间缩短为几周，但是仍无法满足药物代谢研究中高通量的要求；2008年之后，高分辨质谱在药物代谢研究中的应用越来越广泛，这类质谱包括Q-TOF、Orbitrap等，在几天的时间内就能鉴定出1-3个化合物。 　　那么为什么要用高分辨质谱，多少分辨率才够用呢？药物代谢研究针对的不是标准品而是复杂的生物基质，存在大量的干扰，高分辨的意义就在于可以有效地排除干扰。在举例Isazophos（m/z 314.04941）的药物定量实验中，存在本底噪音（m/z 314.07141），分辨率只有在50,000以上，才可能很好地排除干扰并准确定量。另一个例子是测定红茶中的茶多酚，分辨率达到80,000时才足以准确地鉴定花青素（m/z 577.13405）并排除干扰（m/z 577.15518），和进行定量。 　　关于精确质量数的作用，可以发表在Clinbiochem. 2010. 08.018上的文献来说明，该例中，质量偏差如控制在±5ppm以内，则能消除假阳性，提高灵敏度。稳定的高质量精度可获得优异的定量RSD重复性，并可准确定性元素组成。而要获得提取色谱峰非常对称的峰形，和稳定的高质量精度，常常需要高分辨（比如举例中需要50,000以上的分辨率）。 　　代谢物研究中对高分辨质谱的要求是：具备高分辨率和高质量精度，从而保证复杂样品测定的质量精度；同时还需质量精度稳定性好，才能保证每个扫描点的质量精度。赛默飞世尔科技公司的Orbitrap质谱是当今分辨最高的高通量质量分析器，它包括台式Orbitrap系列（Exactive）和LTQ Orbitrap系列。今年ASMS推出的Q-Exactive，分辨率达到了140,000，采集速度提高了两倍；而新推出的LTQ Orbitrap Elite，分辨率达到了240,000，采集速度提高了4倍。 高分辨质谱在代谢产物鉴定的应用思路 　　高分辨质谱用于代谢产物鉴定，最主要的两条应用思路是应用多种数据采集和数据处理方式。数据采集有多种模式，包括DDPT数据依赖性扫描，可自动激发做多级扫描；母药分子式如含有卤族元素可用同位素激发模式做数据依赖性扫描；依赖仪器需要运用极性切换的功能来进行代谢物确认。 　　数据分析时用到两类数据：一类是全扫描数据，一类是多级扫描数据。针对全扫描数据分析，常用方法包括质量亏损过滤（MDF）及多重质量亏损过滤（MMDF）、背景扣除、同位素过滤、提取离子流图。针对多级扫描数据分析，常用子离子过滤和中性丢失过滤（即根据一些中性丢失碎片进行代谢物查找）。 　　应用实例——雷公藤甲素代谢物鉴定 　　接下来刘工重点列举了雷公藤甲素（Triptolide）代谢物鉴定的应用实例。雷公藤是临床上治疗风湿性关节炎的主要用药，毒性很强，临床表现为肝肾毒性。其中雷公藤甲素是雷公藤的主要药理成分，研究雷公藤甲素的代谢产物特别是反应性代谢产物对解释雷公藤的肝肾毒性有重要的意义。其研究难点在于：质谱离子化效果不佳，响应强度不高。 　　该实验主要运用赛默飞世尔科技Acclea U-HPLC和LTQ Orbitrap与Q-Exactive质谱进行分析，分别进行了雷公藤甲素体外和体内代谢分析。 　　在建立LC-MSn方法中，首先对流动相进行了优化，加入了NH4AC帮助形成[M+NH4]+从而提高信号响应，解决了灵敏度问题。LTQ Orbitrap和Q-Exactive质谱主要采用了数据依赖性扫描，其中LTQ Orbitrap主要采用的是CID加宽带激发碰撞模式，Q-Exactive则采用HCD高能碰撞模式，从而得到更多离子碎片信息。 　　Metworks软件确认代谢物过程实现了数据采集和数据分析两种功能。Metworks软件的MMDF（多重质量亏损过滤）功能用于分析体内大鼠尿液样品，中性丢失过滤功能进行反应性代谢物查找，子离子过滤功能查找代谢物，Mass Frontier软件对雷公藤甲素碎片分析，最终发现了107种代谢物。 参会人员对赛默飞世尔科技质谱技术非常关注 　来自中国科学院生物物理研究所的杨福全研究员的演讲题为《蛋白质组学技术在生物医学研究中的应用》。来自清华大学生命学院的邓海腾教授做了题为《Application of mass spectrometry beyond Proteomics》的报告，主要内容是关于质谱在代谢组学方面的应用。来自军事医学科学院的谢剑炜研究员做了题为《芥子气暴露的确证》的报告。 　实验室参观 　　论坛结束后，大家一同乘车前往清华大学，参观了生物医学测试中心蛋白化学平台实验室。 仪器负责人给大家介绍Orbitrap Velos nLC-LTQ Orbitrap Velos 关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技（纽约证交所代码： TMO）是科学服务领域的世界领导者。我们致力于帮助我们的客户使世界更健康、更清洁、更安全。公司年销售额接近 110 亿美元，拥有员工约37000人。主要客户类型包括：医药和生物技术公司、医院和临床诊断实验室、大学、科研院所和政府机构，以及环境与工业过程控制行业。借助于Thermo Scientific 和 Fisher Scientific 两个首要品牌，我们将持续技术创新与最便捷的采购方案相结合，为我们的客户、股东和员工创造价值。我们的产品和服务有助于加速科学探索的步伐，帮助客户解决在分析领域所遇到的各种挑战，无论是复杂的研究项目还是常规检测或工业现场应用。 欲了解更多信息，请浏览公司网站：www.thermofisher.com 或www.thermofisher.cn（中文）。

仪器信息网讯 由仪器信息网、中国化学会质谱分析专业委员会联合主办的第五届质谱网络会议iCMS2014于2014年11月21日圆满结束，清华大学分析中心作为支持单位参与本次大会。来自高校、科研院所、质检机构、企业分析测试中心、质谱仪器厂商等单位的专家、用户参加了本次网络会议，本次会议报名人数近3600人次。 本次质谱网络大会在传递新质谱技术的同时，注重质谱应用技术的交流，除邀请长期从事质谱技术研究的专家做精彩报告外，还邀请多位在一线岗位上从事质谱分析工作的中、青年学者分享其工作成果。与会人员不仅学习到前瞻质谱研究技术，也可将所从事的工作与会议内容结合起来，解决实际工作中的问题。会议交流互动热烈，每个报告后，与会人员都会向专家提出十余个问题进行交流探讨。 本届质谱网络大会2014年11月18日开幕，21日结束，历时4天，会议围绕当前食品、药品、环境等热点应用领域开设了质谱新技术、地质能源、药物分析、蛋白质组学/代谢组学、环境分析、食品分析6个大会主题专场，共邀请了31位国内外的著名质谱专家作精彩报告。 清华大学化学系林金明教授在质谱新技术专场作&ldquo 质谱检测样品进样新方法研究&rdquo 报告，报告在综述常规固、液相样品前处理的基础上介绍了三种创新性样品前处理方法：采用碳基底的纳米材料进行固相微萃取富集燃料气中有机杂质；采用纸基质液滴电喷雾技术，微透析在线样品，富集细胞培养液中目标化合物；采用生物打印技术与质谱联用技术实现单细胞水平的分析。 中国检验检疫科学研究院的张九凯博士在食品分析专场作了&ldquo 代谢组学技术在保健食品真伪鉴别中的应用&rdquo 报告，报告指出代谢组学技术由于其自身技术特点，可对测试对象进行代谢物全谱检测，应用上可实现&ldquo 亡羊补牢&rdquo 到&ldquo 主动防御&rdquo 的转变，可以解决当前传统的食品安全检测方法的目标性和滞后性的缺点。 中科院生态环境研究中心的于志勇博士分享了&ldquo 质谱在我国生活饮用水卫生标准及WHO水质标准中的应用&rdquo 研究工作成果。报告对现行检测标准中涉及质谱检测的相关技术进行了介绍，指出在水质检测中四极杆质谱、串联四极杆质谱主要用于定量分析，其中气相色谱质谱联用仪主要用于分析挥发性、半挥发性物质，液相色谱质谱联用仪主要用于分析难挥发、易热分解的物质。 中国医学科学院药物研究所的张金兰研究员在药物分析专场作了题为&ldquo 基于脂质组学雷公藤肝肾毒性作用机制的研究&rdquo 的报告，报告介绍了利用基于液相色谱质谱技术建立的靶向鞘脂组学分析检测平台而开展的基于鞘脂组学对雷公藤甲素毒性作用机制和毒性作用机制研究的相关工作。 中科院生态环境中心张庆华研究员在&ldquo 持久性有机污染物（POPs）分析方法和技术研究进展&rdquo 报告中综述了持久性有机污染物（POPs）分析方法及研究进展。报告针对POPs性质分别介绍了相应的质谱分析方法，并以多氯萘、短链氯化石蜡、全氟化合物等物质为例，详细阐述了持久性有机污染物的分析策略。 中国检验检疫科学院彭涛博士在&ldquo 保健食品中违禁添加化学物质的色-质联用分析&rdquo 报告中针对当前保健食品发展中存在的问题，深入剖析相关检测技术现状，详细介绍检测镇静、减肥、抗疲劳、降血糖、降血压类保健品中违禁添加物的色-质联用技术。 为促进国内外质谱仪器及其相关应用技术的交流，会议还邀请了来自海外的Vincent VanBuren教授、Giuseppe Astarita教授、W. Andy Tao博士为与会人士带来全球质谱仪器及应用最新发展动向方面的报告。 蛋白质组学/代谢组学专场特邀请普渡大学生物化学专家W.Andy Tao教授作了题为&ldquo Proteomics Overview&rdquo 的报告。Dr.Tao教授详述了2002年至今12年间蛋白质组学的发展历程，阐述了后基因组学时代蛋白质组学应运而生的科学背景，并介绍了蛋白质组学在早期诊断及药物研发治疗靶标识别方面的指导意义。 此外，西北大学大陆动力学国家重点实验室袁洪林教授、中国食品药品检定研究院孙会敏研究员、中国食品药品检定研究院宁保明研究员、中国食品药品检定研究院梁成罡研究员、吉林大学生命科学院顾景凯教授、中国医学科学院药用植物研究所胡克平教授等多位质谱界知名专家首次接受仪器信息网的邀请，积极参与了本次会议，向与会者分享了各自的研究成果。 知名质谱仪器厂商AB Sciex公司、岛津企业管理（中国）有限公司、美国力可公司、赛默飞世尔科技公司、珀金埃尔默仪器（上海）有限公司、天瑞仪器股份有限公司等对本次网络会议给予大力支持。其中，作为国产质谱仪器&ldquo 领军人&rdquo 的江苏天瑞仪器股份有限公司首次出现在质谱网络会议赞助商名单中，向与会者传递了国产质谱仪器快速发展的讯号，获得与会者高度关注，十余位与会网友与天瑞公司报告人进行了互动交流。 关于质谱网络会议iCMS 质谱网络会议(iConference on Mass Spectrometry，iCMS)是仪器信息网组织的质谱领域中最大的网络会议，旨在向众多质谱从业人士提供一种便捷、有效的技术交流平台，足不出户即可听到高水平的质谱专业报告。质谱网络会议(iCMS)自2014年起，在原来网上报名方式的基础上增加了微信报名方式，为广大网友参与会议提供了更加便捷的渠道。 自2010年至今，iCMS已成功举办五届，逾万人报名参会；邀请了国内外百余位质谱专家为大家呈现上百场高水平专业报告；十余家国内外质谱专业公司赞助。 第六届质谱网络会议iCMS2015将于2015年11月17-20日召开，精彩继续，敬请期待！ 历届iCMS回顾，请点击：http://www.instrument.com.cn/webinar/icms2014/sche.aspx