二丁氨基酮酸

氨基酸是构建生物机体的众多生物活性大分子之一，是构建细胞、修复组织的基础材料。它被人体用于制造抗体蛋白、血红蛋白、酶和激素以维持和调节新陈代谢，是一切生命之源。 由于氨基酸的重要性，合适可靠的检测方案将成为评估食品、饲料、药物及生理样品中氨基酸指标的重要选择。 HPLC—柱后衍生法，50多年来作为氨基酸领域的重要检测手段，因为其高效的测试准确性和重现性，深受广大用户的信赖。氨基酸检测在药物、食品、饲料中的主要应用有 ● 通过分析氨基酸组鉴定多肤和蛋白质；● 原料药和中间体中的杂质和有关物质的测定；● 药物中单个或总氨基酸的定量， 包括复杂基质中标记物的测定；● 重组蛋白生产过程的控制；● 确定氨基酸组成也是保证食品和饲料营养价值的必要条件；● 用于产品质量及过程监测。 衍生方法介绍Pickering Laboratories根据上述应用的检测对象的不同，将衍生方法分为OPA衍生法和茚三酮衍生法，两种方法都可以与任何氨基酸阳离子交换柱和洗脱液组合使用。其中我们称为Trione ® 的*茚三酮试剂，也广泛应用于氨基酸分析仪中。 OPA法与茚三酮法区别见下表：氨基酸衍生法 _Trione® 试剂（*）分析法OPA试剂分析法衍生试剂TlOO－预混试剂 ；自生产日期起计算， 4个月保质期（950 ml/瓶） TlOOC －预混试剂；自生产日期起计算， 4个月保质期（950 mL/瓶） T200 - 2部分试剂，混合后使用，从生产之日起12个月保质期；4组／箱(900mL／瓶）OD104－氨基酸分析用OPA稀释液； O120-OPA试剂（5g／瓶） 3700-2000 －疏基化合物。（10g／瓶） 这三种产品都是用于氨基酸OPA分析法适用样品一级和二级氨基酸一级氨基酸 在与OPA反应之前需要检测二级氨基酸氧化步骤。使用氧化步骤时，一级氨基酸的检测灵敏度会有所降低。检测器UV/VISFLD仪器灵敏度10 pmole （在色谱柱上）2 pmole （在色谱柱上）色谱柱&洗脱液适用于任何阳离子交换柱氨基酸分析法与任何用于氨基酸分析的阳离子交换柱配合使用配置单泵Ony×PCXI vector PCX+ 0.5 m L反应器单泵Ony×PCX/ vector PCX+ 0.15 ml反应器。 ＊需要带有0.5 mL和0.1 mL反应器的双泵OnyxPCX来检测二级氨基酸。 在此模式下， 初级氨基酸的灵敏度会降低。 色谱柱的选择图1：钠柱氨基酸分析选择 图2：锂柱氨基酸分析选择 图3：氨基酸标品 图4：豆粕样品 图5：水解单克隆样品 Pickering产品 完整解决方案欧洲药典8.0对于氨基酸的柱后衍生茚三酮法做了详细的要求，药典对于包括化学、 动物、 人或草药来源的活性物质、赋形剂和制剂，顺势疗法制剂，抗生素，制剂和容器等都有所要求。 Pickering Laboratories 将欧洲药典作为测试依据，为客户提供完整的氨基酸分析解决方案。 Pickering 柱后衍生仪 解决方案包括Onyx PCX/Vector PCX 柱后衍生仪器、分析柱、保护柱、缓冲液和Trione ® 茚三酮试剂。并且对方法进行了优化， 在符合药典各项体系适宜性要求的同时，提高了分析的灵敏度及分析效率。 Pickering全套试剂包 图6：依据欧洲药典8.0法测试氨基酸 关于Pickering Laboratories 美国Pickering Laboratories公司是全球仅有的专业提供人工测试体液和柱后衍生化学试剂、色谱柱、分析方法等柱后衍生分析整体解决方案的机构，其不断创新及良好的信誉被众多的美国政府机构如EPA、ATF、FDA、AOAC和世界知名的厂商所认可。

仪器信息网讯 近日，国家药典委员会发布氨基酸分析指导原则公示稿，这是该指导原则的第二次公示，公示为期1个月。复方氨基酸制剂、多肽类药物、蛋白质类药物、含氨基酸/多肽/蛋白质的组织提取物类药物和中药等药品中氨基酸的组成或含量的检测，需通过氨基酸分析方法来实现。现行版欧洲药典、英国药典、美国药典及日本药典中均收载了氨基酸分析指导原则，但中国药典通则中尚未收载。2020年版中国药典收载了5种复方氨基酸注射液、9种多肽类药物及1种中药品种，均需要采用氨基酸分析方法测定药品中氨基酸含量或氨基酸组成，由于氨基酸分析方法种类较多，各品种的质量标准中仅要求按适宜的氨基酸分析方法测定，为了指导药典标准执行过程中如何选择适宜的方法，国家药典委员会委托中检院牵头承担完成了“药品中氨基酸分析法的建立课题”，拟定了中国药典氨基酸分析指导原则。此前，按照国家药典会标准提高课题任务要求，根据对企业和药检机构常用氨基酸分析方法的调研结果，参照国外药典收载的氨基酸分析方法，确定了国内常用的较为成熟的6种药品中氨基酸分析方法及其起草复核单位，分贝问并开展了药检机构的协作研究。氨基酸分析方法起草复核单位方法起草单位复核单位PITC柱前衍生的RP-HPLC法中检院浙江院、天津所、湖北院、辽宁院、河南所AQC柱前衍生的RP-HPLC法江苏院浙江院、湖北院天津所、广东所OPA&FMOC柱前衍生的RP-HPLC法上海所北京所、广州所、中检院DNFB柱前衍生的RP-HPLC法天津所河南所、湖北院、辽宁院氨基酸分析仪法茚三酮柱后衍生法——钠系统河南所浙江所、山东院中检院茚三酮柱后衍生法——锂系统上海所 此前，完成的中国药典“氨基酸分析指导原则（草案）”曾于2020年9月在国家药典委员会网站首次公示，面向社会各界公开征求意见。而针对首次公开征集意见收到的反馈，在本次公示中均给予了反馈，同时根据反馈意见和建议，国家药典委员会组织召开了相关专业委员会进行研讨，按照反馈意见和专委会审核意见，在公示稿的基础上增补了部分内容，并进行了部分文字修改与规范。主要修改的部分为：在前言部分增加了游离氨基酸测定的主要方法；在基本要求部分增加了内标物使用目的的描述，对方法验证的要求细化说明，删去水解管的清洗与要求；在蛋白质和多肽样品的水解部分增加了使用水解管的要求；对氨基酸测定法引言、各测定法及数据处理等部分内容进行了文字修改、调序、精简与规范。更多关于氨基酸分析指导原则草案公示稿（第二次）的详细内容，请点击附件查看。公告原文如下：我委拟制定氨基酸分析指导原则，为确保标准的科学性、合理性和适用性，现将拟制定的氨基酸分析指导原则第二次公示征求社会各界意见（详见附件）。公示期自发布之日起1个月。请认真研核，若有异议，请及时来函提交反馈意见，并附相关说明、实验数据和联系方式。相关单位来函需加盖公章，个人来函需本人签名，同时将电子版发送至指定邮箱。联系人：徐昕怡、尚悦电话：010-67079522、67079578电子邮箱：xuxinyi@chp.org.cn通信地址：北京市东城区法华南里11号楼 国家药典委员会办公室邮编：100061国家药典委员会2022年03月09日氨基酸分析指导原则起草说明氨基酸分析指导原则草案公示稿（第二次）

以前用于药品、近年又大量用于食品的氨基酸产品，由于没有食品添加剂国标而得不到食品级“证书”，不得不以饲料级低价出口，而国内企业再用翻倍的价格把它从国外买回来作为食品添加剂使用 　　“我们现在按饲料级出口到国外，国外再作为食品添加剂出口到中国。” 　　“他们经常连内包装都不换，但价格翻了一番还多。” 　　说起因国内法律标准滞后使企业产品面临的这一尴尬，宁波海硕生物科技有限公司副总经理郭广东传达给人的感觉，有点儿近乎黑色幽默。 　　但事实上，郭广东可没心思玩儿什么幽默。1月22日下午，国家质检总局就食品添加剂生产监管召开立法听证会。由于目前我国食品添加剂品种多但标准少，一些企业担心的是，那些没有国家安全标准的产品，政府监管部门很难发给生产许可证。而对于郭广东的企业及其所在的氨基酸行业来说，这个问题已不仅仅停留在“担心”的层面，是实实在在的已经和正在流失的“真金白银”。 　　“这不仅造成国家的损失，也成为制约行业发展的一个瓶颈。”郭广东说。 　　宁波海硕是国内氨基酸行业中较大的企业，系列产品之一L-半胱氨酸无论质还是量均居全国第一。其所受的上述困扰，在该行业中颇为典型。听证会后，郭广东在接受本报记者采访时透露，他们想以自己企业的实力，推动相关国家标准的制定。 　　出口150亿进口就要花300多亿 　　据郭广东介绍，人类本身靠食物不能获得氨基酸，必须靠补充。由于生活水平的提高，尤其欧美等发达国家，不再等到人有病了再去输补氨基酸，而是着手从日常的食品中补充。普通人希望依照摄入量补充氨基酸以增强抵抗力 发育中的青少年用氨基酸强化食品来促进发育。这使以前少量用于药品的氨基酸，近年被广泛添加到面包、可乐、咖啡、巧克力、高档拉面等食品中，用量日益增长。 　　但国内由于相关法律标准的滞后，在这里造成了尴尬的管理后果： 　　记者被告知，在欧美日等国家，氨基酸都有相应的产品标准，允许作为食品添加剂往食品里添加。而在我国，目前氨基酸十几个系列产品中，只有食品上的使用标准，但没有食品上的国家标准(一种产品除外)。换句话说，作为食品添加剂，它没有产品国家标准，但食品生产企业使用这个东西有标准。 　　按照我国相关法律的规定，没有食品国家标准，就不能获得食品添加剂生产许可证，产品不能作为食品添加剂来使用，只能按工业品去卖，用于药品、化妆品等。 　　令人啼笑皆非的是，这些产品出口到美国后，美国再以食品添加剂卖回到中国，被国内广泛用于食品中。而这“一出一进”之间，它的价格就整整翻了一番还多。 　　“这个行业十几家的产品出口到美国约150亿元人民币，但再进口回来就要花上300多个亿。因为他们是有食品添加剂证的，允许加到食品中去。他们有国家食品添加剂标准，我们进口，也认同它的标准。我们进来后，每天都在吃、每天都在使用。”郭广东说。 　　具体到宁波海硕的L-半胱氨酸，是以饲料级出口到美国，每公斤只能卖到100多元人民币。但如果卖给食品生产企业，每公斤可卖到500元。 　　郭广东还说，他们和美国企业已有多年合作，双方都比较清楚，“我们卖给他，他再卖给咱们中国。有时连内包装都不变，只是卖的时候变一下外包装”。 　　咱们自己的东西让别人翻番地去赚，卖给咱们的企业。而我们自己却不能以食品添加剂卖给自己的企业。这就好比同一个菜，分别上在东来顺饭店和一般的小饭馆，卖的价钱差别很大。就因为没有那个证。这岂不是“傻大头”? 　　郭广东如此解释做这一“傻大头”的原因：是咱们国家法律的滞后，严重的滞后! 　　据国家质检总局相关负责人日前介绍，我国目前被批准使用的食品添加剂约有2700种，但实际上有标准的不到500种。 　　标准缺失也不可避免地带来监管上的尴尬。按照我国法律规定，食品企业采购添加剂，必须从有食品添加剂生产许可证的企业购买。但采访中有业内人士向记者透露，明知某一产品食品中都在用，但就是没“证”，买卖之间“明修栈道，暗渡陈仓”的事情就难免。有企业把无证产品买去，打着别的企业比如进口企业的旗号，或者进口100公斤，实际上使用的远不止这个数量，剩下的从国内无证企业购买。“就像在做一种躲猫猫的游戏。”这位业界人士形容说。 　　制定国标已有基础 　　作为国内该行业比较大的企业，宁波海硕想通过自己的力量帮助国家标准制定出来。这也是借鉴别人的经验。以前某鸡精企业要做鸡精标准，就参与并做成了国家标准。郭广东表示，他们可以出时间、人力甚至财力，可以帮助请专家评估、论证、召集会议等等。 　　据介绍，事实上，我国国家药典上有相关标准，在药品上该类产品已做了几十年的生产和使用。有标准，就必然经过了安全和风险评估。在郭广东看来，“药品上都可以使用，食品上更应该没问题”。 　　在浙江省质量技术监督局备案的宁波海硕的企业标准，正是参照国家药典标准制定的。“这是关系到生命的事情，不是闹着玩儿的。看到药典上在用，才比较有把握。我们的检测指标都是按照药典上的标准来的。”他说。 　　郭广东表示，应该说目前我国制定国家标准已经有了基础。可以参照国家药典标准、美国标准、欧洲标准、日本味之素标准等，而且检验方法标准也有。“这都是国际上比较认可的标准，而且都经过了十几年以上的使用。” 　　但眼下此事还不得不面对另一种无奈。郭广东告诉记者，由于食品安全法的实施，这块工作以前归质量技术监督部门，现在归卫生部门。从该法实施之前到现在，相关手续的办理似乎都处于真空当中。没人办，好像也不知道怎么办。郭广东来开这个听证会之前还去找过宁波市质量技术监督局，“他们主管领导也很迷茫，说：‘我们也不知道怎么管，没有国家标准，我们也不能给你发证，不能准许你生产’。” 　　此前曾有另外相关协会负责人向记者反映过类似意见。称有已经快要出台或正在制定中的标准由于部门交接被搁浅。原因是卫生部门没有这些标准的立项，而原来的部门不好再插手。记者曾试图进一步就此问题作些了解，但没有得到确切答案。 　　郭广东告诉记者，随着该类产品在食品中用量的不断加大，这个问题越来越急迫。宁波海硕自2004年建厂以来，产值每年翻一番。2008年产值达1.2亿元，2009年受金融危机影响的情况下还达1亿元，被评为宁波“最具发展潜力的企业”。 　　但就在他们欲“更上层楼”的时候，却不得不受困于相关国家标准的缺失。应了当年作家张洁的那句话：“不是高山挡路，是鞋子夹脚!”