凝结溶杆菌

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  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包**头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~**5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~4.5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

  • 粪大肠菌群MFC培养基不凝结

    1.今天做粪大肠菌群滤膜法,所用培养基是直接购买的配好培养基,按照它上面的操作方法,称量,加热煮沸、分装、灭菌后拿出来就冷却就不凝结啊。一直是溶液状态?这是为什么???

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凝结溶杆菌相关的资讯

  • “嗜血”的质谱——关于流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的鉴定问题
    p   卫生部临检中心组织的2018年第一次临床微生物室间质评已经结束,但关于流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的鉴定问题,在微信朋友圈里谈得正热烈 (见文《溶血 or 流感?傻傻分不清?》)[1]。主要是因为在这次质评中,生化鉴定仪和有些品牌的质谱仪的鉴定结果出错了。令小布自豪的是,布鲁克MALDI Biotyper质谱的鉴定结果与标准答案完全相符!所以小布在这里来一段点评。 /p p   流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌虽然同属,但属于两个不同的种,致病性和临床意义也大不相同,前者是上呼吸道感染的常见致病菌,而后者是上呼吸道的正常定植菌。小布认为要认真、仔细地把它们区分开,千万不要混淆! /p p   可是这两种菌的亲缘关系很近,用传统的形态学和生化方法难以区分。虽然产荚膜的流感嗜血杆菌可以通过荚膜肿胀实验区别于溶血嗜血杆菌,但有些流感嗜血杆菌是不产荚膜的,通常被认为是无法分型的。同样,虽然有的溶血嗜血杆菌能够通过卫星试验观察到溶血环,但不是所有的溶血嗜血杆菌都能观察到明显的溶血环。 /p p   难道就没有好办法了吗?当然不是! /p p    span style=" color: rgb(31, 73, 125) " strong 质谱是区分流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的好方法 /strong /span /p p   早在2013年中国CDC的研究人员就通过质谱图的聚类分析,发现质谱可以把流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌清楚地分成两类,甚至可以把不同地区来源的菌株进一步细分(见图1)[2]。 /p p style=" text-align: center" strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/dfbc448c-6829-4363-bbc8-eb80e5161d6e.jpg" title=" 1.jpg" width=" 450" height=" 409" border=" 0" hspace=" 0" vspace=" 0" style=" width: 450px height: 409px " / /strong /p p strong   ▲图1. 流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的聚类分析树状图(MALDI Biotyper结果) /strong /p p   2014年荷兰公共卫生区域实验室、荷兰医学中心与布鲁克微生物研发中心共同发表了MALDI Biotyper能够正确鉴定流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的文章 [2],专家们通过分析不同来源的277个菌株,发现质谱法与测序法鉴定流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的结果几乎完全一致(见表1)。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/5e7cf664-5cee-4464-b1b3-ac63e6d76a51.jpg" title=" 2.jpg" / /p p    strong ▼表1.流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌的MALDI Biotyper质谱法与测序法鉴定结果比较 /strong /p p   另外,布鲁克公司在美国FDA注册进行临床试验的结果显示:通过对74个流感嗜血杆菌和31个溶血嗜血杆菌的检测MALDI Biotyper质谱法鉴定100%正确!(结果摘自布鲁克公司提交美国FDA的报告) /p p   可见,质谱是区分流感嗜血杆菌和溶血嗜血杆菌可以信赖的方法!有些老师不免心生疑问:既然布鲁克质谱的鉴定结果都是正确的,那为什么其它品牌的质谱鉴定错了呢? /p p    strong span style=" color: rgb(31, 73, 125) " 质谱法的数据库和鉴定结果的算法非常重要 /span /strong /p p   原来呀,质谱鉴定微生物时,需要通过软件拿采集到的样品“蛋白指纹图”到数据库里进行逐个比对,因此,数据库建立与比对时所采用的理念与算法,以及数据库的容量,是影响鉴定结果非常重要的因素。 /p p   布鲁克MALDI Biotyper的建库理念是以菌株为单位,数据库中每个条目都是一个独立的菌株。它的比对算法是采用指纹识别中的“模式识别”算法,就是把样品的“蛋白指纹图”与数据库中所有菌株的“蛋白指纹图”快速自动地进行逐个图逐个峰的比较,看看每对比对的“蛋白指纹图”之间有哪些峰是匹配的,哪些峰是不匹配的,以及匹配的谱峰之间相对强度的相关性,从而得到一个综合的匹配分数,并根据分数值告诉我们鉴定的可信程度。 /p p   MALDI Biotyper的算法看上去通俗、简单,正可谓“大道至简”吧,不仅非常实用!而且最大程度上避免了误判!就像警察通过指纹比对来识别罪犯一样,只要数据库里有罪犯的指纹,它就能正确地识别出罪犯 即使数据库里没有罪犯的指纹,它也不会找错,只是告诉我们当前数据库里没有匹配的指纹,只要扩大搜索数据库的范围,定会让罪犯无以循形,不会造成冤假错案! /p p   有些老师可能会问:我们是做菌种鉴定,MALDI Biotyper的数据库为什么不以菌种为单位,而是以菌株为单位建立的呢?难道它能鉴定到菌株吗? /p p   大家知道,微生物种类繁多,每种微生物又包含丰富多样的不同菌株,而同一菌种内不同菌株之间的差异是天然存在的,并和微生物的种类有关,有的种内差异大,有的种内差异小。所以,布鲁克决定在菌株水平上建库,并在选择每个菌种的建库菌株时,尽可能包含差异大的菌株,而剔除差异小的菌株。MALDI Biotyper在菌株水平建库,具有以下优势: /p p    span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 给代表性菌株预留了充分的覆盖范围 /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) "   避免了数据库不必要的冗余 /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) "   容易实现数据库的扩充和更新 /span /p p span style=" color: rgb(255, 0, 0) "   能快速适应分类学的改变 /span /p p   充分发挥了质谱技术分辨能力远远高于传统方法(如生 span style=" color: rgb(255, 0, 0) " /span 化方法)的特点,不丢失种水平之内菌株之间的差异。 /p p   正是由于上述优势,美国CDC、加拿大国家微生物实验室和美国NIH等多家机构也在采用布鲁克的仪器和理念建立数据库并对外开放。 /p p   通过以上对布鲁克MALDI Biotyper质谱的数据库与软件算法的简单介绍,相信各位老师就能理解为什么这次卫生部的质评中,布鲁克质谱的鉴定结果是正确的,也就很好理解为什么美国FDA批准Bruker MALDI Biotyper CA系统作为首个鉴定新型致病菌耳念珠菌(C. auris) 的新方法了[4-6]。 /p p   参考文献 /p p   1. 溶血 or 流感?傻傻分不清? /p p   2. B. Q. Zhu, D Xiao et al. MALDI-TOF MS Distinctly Differentiates Nontypable Haemophilus influenzae from Haemophilus haemolyticus.PLoS One. 2013 8(2): e56139 /p p   3. J. P. Bruin, M. Kostrzewa et al. Identification of Haemophilus influenzae and Haemophilus haemolyticus by matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2014, 33:279–284 /p p   4. https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm605336.htm /p p   5. FDA首次批准质谱方法鉴定新型致病菌耳念珠菌 (Candida auris) /p p   6. “布”下天罗地网,防止“耳念”侵袭 /p
  • 仪器如何进行可凝结颗粒物检测?
    可凝结颗粒物检测 可凝结颗粒物(condensable particulate matter)是指大气中存在的细小颗粒物,其特点是在特定条件下可以通过凝结形成更大的颗粒。这些颗粒物通常由气态物质在大气中冷却或通过化学反应形成可凝结颗粒物可以包括水蒸气、硫酸盐、硝酸盐、有机物等,其粒径范围从几纳米到几微米不等。这些颗粒物对大气质量和人类健康都具有重要影响。 在大气中,可凝结颗粒物的形成通常与气溶胶颗粒物(aerosol particulate matter)相关。气溶胶颗粒物是指悬浮在大气中的微小颗粒,包括可凝结和非可凝结颗粒物。当气溶胶颗粒中的气态物质达到饱和度,并且遇到适宜的条件(例如温度下降),这些气态物质就会凝结成固态或液态的颗粒物。 可凝结颗粒物对大气化学、云和气候形成过程具有重要影响。它们可以充当云凝结核,促进云的形成和增长。同时,可凝结颗粒物还对大气能见度、气候变化和空气污染等产生影响。为了评估和监测可凝结颗粒物的影响,科学家们进行大气采样和分析,以了解其组成、来源和潜在影响。这有助于制定相应的环境政策和控制措施,以减少可凝结颗粒物对环境和人类健康的不利影响。 可凝结颗粒物采样系统需要配合等动力采样控制台使用,CPM采样系统通常位于可过滤采样系统的后端,比如总尘采样系统、颗粒物分级系统等。CPM收集在干燥的撞击器中,在样品收集后立即用氮气(N2)吹扫撞击器内容物,以便从撞击器中除去溶解的二氧化硫(SO2)气体。干燥有机部分和水性部分并称重残余物, 水性和有机部分的总量即为CPM。如果您希望详细了解该设备,可通过仪器信息网联系我们,我们将为您提供全面的设备信息及解决方案。
  • 撞击器与气溶胶质谱联用解决雾凝结核的难题
    记者从中科院广州地球化学所获悉,该所有机地球化学国家重点实验室毕新慧研究团队在雾滴凝结核研究方面取得新进展。相关研究日前发表在《地球物理研究》。  据悉,该研究团队在国际上率先使用地用逆流虚拟撞击器—单颗粒气溶胶质谱仪的联用,实现了对单个活性雾滴颗粒的在线分析,解决了在地面无法直接观测雾凝结核的难题。研究分析了广州市春季典型雾过程中的1305个雾滴残余颗粒,首次发现黑碳颗粒可以作为活性雾滴的重要凝结核,在雾滴残余颗粒数中的占比高达68%。而以往研究认为黑碳颗粒的吸湿性较弱,对于云雾形成的贡献十分有限。  该研究认为,在城市大气中当黑碳颗粒快速老化与二次气溶胶组分形成内混结构后,其吸湿性有可能大幅增强,使得黑碳颗粒能够成为雾滴的重要凝结核。同时,雾滴的形成加快了黑碳颗粒与硝酸盐的内混,这主要是因为城市大气中汽车尾气排放的大量氮氧化合物等前体物,其浓度远高于硫酸盐的前体物二氧化硫。  研究结果还表明硫酸盐的形成是黑碳颗粒的主要老化机制。发现有机物和铵根在雾滴残余颗粒中的比重极低,对于雾滴形成的贡献并不显著。雾过程对有机胺形成的促进作用主要是体现在雾间隙颗粒上,而并非活性雾滴中。云和雾的形成过程相类似,因此,该研究对于认识气溶胶成云机制以及模型预测其间接气候效应具有重要的参考价值。

凝结溶杆菌相关的仪器

  • 操作规程1、滑动杆应能上下自由滑动 , 将仪器调正调平。当滑 动杆上的试锥上端与锥模上端边沿接触时, 指针是否能在刻度标尺的零位上, 如不在零位应 加以调整,并检查试锥与底端的锥模是否同心。2、 将拌合均匀的净浆一次装入锥模内, 用刀插捣, 震动 5-6 次, 刮击多余净浆抹平后, 迅速放到试锥下面固定位置上,将试锥尖调到净浆表面上,拧紧螺丝,然后突然放松,让试 锥自由沉入净浆中,记录下试锥下沉数值,然后通过换算的水泥稠度。3、测定初、终凝时间时,将净将装入圆模内,震动数次刮平。试件在湿气养护箱中养护 至加水后 30min 时,进行一次测试。使试针与净浆面接触,拧紧螺丝后突然放松,试针垂 直自由沉入净浆,观察试针停止下沉时指针读数。当试针沉至距底板 3-5mm 时,即为水泥达到初凝状态;当下沉不超过 0.5mm 时为水泥达到终凝状态。使用与维护测定标准稠度用水量前,应先检查仪器滑动部分在支架中能否自由滑动,同时检查试杆降至净浆表面时,指针应对准标尺零点,否则应予调整。测定凝结时间前,应卸下稠度试杆,换以试针,同时检查试针与圆模顶接触时指针是否对零,否则应予调整。每次测定前,首先应将仪器垂直放稳,不宜在有明显振动的环境中操作。每次测定完毕均应将仪器工作表面擦拭干净并涂油防锈。滑动杆表面不应碰伤或存在锈斑。
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  • 德国进口微生物快速检测仪RVLM:大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪主要特点:1) 可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;2) 样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入检测瓶即可;3) 可自动控制孵育温度和孵育时间4) 检测样本只需1ml/1g;同一温度下可同时检测8个样品;5) 灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;6) 独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)7) 简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;8) 大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪器便携式,可随时随地进行检测、100%定量分析,并可直接连接电脑出定量分析检测报告。大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪检测范围:活细菌总数大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157, O111, O104...等肠道杆菌科铜绿假单胞菌;绿脓杆菌沙门氏菌李斯特菌肠球菌酵母菌大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪应用范围:卫生控制:-食品(HACCP)-厨房、工具、表面(HACCP)-水质-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫-药品及 化妆品大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪与我们的生活息息相关,例如:咖啡馆、餐厅水源检测、制水厂分析实验室和HACCP诊断农产品及相关加工公司药厂、药房、化妆品厂环境监测机构水配送公司消费者保护团体、工商管理机构室内空调调节公司集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析)-免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻)检验样本无需任何前处理-液态样本,固态样本和表面样本均无需前处理定性和定量分析-搭配检测机:100%的定量分析-肉眼判读:定性或半定量分析简单便捷-简单的三个步骤得到检测结果检验迅速-是传统检验方法速度的2~5倍高灵敏性-可以检测到1目标微生物(理论极值)高特异性-特异性高达99.999%(理论极值)检测瓶就是实验室-微生物检测瓶随时可用-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测使用后安全丢弃-和过期药物同样处理微生物检测瓶尤其能应用于军事、大型展会等等的食品快速检测RVL微生物快速检测瓶微生物快速检测仪RVLM :-简单、便捷,100%定量分析-在同一温度下可容纳8个样品。-可自动控制孵育温度和孵育时间-独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)使用后无菌处理-按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方-放心安全丢弃(与过期药物同样处理)大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪若没有RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后,放入恒温器孵育(在适当温度下孵育适当时间,请查上表)-肉眼判读定性或半定量分析结果以大肠菌群为例:若菌落数>108CFU/ml:2小时内颜色即变成黄色;若菌落数<102CFU/ml:14小时内颜色不会变成黄色;若菌落不存在:18小时后颜色仍保持开始颜色或其他中间色(不变成黄色)简单三个步骤得到100%定量检测结果:第一步:放入样本-打开瓶盖,加入11ml无菌水-放入液态(固态/表面)样本0.1~1.0ml(0.1~1.0g)-盖紧瓶盖第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合(充分溶解或混合如右图所示)-若使用振荡器,需时20秒左右;或用手用力摇,需时2~3分钟左右。第三步:在适当时间判读结果(请查左表)-使用RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后立即放入检测仪-得到100%定量分析结果
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  • 主要特点:可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入检测瓶即可;可自动控制孵育温度和孵育时间检测样本只需1ml/1g;8个检测位各自独立可检测不同的样品;灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;仪器便携式,可随时随地进行检测、100%定量分析,并可直接连接电脑出定量分析检测报告。通过ISO 16140:2003 “食品和动物饲料的微生物学 – 代替法的认证”。 RVLM微生物检测仪 检测范围:活细菌总数大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157, O111, O104...等肠道杆菌科金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌;绿脓杆菌 沙门氏菌李斯特菌肠球菌曲霉属真菌;曲霉菌属酵母菌乳酸杆菌 应用范围:卫生控制:-食品(HACCP)-厨房、工具、表面(HACCP)-水质-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫-药品及 化妆品 与我们的生活息息相关,例如:咖啡馆、餐厅 水源检测、制水厂分析实验室和HACCP诊断农产品及相关加工公司药厂、药房、化妆品厂环境监测机构水配送公司消费者保护团体、工商管理机构室内空调调节公司 微生物检测瓶尤其能应用于军事、大型展会等等的食品快速检测 集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析) -免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻) 检验样本无需任何前处理-液态样本,固态样本和表面样本均无需前处理定性和定量分析-搭配检测机:100%的定量分析-肉眼判读:定性或半定量分析简单便捷-简单的三个步骤得到检测结果检验迅速-是传统检验方法速度的2~5倍 高灵敏性-可以检测到1目标微生物(理论极值)高特异性-特异性高达99.999%(理论极值)检测瓶就是实验室-微生物检测瓶随时可用-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测使用后安全丢弃-和过期药物同样处理 检测步骤:(简单三个步骤得到100%定量检测结果) 第一步:放入样本 -打开瓶盖,加入11ml无菌水-放入液态(固态/表面)样本0.1~1.0ml(0.1~1.0g)-盖紧瓶盖 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合(充分溶解或混合如右图所示) -若使用振荡器,需时20秒左右;或用手用力摇,需时2~3分钟左右。 第三步:在适当时间判读结果(请查右表) -使用RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后立即放入检测仪-得到100%定量分析结果 *若没有RVLM微生物检测仪: -待充分溶解混合后,放入恒温器孵育 (在适当温度下孵育适当时间,请查下表)-肉眼判读定性或半定量分析结果以大肠菌群为例:若菌落数>108CFU/ml:2小时内颜色即变成黄色;若菌落数<102CFU/ml:14小时内颜色不会变成黄色;若菌落不存在:18小时后颜色仍保持开始颜色或其他中间色(不变成黄色) 使用后无菌处理 -按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方-放心安全丢弃(与过期药物同样处理) 微生物快速诊断 RVL@产品 Q&A1. 微生物检测瓶除可以检测活菌外,死菌可以检测么?答:不能检测死菌。2. 微生物检测瓶可以检测厌氧菌么?答:检测瓶的检测范围即包括厌氧菌(亚硫酸盐梭状芽胞杆菌 Sulphite reducing Clostridia,产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens),也包括需氧菌。 检测不同种微类生物的检测瓶中试剂不同。对于厌氧菌,我们有特殊的试剂,如检测产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens。3. 检测瓶的检测原理都分别用到了哪些检测方法?答:培养皿法、酶法、免疫法、基因法。4. 对于第 3 题,你能简要叙述这些方法的优劣势么?答:与传统的培养基法、胶体金、酶免法和 PCR 法不同,德国皇家微生物检测仪是多种方法的集合。单独使用一种检测方法都有自己的缺点:比如, PCR 法需要专业技术人员和昂贵设备; 培养基法操作复杂; 胶体金法灵敏度低; 酶免法特异性捕捉不充分。 德国皇家微生物检测瓶快速检测系列产品是以上多种方法的综合运用,吸收了每种方法的优点,弥补了各种方法的不足。5. 用微生物检测瓶进行微生物检测时,第一步是先放样本还是无菌水?答:都可以。6. 对样本进行微生物接种时,需要在无菌环境下进行么?答:检测瓶是通过捕捉特异性,结合多种检测法进行分析。无菌环境与否均可(临检的场所大都是非无菌环境)。7. 检测瓶可以检测表面样本和固态样本么?答:可以检测固态、液态、表面样本(用所配棉棒沾湿无菌水后涂抹表面)。纸浆等膏状、糊状、粘稠状昂本都可以检测。8. 检测瓶在检测固态样本时需要对进行研磨、稀释等前处理过程么?答:直接将样本放入检测瓶,无需任何前处理。 9. 每次检测的无菌水用量是多少?答:一般是 11ml。如果是检测液态样本或水样本,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。 10. 放入样本和无菌水后,“摇匀使其充分溶解和混合”这一操作步骤,无论定性分析还是定量分析,都是必要的步骤么?答:是的,摇匀无论是定性还是定量分析都是必要步骤。11. 不同的微生物对应的孵育温度是一样的么?请举例说明。答:不一样。37 摄氏度居多:活菌总数、沙门氏菌、李斯特菌等,大肠杆菌 44 摄氏度等,详细请参考对照表。12. 若是检测冷菜或者冰欺凌这样的样本,孵育是否应该低温进行?答:对检测样本自身的温度没有限制,检测样本中微生物,请严格遵照所检测微生物对应的孵育温度,依然根据对照表。13. 如果想加快检测时间,孵育温度可以调至高于所检测微生物对应的孵育温度?答:不可以,严格遵照对照表。14. 操作手册规定放入的样本量为多少?答:0.1g‐1.0g 或 0.1ml‐1.0ml。15. 若放入的样本量高于规定的样本量,检测结果会不同,或者检测结果(定量时)增加么?答:样本量多一些或少一些,定量分析结果不会有变化。 原因:传统的微生物学检测方法,包括官方参考方法,即基于固体选择性培养基的菌落计数法内在的统计分散度(统计名词,也称为统计变异,是变量或概率分布蔓延,常见的例子是方差,标准差和四分位距。)大于 50%。很多实验室已经证实皇家生物检测法与其他检测方法比统计分散度低,可信度高。但不管怎样,25‐30%的统计分散度还是有的。另外,由采样产生的统计分散度同样应该考虑在内,尤其是微生物经常容易繁殖的固态的肉制品类。 因此,加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的(和其他任何方法获得的结果相等)。16. 对于面粉这类低密度的散装样本,可以照常检测么?答:可以。 17. 对于酱油这样的深色样本,会影响定性检测结果的判读么?您有什么好的建议?答:如果搭配检测仪进行定量分析,不存在这个问题;如果只是通过肉眼观察变色进行定性分析,深色样本如果担心肉眼不能够清晰的辨认,建议进行稀释后再进行检测。还记得第 15 题得答案么?加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的和其他任何方法获得的结果相等)。稀释同样的道理。18. 如果是检测水样,还需要加入无菌水么?加多少?答:建议加水样 1ml,无菌水 10ml。19. 不同的微生物对应的开始颜色和呈阳性的颜色都相同么?请举例说明。答:不同。例如,沙门氏菌孵育 10 分钟左右出现的开始颜色为红色,阳性颜色为黄色;李斯特菌,开始颜色为蓝色,阳性颜色为黄色。具体请参考对照表。20.微生物检测仪兼备孵育机的功能么?答:是的。将检测瓶充分摇匀后立即放入检测仪,在软件上进行检测菌类设置后。检测仪会自动进行孵育,并自动给出定量分析检测报告。21. 微生物检测仪兼备振荡器的功能么?答:不具备。需用手用力摇 2‐3 分钟,或振荡器摇 20 秒左右,直至充分溶解或混合。22. 微生物检测仪的判读原理是什么?答:微生物检测仪是一款精密的光学判读仪。通过光学原理精密探测检测瓶中的颜色变化,并给出精确的定量分析检测报告。23. 微生物检测仪是外接电源,还是自带充电电池?答:外接电源。24. 微生物检测仪可以同时、独立地检测多少个检测瓶?答:8 个。同时、独立的探测,并分别给出定量分析报告。25. 微生物检测仪定量分析,需要在电脑上安装分析软件么?答:需要按照配套分析软件。26. 怎样的计算机操作系统对该分析软件兼容?答:XP, Vista, Windows 727. 如果检测仪是初次开机,接通电源后需要稍等多少时间再进行下一步操作?答:若初次开机,开机后停留 40 秒左右继续操作为宜。28. 检测仪进行定量分析时,充分混合后的检测瓶是应该立即放入检测仪,还是稍等片刻后再放入?答:充分混合后立即放入检测仪。29. 检测瓶放入检测仪后,在检测仪分析软件点击开始,软件界面上对应检测孔的灯会变成什么颜色?答:在所检测检测瓶对应的操作界面上点击“Start”(开始),对应孔的指示灯由绿色变为红色。表明检测开始并进行中。30. 当检测结束后,分析软件界面对应孔的灯光会恢复为什么颜色,说明检测结束,可以放入新样本?答:在检测进行时,指示灯为红色。当检测结束后,指示灯变为绿色。此时在对应的检测仪检测孔放入新的检测瓶开始下一轮检测是可以的。检测时间由细菌的存在量决定(当微生物含量较高时),或由对照表对应的检测时长决定(当微生物含量很低时,应超过对照表中检测 1CFU 对应的检测时间)。31. 微生物检测瓶的分析时间和检测瓶中微生物含量之间是什么关系?答:反比关系。即微生物含量越多,对应的检测时间越短;微生物含量越少,对应的检测时间越长。 如果样本中微生物含量过高,几分钟甚至几秒钟内检测仪的定量分析结果就会显著变动;如果微生物含量很低,(由于 RVLM 是非常精密灵敏的仪器)有经验的使用中可以通过几小时甚至几分钟的数据变化初步判断微生物目标含量是否达到规定要求。32. 分析检测前是否应该有明确的实验目的以确定你要检测的微生物含量(根据国家标准规定微生物的存在量。)?答:这样是最好的。例如,根据国家 GB 标准,或根据国际 EC 标准等,都有明确(或部分明确)地注明微生物在不同家禽、畜牧物种中的允许最大存在量。具体地说,在进行微生物检测时,我们首先要明确检测目的。如、国际 EC 2073:2005标准中规定,大肠杆菌在鲜肉中允许的最大存在量为 CFU 10^2/g,即每克鲜肉中大肠杆菌的含量不允许超过 CFU 10^2。此时我们根据对招表,找到大肠杆菌所在列,查 log CFU 10^2=2,即在大肠杆菌行中找到数字 2 所对应第一列的数字为 14。无论是肉眼进行定性分析,还是检测仪进行定量分析,要检测样本中大肠杆菌含量是否超过 CFU 10^2,最长在 14 小时即可得到严格精准的分析结果。如果是检测瓶进行定量分析,有经验的实验员会在很短时间内(譬如十几分钟)根据定量分析数据的动态变化情况,初步判断出检测瓶中的微生物含量。33. 明确要检测微生物含量的目的是什么,对照表起到什么作用?答:是确定所检测微生物对应的孵育温度、开始颜色、分析时间、阳性颜色的标准对照的依据。具体的使用方法请参考上一题答案。34. 什么是 CFU?答:colony‐forming unit,菌落形成单位。 经培养所得菌簇形成单位的英文缩写。 细菌(可见)和真菌的测量单位。CFU:colony‐forming unit,菌落形成单位,将稀释后的一定量的菌液通过浇注或涂布的方法,让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成一个菌落。与常规利用显微镜对微生物数量进行测量不同,主要是对可见(即多数情况下形成菌落)的细菌数量进行测量的单位。 意思就是每毫升菌液中含有多少单细胞! 传统上就叫“个”。但是,我们知道,一个菌落并不一定是一个细菌所生成,也可能是由一簇细菌(一个细菌团)所生成,这时候再叫“个”就不太准确啦,准确的叫法就是“菌落形成单位”,英文缩写“CFU”。就像“公斤”和“千克”,只是叫法不同,数量上没有变化。 CFU 代表“colony forming units”。CFU/mL 指的是每毫升样品中含有的细菌群落总数,也有用 CFU/g 即对应固体培养基。35. 假如我要检测样本中大肠菌群的菌落含量不得超过 106CFU/g 或 106CFU/ml, 用肉眼观察瓶中颜色变化进行定性分析,请对照“孵育温度和比色对照表”详细叙述检测步骤。答:第一步:放入样本 放入所要检测的样本(0.1‐1.0g,或 0.1‐1.0ml),加入 11ml 无菌水(根据检测物情况,若为液体,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。差别不大),盖紧瓶盖。 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合。 如果用手需有力摇 2‐3 分钟左右;或用振荡器摇,需时 20 秒左右。 第三步:在适当时间判读检测结果 (1)若肉眼定性分析。根据对照表确定大肠菌群对应的孵育温度、开始颜色、检测时间、阳性颜色等信息。 孵育温度:根据对照表为 37℃; 开始颜色:即摇匀后放入 37℃恒温箱孵育 10 分钟左右会呈现的颜色。根据对照表为红色; 检测时间:我们要检测标准为大肠菌群含量不超过 106CFU/g 或 106CFU/ml。根据对照表,对应列log 106=6,找数字 6 对应行的数字为 6,即检测时间为 6 小时。即,观察时间确定为 6 小时。 阳性颜色:根据对照表,大肠菌群的阳性颜色为黄色。 确定了以下信息后,我们把充分混合后的检测瓶放入 37℃恒温箱,这样一直放置。孵育 10 分钟左右,我们观察会发现检测瓶会呈现检测大肠菌群对应的开始颜色——红色。继续放置,到 6 个小时的时候进行观察,如果颜色变为黄色,说明样本中大肠菌群含量超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为不合格品;若没有变为黄色,而是始终保持开始颜色红色,或其他中间颜色,说明样本中大肠菌群含量未超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为合格品。 (2)若检测仪进行定量分析 此步骤请参见下一题。第四步:无菌处理最后别忘记按下检测瓶的瓶盖上方对检测瓶进行灭菌处理。按下瓶盖后摇一摇,好了,可以安全丢弃了。注意:在进行实验操作时,不要碰到检测瓶的瓶盖顶部,以免在不当的时候进行了无菌处理,影响试验结果。36. 若第 34 题搭配检测仪进行精确的定量分析,请详述操作步骤。答:(2)若检测仪进行定量分析 将充分混合后的检测瓶立即放入检测仪。 启动检测仪软件,点击“Station”(状态)录入相关信息(包括:检验员姓名、检测、检测样本所属客户、检测时间等信息);在软件操作界面“analysis type”(检测种类)下拉菜单中勾选所检测的微生物种类,点击 ok,点击开始,指示灯变红,开始进入分析状态。观察检测仪的定量分析数据变化,进行判断。37. 为什么在检测结束之前,不能按下检测瓶的瓶盖?答:无菌处理。瓶盖中还有无菌处理物质,按下瓶盖,瓶盖中的无菌处理物进入瓶内,与瓶内溶剂进行反应,完成无菌处理。因此,实验过程中请不要轻易触碰检测瓶的瓶盖。 技术人员选答题,销售人员必答题:1. 检测瓶可以检测多少种微生物,分别是什么?答:活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、肠道杆菌科、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、肠球菌、亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、曲霉属真菌、曲霉菌、酵母菌。 以后还有陆续有其他微生物菌种的检测瓶相继面世。包括军团菌等。2. 检测瓶在检测大肠杆菌时,可以检测到所有的大肠杆菌菌株么(包括目前流行的 EHEC?)答:是的,可以检测到全部的大肠杆菌菌株,包括 EHEC 肠出血性大肠杆菌(E.coli O104, O111, O157 等)3. 检测瓶的应用范围有哪些?答:卫生控制:食品(HACCP),厨房、工具、表面(HACCP),水质,(CDC)疾病控制、进出口检验检疫、药品及化妆品。 与我们生活息息相关的:环境监测机构,农产品及相关加工公司,水源检测和制水厂,水配送公司,药厂、药房、化妆品厂,分析实验室和 HACCP 诊断,奶制品厂,咖啡馆、餐厅,消费者保护团体、工商管理机构,室内空调调节公司,尤其能应用于军事、大型展会等的食品快速检测。4. 你认为大肠杆菌检测瓶、李斯特菌检测瓶、沙门氏菌检测瓶除了是用于食品安全检测外,适用于医疗么?答:大肠杆菌(EHEC)、李斯特菌、沙门氏菌,这三款检测瓶可用于体外临床检测。 Royal 微生物检测瓶系列的全球定位依然是食品安全。在欧洲,对人体进行微生物的临床体外检测是非常少的,欧洲的各方面安全控制的很好。然而,在发展中国家,以上三款微生物的人体体外临床检测经常发生。而以上三款检测瓶用于体外临床检测的安全性和准确度都可以保证。4 合 1 试纸片和检测瓶市场定位的区别 1)4 合 1 试纸片和检测瓶比较 4 合 1 试纸片配合其分析仪,一台分析仪可以同时检测 48 个试纸片。因此,从经济成本的角度考量,最好一开机就是 48 片同时检查。对于医院,攒够 48个粪便样本后,一次性进行分析。检测瓶,一个样本就可以进行检查。而且更大的优势在于,这款产品会非常受医生的欢迎。因为医生可以不用接触样本,这是目前大多数的医院检测无法做到的。把瓶子给病人,让病人自己将粪便样本放入后送回给医生。医生拿到检测瓶,在医院的振荡器上摇匀后,放入孵育机,等待结果判读即可。2)检测瓶与医院目前传统检测法的比较 ?目前医院的检测方式依然是培养皿法居多。这种方法最令医生反感的地方是医生要接触样本。如果医生处于怀孕期,接触到李斯特菌的后果就是流产。如果检测台没有处理干净,也容易导致微生物的传播。 检测瓶,医生完全不用接触样本。样本放入检测瓶的的这个过程交给病人在卫生间去操作就可以。医生要做的就是简单的摇匀和放入孵育器孵育(振荡器和孵育器都是医院的常规设备)。5. 无论固态、液态还是表面样本,在检测时是否都无需进行前处理?答:是的6. 检测仪的特异性是多少?答:99.999%(理论极限值)7. 检测仪的灵敏度是多少?答:可以检测到 1 个活菌的理论极限值。8. 做定性分析时,检测需要几步,分别是什么?答:三步:加样;摇动瓶子直到充分溶解和混合;在适当时间判读结果(根据对照表)。最后不要忘记按下瓶盖上方进行无菌处理。9. 做定量分析时,检测需要几步,分别是什么?答:同上。具体请参考检测仪操作文档。10. 检测后按下检测瓶瓶盖的目的是什么?答:无菌处理,请参考上第 45 题。11. 检测瓶的储存温度是多少?答:在 20℃-25℃左右既可以储存,这个温度下很方便运输,对于临检来说是有利的。但随着大气温室效应,夏天时还是要注意储存温度不要超过 25℃,负责会影响检测瓶检测的灵敏度。然而,如果可以放到 4℃进行储存,保质期可以延长近一倍。12. 如果预延长检测瓶的有效期,储存温度最好为多少?答:4℃,具体见下表。
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    阪崎肠杆菌的测试片检测方法方法编号:5045 1 适用范围:可用于各类食品和原料中阪崎肠杆菌菌的检测以及突发事件应急需要。2 方法原理:测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品,由阪崎肠杆菌选择性培养基、吸水凝胶和特异性酶显色剂等组成,一步培养15~24小时就可确定出目标菌的存在。3操作方法3.1样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。3.2 接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。3.3 培 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。3.4 结果判别: 对测试片进行观察,呈蓝绿色的菌落为阪崎肠杆菌。对于出现阳性菌落的样品,最好用其他方法作进一步的鉴定。4 附加说明4.1阪崎肠杆菌纯菌株产生典型的蓝绿色点,接种一些肠道菌如大肠杆菌、肠炎沙门氏菌等时,一加样下去就会出现有紫色的点或晕状,此为产品本身显色剂的原因,不影响产品的使用和结果判读;而金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157和副溶血性弧菌等均被抑制。4.2 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。4.3注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。
  • 蜡样芽胞杆菌测试片
    蜡样芽胞杆菌的测试片检测方法方法编号:CDC-5046 1 适用范围:用于各类食品以及人体体检样品中蜡样芽胞杆菌的检测。以及突发事件应急检测需要。2 方法原理:采用一种商品化的一次性培养基产品,含有高选择性培养基、吸水凝胶和特异酶指示剂等重要成分,培养15~24小时就可确认是否有目标菌的存在。3操作方法3.1样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。3.2接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。3.3 培 养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。3.4结果判别: 对测试片进行观察,蜡样芽胞杆菌产生典型的蓝绿色点,而大部分非目标菌如大肠杆菌、大肠杆菌O157、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌和阪崎肠杆菌等均被抑制。4 附加说明4.1 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。 4.2注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。4.3出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的话至少再取样重复检验一次。

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