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PH6.5,0.05mol/L磷酸盐缓冲液;PH2.5,0.05mol/L甘氨酸盐酸配制
目前我们在开发对羟基苯甘氨酸羟邓盐有关物质分析方法遇到了些困难,采用Waters,Xbidge BEH Shiled RP18,250*4.6mm,5um的色谱柱,流动相为乙腈与磷酸盐缓冲液混合,且pH调节至6.80。主峰几乎没有保留,峰尾部不能落回原点基线水平,基线后部分漂移较大。该物质好像容易水解。各位老师能否给些建议。
最近做氨基酸检测,用OPA-MPA衍生后,液相色谱荧光检测,c18的柱子其他氨基酸都分得挺好,就是组氨酸和甘氨酸完全分不开,就看到一篇中文文献里也是这个情况。我估摸着是哪个细小环节没处理好,有经验的大虾指点下缓冲盐试过磷酸盐和乙酸盐的,各自都加了四氢呋喃,乙腈,以及3乙胺等试过,走梯度,都是一样的,2个分不开。附图,大家看看,红圈的地方就是甘氨酸和组氨酸的出峰时间http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106251547_301445_1642776_3.jpg谢谢