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2.1水飞蓟宾标准液制备将准确称量的USP水飞蓟宾标准对照品溶解在甲醇中,超声震荡20分钟,用甲醇稀释,获得溶液的浓度在0.7mg/ml。2.2样品液制备将准确称量的大约40mg的水飞蓟提取物放入100ml的容量瓶中,加入70ml甲醇,超声震荡20分钟,冷却至20℃.并用甲醇稀释到刻度位置。用0.45μm孔径的滤膜过滤。 2.3色谱条件:同原料检测中3.4.2.4测定方法分别将大约10μL等量的水飞蓟素标准溶液、水飞蓟宾标准溶液和试液注射入色谱中,记录下谱图。将宾A和宾B的峰面积的和比上水飞蓟宾标准溶液中水飞蓟宾标准品的浓度,得到一个校正回归系数。按下面公式分别计算出水飞蓟素中以水飞蓟宾表示的相应物质含量: 10,000 (C/W)其中 C 代表浓度,以mg/ml表示,作为一个从标准曲线图中替换出来的内差值,它代表试液中相应的成分;W 代表质量,以mg表示,是取样部分的质量。计算水飞蓟宾含量,以百分比表示,把各个部分所得结果相加即得。以上是标准,但是有几点疑问:10000代表什么意思,内差值代表什么?对于实际检测怎么计算?
[size=15px][font=宋体][color=black]水飞蓟宾([/color][/font][font=&][color=black]silybin[/color][/font][font=宋体][color=black])是一种是一种从水飞蓟科植物水飞蓟的果实和种子中分离得到的类黄酮木脂素,它具有保护肝脏、抗氧化、抗肿瘤和维持肝细胞膜稳定等广泛的药理活性,据报道是治疗肝脏疾病,包括非酒精性脂肪性肝病([/color][/font][font=&][color=black]non-alcoholic fatty liver disease[/color][/font][font=宋体][color=black],[/color][/font][font=&][color=black]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=black])的最有效的黄酮类化合物[i][/i],而水飞蓟宾的作用机制仍有待进一步明确。[/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]口服水飞蓟宾通过直接结合并抑制组蛋白去乙酰化酶[i][/i][/color][/font][font=&][color=black]2[/color][/font][font=宋体][color=black]([/color][/font][font=&][color=black]HDAC2[/color][/font][font=宋体][color=black])活性,增强[/color][/font][font=&][color=black]FXR[/color][/font][font=宋体][color=black]启动子区组蛋白乙酰化,促进回肠中[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]的表达,[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]进入循环发挥抗[/color][/font][font=&][color=black]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=black]作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [img=,690,504]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409101438482204_1516_6561489_3.png!w690x504.jpg[/img] [size=15px][b][font=&][color=#4472c4]1[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]、水飞蓟宾通过非肝脏途径缓解小鼠[/color][/font][font=&][color=#4472c4]HFD[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]诱发的[/color][/font][font=&][color=#4472c4]NAFLD[/color][/font][font=&][color=#4472c4][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]作者建立小鼠[/color][/font][font=&][color=black]HFD[/color][/font][font=宋体][color=black]诱发的[/color][/font][font=&][color=black]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=black]模型,探讨水飞蓟宾的治疗作用,发现灌胃水飞蓟宾治疗对[/color][/font][font=&][color=black]HFD[/color][/font][font=宋体][color=black]诱发的小鼠肝脏脂质堆积和损伤具有明确的恢复作用。随后采用[/color][/font][font=&][color=black][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS[/color][/font][font=宋体][color=black]法测定了水飞蓟宾灌胃后的血清药物浓度和组织分布,发现其在肝脏和血清中的暴露量非常低,但在回肠中的暴露量相对较高。肝脏中分布的水飞蓟宾不足以减少肝细胞中的脂质蓄积,因此作者推测口服水飞蓟宾是通过肠道途径而不是吸收发挥抗[/color][/font][font=&][color=black]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=black]作用[/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#4472c4]2[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]、水飞蓟宾促进[/color][/font][font=&][color=#4472c4]HFD[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]诱发的[/color][/font][font=&][color=#4472c4]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]小鼠回肠和结肠中[/color][/font][font=&][color=#4472c4]Fgf-15/19[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]表达[/color][/font][font=&][color=#4472c4][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]大量数据已证实,一些细胞因子从肠道分泌,包括[/color][/font][font=&][color=black] FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]GLP-1 [/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black] HGF[/color][/font][font=宋体][color=black],具有预防[/color][/font][font=&][color=black] NAFLD [/color][/font][font=宋体][color=black]的潜力,这促使作者探索水飞蓟宾是否能够诱导这些细胞因子的表达。结果显示水飞蓟宾治疗显著上调[/color][/font][font=&][color=black]HFD[/color][/font][font=宋体][color=black]诱发的[/color][/font][font=&][color=black]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=black]小鼠回肠和结肠中[/color][/font][font=&][color=black]Fgf-15[/color][/font][font=宋体][color=black]表达[/color][/font][font=宋体][color=black],上调大鼠肠上皮细胞及人结肠上皮细胞[/color][/font][font=&][color=black]FGF-19[/color][/font][font=宋体][color=black]表达[/color][/font][font=宋体][color=black]。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#4472c4]3[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]、特异性敲低肠道[/color][/font][font=&][color=#4472c4] FGF-15 [/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]表达可逆转水飞蓟宾在小鼠体内的抗[/color][/font][font=&][color=#4472c4] NAFLD [/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]作用[/color][/font][font=&][color=#4472c4][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了更好地了解[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19 [/color][/font][font=宋体][color=black]在水飞蓟宾治疗[/color][/font][font=&][color=black] NAFLD [/color][/font][font=宋体][color=black]中的作用和重要性,作者特异性地敲低小鼠肠道中[/color][/font][font=&][color=black]Fgf-15[/color][/font][font=宋体][color=black]的表达。结果显示敲低肠道中[/color][/font][font=&][color=black]Fgf-15[/color][/font][font=宋体][color=black]表达后,水飞蓟宾在小鼠体内的抗[/color][/font][font=&][color=black] NAFLD [/color][/font][font=宋体][color=black]作用消失,这些发现表明肠道来源的[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]在水飞蓟宾的抗[/color][/font][font=&][color=black]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=black]中起着至关重要的作用[/color][/font][font=宋体][color=black]。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center][img=图片,1,]data:image/svg+xml,%3C%3Fxml version='1.0' encoding='UTF-8'%3F%3E%3Csvg width='1px' height='1px' viewBox='0 0 1 1' version='1.1' xmlns='http://www.w3.org/2000/svg' xmlns:xlink='http://www.w3.org/1999/xlink'%3E%3Ctitle%3E%3C/title%3E%3Cg stroke='none' stroke-width='1' fill='none' fill-rule='evenodd' fill-opacity='0'%3E%3Cg transform='translate(-249.000000, -126.000000)' fill='%23FFFFFF'%3E%3Crect x='249' y='126' width='1' height='1'%3E%3C/rect%3E%3C/g%3E%3C/g%3E%3C/svg%3E[/img][/align][align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#4472c4]4[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]、水飞蓟宾上调[/color][/font][font=&][color=#4472c4]NAFLD[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]小鼠回肠和结肠中[/color][/font][font=&][color=#4472c4]Fxr[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]([/color][/font][font=&][color=#4472c4]Fgf-15/19 [/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]转录因子)表达[/color][/font][font=&][color=#4472c4][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]转录因子[/color][/font][font=&][color=black]FXR[/color][/font][font=宋体][color=black]可能参与[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]的表达,作者研究了水飞蓟宾促进回肠和结肠中[/color][/font][font=&][color=black]Fgf-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]表达的作用机制。结果发现水飞蓟宾治疗可增加回肠和结肠中[/color][/font][font=&][color=black] Fxr[/color][/font][font=宋体][color=black]的表达,但不会增加十二指肠、空肠、肝脏和肾脏中的表达。在[/color][/font][font=&][color=black] IEC-6 [/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black] NCM460 [/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中,水飞蓟宾也显示出促进[/color][/font][font=&][color=black] FXR[/color][/font][font=宋体][color=black]表达[/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#4472c4]5[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]、[/color][/font][font=&][color=#4472c4]FXR[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]在水飞蓟宾介导的[/color][/font][font=&][color=#4472c4]FGF15/19 [/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]表达和抗[/color][/font][font=&][color=#4472c4] NAFLD [/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]作用中起重要作用[/color][/font][font=&][color=#4472c4][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了进一步研究[/color][/font][font=&][color=black]FXR[/color][/font][font=宋体][color=black]在水飞蓟宾诱导肠上皮细胞[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]表达中的作用和重要性,作者用[/color][/font][font=&][color=black]siRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]沉默[/color][/font][font=&][color=black]FXR[/color][/font][font=宋体][color=black]基因,结果显示敲低[/color][/font][font=&][color=black]FXR[/color][/font][font=宋体][color=black]后,水飞蓟宾促进[/color][/font][font=&][color=black]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=black]表达作用几乎消失[/color][/font][font=宋体][color=black],降低了水飞蓟宾对与[/color][/font][font=&][color=black] NAFLD [/color][/font][font=宋体][color=black]相关的参数的改善作用[/color][/font][font=宋体][color=black]。 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#4472c4]6[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]、水飞蓟宾降低[/color][/font][font=&][color=#4472c4]HDAC2[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]活性促进小肠上皮细胞[/color][/font][font=&][color=#4472c4]FXR[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]和[/color][/font][font=&][color=#4472c4]FGF-15/19[/color][/font][font=宋体][color=#4472c4]的表达[/color][/font][font=&][color=#4472c4][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]有报道称水飞蓟宾可以通过抑制组蛋白去乙酰化酶([/color][/font][font=&][color=black]HDAC[/color][/font][font=宋体][color=black])的活性,促进基因启动子区组蛋白乙酰化,从而上调基因表达。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]作者研究水飞蓟宾上调肠上皮细胞[/color][/font][font=&][color=black] FXR [/color][/font][font=宋体][color=black]表达的机制,通过[/color][/font][font=&][color=black]ChIP[/color][/font][font=宋体][color=black]发现水飞蓟宾和[/color][/font][font=&][color=black]TSA[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black](泛抑制剂,可抑制[/color][/font][font=&][color=black]HDAC[/color][/font][font=宋体][color=black])上调了[/color][/font][font=&][color=black]IEC-6 [/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中[/color][/font][font=&][color=black]FXR [/color][/font][font=宋体][color=black]启动子的组蛋白[/color][/font][font=&][color=black] H3K27 [/color][/font][font=宋体][color=black]乙酰化水平。接着研究发现水飞蓟宾处理显著抑制了[/color][/font][font=&][color=black] IEC-6 [/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中[/color][/font][font=&][color=black] HDAC [/color][/font][font=宋体][color=black]的活性而不不影响[/color][/font][font=&][color=black] HDAC1-3 [/color][/font][font=宋体][color=black]的蛋白质表达。这些数据表明,水飞蓟宾上调[/color][/font][font=&][color=black] FXR [/color][/font][font=宋体][color=black]启动子区组蛋白乙酰化,并通过抑制[/color][/font][font=&][color=black] HDAC [/color][/font][font=宋体][color=black]的活性而不是蛋白质表达来促进[/color][/font][font=&][color=black] FXR [/color][/font][font=宋体][color=black]的转录。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了确定水飞蓟宾影响的主要[/color][/font][font=&][color=black]HDAC[/color][/font][font=宋体][color=black]亚型([/color][/font][font=&][color=black]HDAC1/2/3[/color][/font][font=宋体][color=black]),作者观察了这三种抑制剂对[/color][/font][font=&][color=black] IEC-6[/color][/font][font=宋体][color=
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