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近日，山东省财政厅印发《关于进一步优化科研仪器设备政府采购工作的通知》（以下简称《通知》）。《通知》强调进一步扩大科研项目采购自主权。高校、科研院所政府采购科研仪器设备按照分散采购执行，针对急需开展的科研仪器设备采购项目，可不公开政府采购意向。《通知》提出简化进口产品采购审核。因科研需要，相关仪器设备在中国境内无法获取或者无法以合理的商业条件获取的，高校、科研院所可根据《政府采购进口产品审核指导标准》，在预算管理一体化系统提出申请，经主管预算单位审核同意后，财政部门备案即可采购进口产品。《通知》提倡推广框架协议采购方式。高校、科研院所对技术标准明确、统一，需要多频次重复采购的小额度的科研仪器设备和耗材，可依据《政府采购框架协议采购方式管理暂行办法》采用框架协议采购方式，进一步提高科研仪器设备政府采购质效，为科研人员提供工作便利。《通知》还在鼓励采用“预采购”模式、优化采购方式变更管理、自主择优选定评审专家、支持大型仪器设备租赁配置试点、加强政府采购内控管理等方面提出了优化建议。全文如下：山东省财政厅关于进一步优化科研仪器设备政府采购工作的通知省直各部门、单位，各政府采购代理机构：为充分发挥科研项目资金使用效益，激励科研人员多出高质量科技成果，促进科教强鲁人才兴鲁战略实施，根据《国务院办公厅关于改革完善中央财政科研经费管理的若干意见》（国办发〔2021〕32号）、《山东省人民政府办公厅印发关于改革完善省级财政科研经费管理的实施意见》（鲁政办发〔2022〕6号），现就进一步优化科研仪器设备政府采购工作有关事项通知如下：一、进一步扩大科研项目采购自主权高校、科研院所政府采购科研仪器设备按照分散采购执行。采购限额标准以上的科研仪器设备，应当编制政府采购预算，由高校、科研院所自行组织采购或者委托采购代理机构组织采购；未达到政府采购限额标准的，由各高校、科研院所按照本单位内部控制管理规定组织采购活动。急需开展的科研仪器设备采购项目，可不公开政府采购意向。二、实行采购计划“直通车”各高校、科研院所在科研仪器设备采购活动开始前，应当在预算管理一体化系统政府采购和政府购买服务模块（以下简称“一体化系统”）中填报“政府采购计划”，勾选“科研项目”，并明确采购项目的要素，包括采购品目、采购方式、采购代理机构、进口产品等信息，主管预算单位确认后，一体化系统自动备案，该项“政府采购计划”直达采购人。已经执行的“政府采购计划”（采购公告发布前）需要调整的，在一体化系统中通过“计划变更”栏目进行调整，一体化系统自动备案。三、鼓励采用“预采购”模式“预采购”模式是指在资金预算批复之前，对经省财政厅核定确有资金保障的项目，可以提前备案政府采购计划，开展政府采购活动直至发布中标（成交）通知书环节，财政部门根据中标（成交）结果批复下达项目预算资金，采购双方据此直接签订采购合同。高校、科研院所使用科研项目资金（包括横向科研资金和纵向科研资金）开展采购活动，鼓励采用“预采购”模式，更好满足科研人员的科研需要，推动科研项目资金在第一时间发挥效益，进一步提高采购工作效率。四、优化采购方式变更管理对依法应当采取公开招标方式采购的科研仪器设备，需要变更为竞争性谈判、竞争性磋商、询价方式的，由高校、科研院所在一体化系统提出申请，经主管预算单位审核同意后，财政部门备案即可。对变更为单一来源采购方式的，高校、科研院所要按照《政府采购非招标采购方式管理办法》（财政部令第74号）规定，组织专家论证，并在“中国山东政府采购网”公示，公示无异议的，报财政部门审核通过后实施。五、简化进口产品采购审核政府采购应当采购本国货物、工程和服务。因科研需要，相关仪器设备在中国境内无法获取或者无法以合理的商业条件获取的，经审核可以采购进口产品。高校、科研院所根据《政府采购进口产品审核指导标准》，在一体化系统提出申请，经主管预算单位审核同意后，财政部门备案即可。采购进口科研仪器设备，应当组织产品技术专家和法律专家进行充分论证，并由专家出具《政府采购进口产品专家论证意见》，拟采购国家限制进口的重大科学仪器和装备的，应当出具科技部的意见。六、自主择优选定评审专家政府采购科研仪器设备项目，应当依法组成评标委员会、谈判小组、询价小组、磋商小组等进行评审，确定中标或者成交候选人及顺序。针对科研仪器设备采购项目具有技术复杂、专业性强的特点，允许各高校、科研院所根据采购方式依法确定评审专家数量及人员组成，自行择优选定评审专家。自行选定的评审专家与供应商有利害关系的，应当执行有关回避规定。评审活动开始前，采购单位和代理机构不得泄露评审专家相关信息。评审活动结束后，采购单位或代理机构应将自行选定的评审专家信息及专家评审打分情况录入政府采购专家管理系统。七、推广框架协议采购方式高校、科研院所对技术标准明确、统一，需要多频次重复采购的小额度的科研仪器设备和耗材，可依据《政府采购框架协议采购方式管理暂行办法》（中华人民共和国财政部令第110号）采用框架协议采购方式，通过公开征集程序，确定第一阶段入围供应商，由项目管理单位按照框架协议约定规则，采取直接选定、二次竞价等简易方式确定第二阶段成交供应商。第二阶段交易可通过省政府采购网上商城实现，进一步提高科研仪器设备政府采购质效，为科研人员提供工作便利。八、支持大型仪器设备租赁配置试点为强化政府资源统筹配置、促进资金节约高效使用，在教育、卫生等重点行业领域，探索建立大型仪器设备（单项价值50万元以上）市场化租赁配置机制。省级各试点单位可根据科研事业发展需要，科学提出大型仪器设备租赁配置需求方案，编制政府采购预算，通过采购“租赁服务”公开择优确定租赁供应商。九、加强政府采购内控管理各高校、科研院所要切实履行采购主体责任，建立健全岗位清晰、职责明确、权责对等的政府采购内部控制管理机制，加强关键环节和风险点的管控，确保科研仪器设备采购的质量和效率。对采购限额标准以下、不需要编制政府采购预算的项目，要制定科研经费专项采购管理办法和内部控制流程，确保满足科研工作需要。对自行组织采购活动的，要提高采购文件编制和采购活动组织水平，保证采购活动依法合规、有序高效。要加强科研仪器设备采购信息公开，保证采购全过程公开、透明，可追溯。要建立科研仪器设备采购绩效管理机制，实现财政科研资金全流程闭环管理，不断提高依法采购水平和财政资金使用效益。

广州市越秀区疾病预防控制中心是广州市区域新发传染病和食源性疾病专项检验中心，实验室能力达到国家A类水平，目前是广州市内服务能力和应对重大突发公共卫生事件最重要的监测机构之一。小睿有幸采访到越秀疾控理化检验科科主任谢承恩，聊聊谢科心中自动化前处理实验室的理想与现实。“基层工作中，疾控中心专项任务多，人员不足，特别是新冠疫情发生以来，大家都投入到防控工作中，检测人员更是一岗双责，实验室为此补充了前处理设备，我们的前处理工作缩短了1/4的时间，样品前处理的量也提高了30%。实验室采购自动化前处理设备目的是扩大服务能力，为食源性疾病监测提供技术支持。”——越秀疾控理化检验科科主任谢承恩“ 手动进行样品前处理存在一些问题 ”首先是手动操作的误差大，操作人员的工作量也大；其次在检验数据的溯源性方面，繁琐的前处理过程原始记录难以完全复现；另外，操作过程中，检验人员暴露于高浓度的有毒的试剂中，对人体的健康也有造成危害 。“ 我们的前处理工作缩短了1/4的时间 ”2015年，我们在食品安全风险监测中，首次购买了睿科集团的全自动固相萃取仪02HT。随着自动化设备的应用，我们实验室扩展了样品制备过程中多种类食品同时开展的能力，日常检测中，我们的前处理工作缩短了1/4的时间，而且我们样品前处理的量也提高了30%。另外，我们的质量控制水平也得到了提高，有助于实验室保证检验定性定量的灵敏度，对于检测结果的重现性和准确性也得到了帮助。基层工作中，疾控中心专项任务多，人员不足，特别是新冠疫情发生以来，大家都投入到防控工作中，检测人员更是一岗双责。实验室为此补充了全自动固相萃取仪、全自动均质仪、多功能样品制备工作站、自动配标仪、全自动氮吹浓缩仪等等设备。实验室采购自动化前处理设备目的是扩大服务能力，为食源性疾病监测提供技术支持。ISP 600多功能样品制备工作站Fotector-02HT全自动固相萃取仪Fotector Plus固相萃取仪&EVA80浓缩仪AH 50均质器&AP 200液体处理工作站“ 睿科在售后服务以及应用的响应方面，给了我们很大帮助”2016年，我们进行广州市风险监测兽药残留专项，忽然发现，在花甲的检出中，氯霉素残浓度非常地高，这个浓度是我们意料之外的，当时我们就很担心，这种高浓度物质检测过程会造成残留以及样品的交叉污染吗？针对这个问题，睿科的应用工程师及时响应，马上对我们的整个冲洗流程进行了一个优化，在他们的帮助下，我们对整个样品管路、柱塞杆，注射泵等关键环节进行了冲洗优化，我们这个专项的检测顺利完成，经过市疾控的复核，结果是非常满意的，为当年的数据监测提供了有力的帮助。“ 解决实验室困境最好的办法，就是将各个过程都模块化、自动化、依需求灵活组合 ”我们和睿科集团共建自动化应用的联合实验室，对于我们今后的一个方法开发，以及人才培养将会起到很好的帮助作用，我们也会把自动化实验室的理念，进行一个推广和应用。实验室前处理正朝着更高效、更便捷、样品用量更少、以及数据精度更高的方向发展，如何利用自动化前处理代替人工操作，已经逐步成为大家的一个共识，能够解决实验室困境最好的办法，就是将这个过程中都模块化、自动化，最好是各个模块能根据客户的需求进行一个灵活的组合，我们将会以现代化实验室建设为目标，共同推进这些自动化设备的应用和实践。

本文来源： 柯瑞斯质谱平台摘 要目的　 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)、维生素E(α-、β-和γ-生育酚)的方法。 方法　 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈(50:50, v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取，以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱，2.5mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相，梯度洗脱，电喷雾电离(ESI~+)、多反应监测(MRM)模式下检测，同位素内标法定量。结果　 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好，相关系数r0.995；6种脂溶性维生素的检测限为0.20～1.25ng/mL，定量限为0.39～3.88ng/mL；加标回收率为86.6%～107.7%，日内精密度9.6%，日间精密度9.3%。NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度，结果偏差均在5%以内。结论　 本方法准确度高、重现性好、用血量少，适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测。正 文维生素在人体生长代谢过程中发挥着重要作用，是人体必须的微量营养素，缺乏或过量都会对人体健康产生不利影响。维生素A、D、E是脂溶性维生素，研究表明缺乏这些维生素会增加患夜盲症、骨质疏松、心血管疾病及免疫系统相关疾病的风险[1],婴幼儿及未成年人缺乏其对生长发育的影响则更为明显[2-4]。目前维生素检测的方法主要有高效液相色谱法[5-7]、液相色谱-串联质谱法[8-14]等，其中液相色谱-串联质谱法因其灵敏度高、重现性好、可同时快速检测多种维生素已成为很多临床实验室的首选方法。但是目前的液相色谱-串联质谱方法血液需求量较大[10,13],检测项目单一[8-9,14]或检测时间较长[11],不能满足临床同时快速检测多个项目的需求，特别是婴幼儿采血困难采血量很难满足需求。虽然已有部分学者建立微量检测方法用于维生素检测，但是这些方法需要衍生化过程，前处理复杂耗时较长[8-9,14]。因此，建立能够用微量血液同时快速检测多种维生素的方法满足临床不同年龄段的检测需求显得尤为必要。此外，视黄醇，维生素D的代谢产物25-OH-VD2、25-OH-VD3,α-生育酚是脂溶性维生素A、D、E在血液循环中的主要存在形式，常作为脂溶性维生素检测的首选指标[15-18]。γ-生育酚是维生素E主要的饮食摄入形式，但其与α-生育酚转移蛋白(α-TTP)的亲和力较低，在体内含量较α-生育酚低，但是，近年来文献报道其在人体健康活动中也扮演着重要角色[19]。本文建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中视黄醇，维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)和α-、β-、γ-生育酚的方法，满足临床各年龄段尤其是对婴幼儿同时快速检测多种维生素的需求。１实验部分１.１　 仪器与试剂　液质联用仪；高速冷冻离心机；涡旋振荡仪；超声波振荡器；氮吹仪(Agela)；紫外分光光度计。视黄醇、25-OH-VD2、25-OH-VD3、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚均购自美国Sigma-Aldrich；视黄醇-d6标准品购自上海谱芬生物；25-OH-VD2-d3购自美国IsoSciences、25-OH-VD3-d6、α-生育酚-d6标准品购自加拿大TRC 血清质控样品购自美国NIST 收集安徽省第二人民医院近期健康体检正常儿童血液样本17份，避光保存。LC-MS级甲醇，色谱级乙腈、正已烷及甲酸均购自美国Fisher；甲酸铵、牛血清白蛋白(BSA)购自美国Sigma-Aldrich；色谱级乙醇购自国药集团。实验用水由Milipore纯水仪(美国密理博)提供。１.２　 标准溶液和内标溶液的配制　 用无水乙醇配制视黄醇标准品储备液100μg/mL；α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚标准品储备液各1000μg/mL，并用紫外分光光度计对其浓度进行校正[18,20]。用甲醇配制25-OH-VD2标准品储备液25μg/mL和25-OH-VD3标准品储备液100μg/mL，视黄醇-d6标准品储备液100μg/mL，25-OH-VD2-d3标准品储备液50μg/mL，25-OH-VD3-d6标准品储备液50μg/mL，α-生育酚-d6标准品储备液1000μg/mL。将各目标化合物标准储备液用复溶液(初始流动相)稀释混匀，配制成混合标准溶液(视黄醇2.50μg/mL、25-OH-VD2 0.20μg/mL、25-OH-VD3 0.40μg/mL、α-生育酚50.00μg/mL、β-生育酚5.00μg/mL、γ-生育酚 5.00μg/mL)；将各同位素标品储备液用甲醇稀释混匀，配制成混合内标工作液(视黄醇-d6 2.00μg/mL、25-OH-VD2-d3 0.10μg/mL、25-OH-VD3 0.20μg/mL、α-生育酚-d6 20.0μg/mL)。取4g BSA溶解于100mL水中配成4% BSA溶液。１.３　 样本前处理　 取血清样品20μL至2mL离心管中，加入10μL同位素内标工作液，80μL水，2000r/min涡旋振荡30s后加入200μL甲醇-乙腈(50∶50,v/v)，2000r/min混匀60s；加入800μL正己烷，2000r/min，混匀5min，然后4℃，12000r/min离心5min；吸取600μL上清液至1.5mL离心管中，室温下氮气吹干；加100μL初始流动相复溶，涡旋振荡60s，4℃，12000r/min离心5min，上清液转移至进样瓶中待分析。１.４　 色谱 － 质谱条件　 采用Phenomenex Kinetex F5(100mm × 2.1mm, 2.6μm)色谱柱，柱温35℃，流动相A含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的水溶液；流动相B含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的甲醇溶液，梯度洗脱程序：0～2.0min，70%B，2.0～2.5min，70%～88% B，2.5～3.5min，88% B，3.5～3.51min，88%～81%B，3.51～11.0min，81% B，11.0～12.0min，81%～70%B，流速0.5mL/min。进样量：20μL。采用多反应监测(MRM)、电喷雾正离子模式(ESI+)，离子源温度 150℃，脱溶剂温度500℃，毛细管电压3kV，脱溶剂气流速1000L/h；6种脂溶性维生素的MRM 离子参数见表1。２　 结果与讨论２.１　 前处理条件优化　 对血清前处理过程中蛋白沉淀剂(甲醇、乙腈、乙醇)的选择及萃取溶剂正己烷的用量(400μL、600μL、800μL)进行了优化，结果表明，甲醇-乙腈(50∶50,v/v)，沉淀效果最好，色谱图杂峰明显减少；正己烷用量较大时萃取更完全，信号值更高。另外，考察了不同复溶液体系：甲醇-水(50∶50,v/v)、甲醇-水(70∶30,v/v)、甲醇均含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸对色谱分离的影响，结果如图1所示，使用b组复溶液即初始流动相时视黄醇响应值较a组增加1倍以上，c组视黄醇峰宽变大且峰形不对称。同时b组中25-OH-VD3和25-OH-VD2响应值是a组的2倍、c组的4倍以上，且峰形明显改善有利于25-OH-VD3和 25-OH-VD2的分离检测。最终，采用血清样加水混匀后用200μL沉淀剂(甲醇：乙腈(50∶50,v/v)沉淀蛋白，800μL正已烷液液萃取，取600μL上清液氮吹，初始流动相复溶进样。２.２ 　 液 相 色 谱 条 件 优 化 　 Kinetex F5色谱柱可以实现所有组分包括β、γ-生育酚的分离。此外，25-OH-VD3同分异构体3-epi-25-OH-VD3在婴幼儿体内含量较高，对维生素D含量测定影响较大[21]，该色谱柱可以实现25-OH-VD3和3-epi-25-OH-VD3的分离，减少3-epi-25-OH-VD3对检测结果的影响。故采用Kinetex F5色谱柱进行所有组分的分离(见图2)。研究发现在流动相中加入甲酸铵后其促进目标化合物离子化的效果较加入乙酸铵好，响应值增加明显，故在水相和有机相中均加入2.5mmol/L甲酸铵。２.３　 线性范围、检出限和定量限　 将混合标准溶液用复溶液逐级稀释，得到一系列标准工作液，各取20μL，分别加入10μL内标工作液和80μL 4% BSA溶液，其余操作同样本前处理。由于人血中存在内源性脂溶性维生素，故在标曲制作中加入4% BSA。以各目标化合物的色谱峰与其相对应的同位素内标色谱峰的峰面积比值-浓度比值作图，得到各目标化合物的标准系列工作溶液的直线拟合方程，并计算相应的线性相关系数。6种脂溶性维生素的标准曲线和线性范围见表2。结果表明，6种脂溶性维生素在对应的浓度范围内线性关系良好，相关系数0.995，标准溶液色谱图如图3所示。每个浓度重复检测6次，满足相对标准偏差20%且信噪比S/N≥3的最低浓度值定为检测限，满足相对标准偏差20%且信噪比S/N≥10的最低浓度值定为定量限。6种脂溶性维生素检测限为0.20～1.25ng/mL，定量限为0.39～3.88ng/mL(见表2)。２.４　 方法精密度　将低、中、高三个浓度标准品溶液加入4% BSA混合血清样本经本法处理后进行检测，每个浓度重复6次，连续检测三天，计算日内精密度为0.9%～9.6%，日间精密度为3.0%～9.3%(见表3)。该方法同时测定6种脂溶性维生素的日内精密度和日间精密度均在15%以内，方法精密度满足检测需求。２.５　 方法准确度　 将低、中、高浓度的标准品溶液加入混合血清样本中按本法进行前处理后进行检测，每个浓度重复6次，计算加标回收率，3个水平的加标回收率为86.6%～107.7%，相对标准偏差(RSD)为1.46%～9.39%(见表4)。该方法加标回收率均在80%～120%以内，方法准确度高满足检测需求。２.６　 方法验证　 采用建立的UPLC-MS/MS方法对美国国家标准技术研究所(NIST)制定的标准参照品SRM 968f进行检测，每个水平重复2次取平均值，验证方法准确度。结果表明，除25-OH-VD2含量较低未能检出外，其它检测结果与靶值偏差均在5%以内，该方法检测结果准确可靠(表5)。２.７　 实际样品测定　 使用本方法对17份健康儿童血液样本进行检测，其中视黄醇含量为0.22～0.43μg/mL，25-OH-VD2含量为未检出～5.19ng/mL，25-OH-VD3含量为6.83～49.21ng/mL，α-生育酚含量为5.63～12.73μg/mL，β-生育酚含量为0.03～1.37μg/mL，γ-生育酚含量为0.11～1.68μg/mL。本法适用于微量临床血液样本6种脂溶性维生素的同时快速检测。３结　 论本研究建立了超高效液相色谱串联质谱法同时测定微量血清样本中多种脂溶性维生素的方法，并对前处理过程中的蛋白沉淀试剂、萃取液用量，复溶液等进行了优化，以减少色谱图中噪音干扰，改善色谱峰形，提高检测灵敏度。并比较了不同色谱柱对多种脂溶性维生素尤其是不同类型维生素E的分离效果，最终选择Phenomenex Kinetex F5色谱柱，该色谱柱可以实现β-生育酚和γ-生育酚的有效分离。本研究中只需20μL血清就能够快速完成6种脂溶性维生素的测定。该方法测定样本需求量少、操作简单、检测结果准确快速可实现大量临床样本的同时检测，尤其对采血较为困难的婴幼儿可以实现少量血液样本检测多数项目的需求。参考文献（略）本文引用来源： 李雪梅,吴慧慧,陈竞,赵盼,唐玉菲.超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素[J].现代预防医学,2022,49(07):1297-1302.