香草醇

中国白酒风味独特、历史悠久，是我国居民日常生活的重要组成部分。根据生产原料和工艺的不同，中国白酒按香型可分为浓香型、酱香型、清香型和米香型等12 种代表香型。浓香型白酒以绵甜柔和、谐调爽净、余味悠长的特点，深受广大消费者喜爱，且在白酒市场占有率最高。蒸馏萃取（SDE）是一种将水蒸气蒸馏与溶剂萃取相结合，将挥发性成分的提取与溶剂萃取相结合，通过少量溶剂提取大量样品的浓缩方法，具有操作简便且重复性好的优点，是一种分析粮食蒸煮香气有效的前处理方法。北京工商大学，酿酒分子工程中国轻工业重点实验室，北京市食品风味化学重点实验室的廖鹏飞、孙金沅*等采取SDE对蒸酒所用的5 种单粮和混粮中的香气成分进行提取，并结合气相色谱-质谱（GC-MS）对其进行分析；另外，结合香气提取稀释分析（AEDA）和香气活性值（OAV）对混合粮食蒸煮香气中关键香气化合物进行分析，从而确定影响粮香的关键化合物。01 5 种单粮挥发性化合物定性结果如图1所示，高粱蒸煮香气中检测到的挥发性化合物种类数量最多，有108 种；除了酯类和萜烯类外，鉴定到的其余类别的化合物数量均是5 种单粮中最多的。由于高粱是古井贡白酒酿酒原料中比例最高的粮食，可能将更多的粮食香气带入白酒中，丰富白酒粮香。GC-MS结果表明，高粱蒸煮香气中，己酸乙酯、正己醇、己醛等化合物的相对峰面积较大，证明这些化合物相对含量较大。玉米中共检测出93 种挥发性化合物；其中，萜烯类化合物种类显著高于其他单粮，有9 种，芳樟醇是其中相对含量最高的化合物。糯米和大米中检测出的挥发性化合物最少，均为66 种，二者种类相似，重合率为83.3%，且鉴定出的挥发性化合物在其他单粮中均可检出。高粱中检测到其他粮食中没有的挥发性化合物种类最多，有27 种，而玉米和小麦中分别有18 种和12 种。02 混合粮食原料挥发性化合物定性结果由图2可知，在不同极性色谱柱下均检出较多的烷烃类、醛类、酮类和酯类化合物；醇类化合物和芳香类化合物在极性柱条件下检出效果优于非极性柱，分别检出11 种和15 种；酸类化合物在极性柱条件下检出效果更好，检出7 种。烷烃类化合物和醛类化合物在检出数量和相对峰面积两个方面均明显高于其他类别化合物，是组成混合粮食蒸煮香气中最重要的两类化合物。03混合粮食原料中香气活性成分的筛选由表1可知，成功定性的29 种香气化合物中，通过极性柱鉴定出26 种，FD因子≥9的香气化合物有16 种，分别是乳酸乙酯（81，奶油香）、苄硫醇（81，大蒜味）、(E,E)-2,4-癸二烯醛（81，青草香、脂肪味）、4-乙基愈创木酚（81，烟熏、坚果香）、己酸乙酯（27，水果香）、辛酸乙酯（27，果香）、(E)-2-壬烯醛（27，青草、脂肪味）、(E,Z)-2,6-壬二烯醛（27，黄瓜香、脂肪味）、香叶基丙酮（27，叶子、花香）、十八醛（27，奶油香）、(E)-2-辛烯醛（9，青草香、脂肪味）、正庚醇（9，青草香）、(E)-2-癸烯醛（9，腊味、脂肪味）、(E,E)-2,4-壬二烯醛（9，脂肪味、青草香）、正己酸（9，脂肪味）、棕榈酸甲酯（9，油脂味、蜡味），同时除己酸乙酯、十八醛和(E)-2-癸烯醛外均有较高的嗅闻强度。通过非极性柱鉴定出11 种香气化合物，FD因子≥9的香气化合物有7 种，分别为苄硫醇（81，大蒜味）、(E)-2-壬烯醛（81，青草香、脂肪味）、正己醇（27，树脂、植物味）、苯乙醛（27，花香）、4-乙基愈创木酚（9，烟熏、坚果香）、辛醛（9，青椒味）、香草醛（9，蜡质味），除4-乙基愈创木酚外均具有较高的嗅闻强度。未能定性的3 个香气区间的感官描述词分别为绿茶、山楂和土豆。04 混合粮食原料中香气化合物的确定 如表2所示，本实验所得到的标准曲线R2均不低于0.99，表明该曲线具有良好的线性关系；LOD均低于0.909 mg/L，表示仪器灵敏度满足实验的需要；回收率均在80%～120%之间，表明所用定量方法可行。采用上述标准曲线对混合粮食以及5 种单粮中重要的香气化合物进行定量，并根据文献中化合物香气阈值，计算不同原料蒸煮样品中化合物的OAV，如表3所示。不同香气化合物的OAV在不同粮食样品中存在一定差异。混合粮食蒸煮香气中，苄硫醇、(E,E)-2,4-壬二烯醛和(E)-2-壬烯醛等17 种化合物的OAV≥1，被认为是混合粮食蒸煮香气中的关键香气化合物，如图3所示。 05 结论结果表明，5 种单粮中共鉴定出153 种化合物；高粱、小麦、玉米、糯米、大米中分别鉴定出108、93、93、66、66 种化合物，其中鉴定出较多数量的醛类、醇类、酮类、芳香类、酯类等化合物。采用双柱定性，在混合粮食样品中共鉴定出140 种化合物。采用气相色谱-嗅闻-质谱联用法在混合粮食样品中共鉴定出29 种香气活性化合物，结合香气提取稀释分析和香气活性值评价不同化合物对粮食蒸煮整体风味的影响。经计算，苄硫醇、(E,E)-2,4-癸二烯醛、(E)-2-壬烯醛、壬醛、己醛、辛醛、(E)-2-辛烯醛、(E,Z)-2,6-壬二烯醛、正庚醇、(E)-2-癸烯醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、苯乙醛、4-乙基愈创木酚、己酸乙酯、香叶基丙酮、辛酸乙酯、香草醛17 种化合物的香气活性值不低于1，被认为是对粮香有贡献的重要风味化合物，其中苄硫醇和(E,Z)-2,6-壬二烯醛首次在蒸煮粮食香气中被鉴定。原文链接：https://www.spkx.net.cn/CN/10.7506/spkx1002-6630-20220609-091

7月底，卫生部公布《食品用香料、香精使用原则(征求意见稿)》(下称意见稿)，明确把纯乳、原味发酵乳等20种食品列为禁加食用香料香精范围，其中婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品也拟被“禁香”更是引发业内广泛关注。然而记者近日走访市场发现，多种知名婴儿奶粉均加入“香草味食用料”、“乙基香兰素”等。 　　市场调查 　　多品牌奶粉含“香” 　　意见稿中表示，包括婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品在内的20种食品没有加“香”必要，不得添加食品用香料、香精，法规另有明确规定者除外。 　　在北京一些大型超市，记者发现，雅培金装幼儿喜康力3段配方中，明确标明含有香草味食用料，但并未说明其含量。与此同时雀巢、惠氏、多美滋等品牌的3段奶粉中都含有香兰素或乙基香兰素，但在这3个品牌中，1、2段奶粉中并未发现含有。 　　销售人员向记者表示，一般在1、2段奶粉中不会添加香料，3、4段以后大多数奶粉都会添加香料，这是为了让口感好一些，但剂量较少，都在国家允许范围之内。 　　企业回应 　　有规可循并无问题 　　多家奶粉生产商昨天接受记者采访时表示，除了0至6个月婴幼儿配方食品不得添加任何食用香料，婴儿奶粉中加入香精和香料有规可循，并无问题。 　　雅培给记者发来的声明称：卫生部发布的意见稿，在9月6日前，都是反馈意见征集阶段，《食品用香料、香精使用原则》正式公布时，将收录于《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中，但该规定正式公布和实施时间尚未确定。 　　雅培还出示了另一证据，即卫生部2008年出台的“21号公告”，公告中标明：“凡适用范围涵盖0至6个月婴幼儿配方食品不得添加任何食用香料。较大婴儿和幼儿配方食品中可以使用香兰素、乙基香兰素和香荚兰豆浸膏，最大使用量分别为5mg/100ml、5mg/100ml和按照生产需要适量使用。”雅培表示，其所有产品均遵照该规定的要求，并经国家权威部门检验合格。而这一点，恰恰符合此次卫生部征求意见稿中的“法规另有明确规定者除外”这一规定。 　　■专家说法 　　“禁香令”不应存灰色地带 　　乳业资深人士王丁棉表示，“禁香令”征求意见稿中称包括婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品不得添加食品用香料、香精，但是又附带一句“法规另有明确规定者除外”，这存在灰色地带。 　　他将向卫生部上书建议对此清晰列明，哪些香精和香料是法规允许使用的，应该在“禁香令”的终稿中一一列出，否则也会让消费者困惑。

张景然，岳中花，乔艳芬（博纳艾杰尔应用部） 1. 前言 香兰素亦称香草素、香草醛等，学名为3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，根据欧盟专家委员会2000年2月24日报道，大剂量可导致头痛，恶心，呕吐，呼吸困难，甚至损伤肝肾功能。 样品组分 结构式 香兰素 中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用标准》（GB2760-2011）规定，较大婴儿和幼儿配方食品中香兰素最大使用量为5mg/100mL，其中100mL以即食食品计，生产企业应按照冲调比例折算成配方食品中的使用量；婴幼儿谷类辅助食品中可以使用香兰素，最大使用量为7mg/100g，其中100g以即食食品计；凡使用范围涵盖0至6个月婴幼儿配方食品不得添加任何食用香料。 国家标准中只规定了限值，未有检测方法。本实验使用天津博纳艾杰尔科技有限公司的Cleanert® PAX固相萃取小柱和Venusil® XBP C18（L）液相色谱柱，建立了一种奶粉中香兰素的检测方法，经实验验证，该方法简单、快速、准确度高。 2. 实验方法 2.1实验试剂和耗材 l 水 (pH=4.5)；取100mL水，用乙酸调节pH至4.5； l 2%乙酸铅溶液：称取乙酸铅2g，加水稀释并定容至100mL； l 5%氨水溶液：取氨水溶液5mL，加水稀释并定容至100mL； l 5%酸化甲醇：取甲酸5mL，加甲醇95mL混匀； l 香兰素储备液 (1mg/mL)：准确称取香兰素标准品10mg，加水稀释并定容至10mL； l SPE柱：Cleanert® PAX (60mg/3mL)，使用前分别用3mL甲醇和3mL水活化； l HPLC柱：Venusil® XBP C18 (L) (5&mu m 150Å 4.6*150mm)； l 针式过滤器：亲水型 PTFE (0.45&mu m，13mm)。 2.2 仪器及设备 l LC-10F高效液相色谱系统； l Qdaura® 卓睿全自动固相萃取仪； l 高速离心机 (转子50mL*6)； l 氮吹仪； l 12位固相萃取装置。 2.3试样处理 准确称取奶粉试样1g（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入pH=4.5的水溶液5mL，混匀超声提取5min，加2%乙酸铅溶液2mL，混匀后静置2min，8000r/min离心10min；取上清液用5%氨水溶液调节pH至中性；将上清液全部加样至活化好的Cleanert® PAX小柱，然后分别用3mL 5%氨水溶液和3mL甲醇淋洗小柱，弃去淋洗液；用3mL 5%酸化甲醇洗脱（以上固相萃取操作通过Qdaura® 卓睿全自动固相萃取仪完成），收集洗脱液于30℃下氮气吹干，用1mL流动相重新溶解，过滤，待测。 2.4液相色谱条件 色谱柱：Venusil® XBP-C18（L），5um 150Å 4.6*150mm； 流动相：A（0.02mol/L的磷酸二氢钾溶液，磷酸调节pH=4.0）：B（乙腈）= 90：10； 流 速：1.0mL/min；进样量：20&mu L；波 长：276nm；柱温：30℃。 3. 实验结果 3.1线性关系和检出限 量取一定量香兰素标准储备液，分别用水稀释至1&mu g/mL、5&mu g/mL、10&mu g/mL、25&mu g/mL和50&mu g/mL，按照3.3检测条件依次进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合标准曲线方程，结果见表1： 表1 香兰素标准曲线和检出限标准曲线方程 相关系数 检出限（S/N3） Y=86.443X+36.907 0.9998 1&mu g/g 3.2准确度 表2. 5&mu g/g添加回收实验结果 平行1 平行2 平行3 平均回收率 RSD 回收率 89.03% 94.30% 90.67% 91.33% 2.70% 表3. 25&mu g/g添加回收实验结果 平行1 平行2 平行3 平均回收率 RSD 回收率 85.08% 87.85% 83.59% 85.51% 2.16% 4. 实验结论 实验表明，Cleanert® PAX和Venusil® XBP C18（L）可以用于奶粉中香兰素的检测，本方法简单、快速、准确度高。 5. 实验图谱 图1 奶粉空白谱图 图2. 5&mu g/g添加谱图 图3. 1&mu g/g标准溶液谱图 6. 订货信息 名称 规格 订货号 分析型高效液相色谱仪 10ml/min，等度系统，200-400nm双波长检测器 FL-LC010 分析型色谱柱温箱 室温+5-50℃，箱内两对夹套 CC-100-T Qdaura® 卓睿全自动固相萃取系统4通道 SPE-40 甲醇 色谱纯，4*4L/箱 AH230-4 乙腈 色谱纯，4*4L/箱 AH015-4 Cleanert® PAX SPE柱 60mg/3ml，50支/盒 AX0603 Venusil® XBP C18（L）HPLC柱 5&mu m 150Å 4.6*150mm VX952505-L 保护柱芯 4.6*10mm，4/包VX950105-L 保护柱套 适用于4.6*10mm的保护柱芯 CH-100 亲水PTFE针式过滤器 0.45&mu m，13mm，100/包 AS081345 一次性注射器 2ml无针头，100支/包 LZSQ-2ML 溶剂过滤器 1L AM3100 1.5mL样品瓶 短螺纹透明带书写处，100/PK 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 100/PK 0915-1819 12样品瓶螺纹透明，100/PK 1509-1657 12mL样品瓶盖 100/PK 1515-1748 微孔滤膜（MCM） 50mm，0.45&mu m，100片/包 AM015045 微孔滤膜（Nylon） 50mm，0.45&mu m，100片/包 AM025045 离心机 最大转速10000r/min TGL-10B 氮吹仪 15位 NV15-G 真空固相萃取缸 12位 VM12 流速调节阀 12个/包 A81213 穿板导流针 12个/包 A80100 无油隔膜真空泵 1台 A01003