人肺鳞癌细胞

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  • 【资料】人肝癌细胞系研究进展

    肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是发病率高、治疗困难、死亡率高的恶性肿瘤,全球每年有1000000人死于肝癌。我国肝癌的死亡率在所有恶性肿瘤中居第二位,年死于肝癌的人数占全世界肝癌年死亡总数的53%。虽然肝癌的诊断和治疗有了长足的进步,但生存率在总体水平上变化不是很明显。迄今已建立的一系列人肝癌细胞系(cell line)和人肝癌细胞系的动物模型,为肝癌的发病机理和治疗研究奠定了良好的基础。咱们坛子里是否有做这方面工作的战友,分享一下相关文献。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=122088]人肝癌细胞系研究进展[/url]

  • 【转帖】纳米微粒结合转铁蛋白 猎杀癌细胞

    美国北卡罗莱纳大学教堂山分校文理学院的首席化学教授约瑟夫—德西蒙博士领导的研究小组发现,人体中的一种正常的良性蛋白质,如果和纳米粒子相结合,就能瞄准并杀死癌细胞,而无须负载那些携带化疗药物的粒子。此前,研究人员曾认为,纳米粒子只有携带了有毒的化学载体才能达到这样的效果。转铁蛋白是人体血液中数量第四多的蛋白质,近20年来一直被作为肿瘤靶向载体用以递送治癌药物。纳米粒子通常也是无毒的,需要通过负载标准化疗药物来治疗癌症。然而,结合转铁蛋白的“打印”纳米粒子,不仅能识别它们,还能诱导癌细胞死亡。而不与任何纳米粒子结合的自由转铁蛋白,能从拉莫斯癌细胞中获得养料生长,即使在很高浓度下也不会杀死任何拉莫斯癌细胞。然而令人吃惊的是,转铁蛋白附着在纳米粒子表面后,其能有效地筛选标靶,攻击并杀死B细胞淋巴瘤。在许多迅速生长的癌细胞表面,蛋白质受体被过度表达,于是和转铁蛋白配体结合的治疗就能找到并瞄准它们,而结合转铁蛋白的纳米粒子被认为是安全且无毒的。德西蒙实验室发明了一种“打印”技术,能人为造出尺寸精确且形状符合预期的纳米颗粒。他们采用这种技术制作出一种可与人类转铁蛋白相结合的生物相容性纳米粒子,其能安全且精确地识别广谱癌症,除了B细胞淋巴瘤外,还能有效地指向非小型细胞,如肺、卵巢、肝脏和前列腺的癌细胞。研究人员目前正在进一步研究,携带转铁蛋白的纳米粒子如何及为何对于拉莫斯癌细胞是有毒的,而对其他细胞却无毒。化学治疗和放射治疗曾被认为是癌症的最有效疗法,但这些疗法通常会损害健康组织和器官。这一发现将可能发展出一种全新的策略来治疗某种类型的淋巴瘤,而副作用更小。不过,德西蒙承认,该研究也会引起一些人对不可预期后果的担忧,即一个设计好的针对某类癌症的靶向化疗载体是否会偏离目标。

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  • 文献速递|基于细胞外囊泡的新型纳米材料通过 Let-7a 诱导舌鳞癌细胞凋亡
    近日近日,吉林大学动物科学学院实验动物中心王东旭教授课题组与吉林大学口腔医院口腔颌面外科刘炜炜教授课题组在细胞外囊泡与舌鳞状细胞癌关系研究领域取得了新的进展。相关研究成果已发表在国际知名期刊《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology》(IF:5.89,JCR 2区)。▲图1|国际知名期刊《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology》(IF:5.89,JCR 2区)近年来,针对舌鳞状细胞癌(TSCC)的治疗和诊断已取得了进展,但 5 年生存率仍然很低。治疗TSCC的方法主要为手术、放疗和化疗。在过去几十年中,中医药在癌症研究方面已被广泛应用。例如,从蜂蜜中提取的白杨素可以通过非编码RNA在多种癌细胞中诱导细胞凋亡并抑制增殖。并且,纳米结构也已被广泛研究用于癌症治疗中的药物递送和诊断,例如金纳米粒子 (AuNPs)。细胞外囊泡(EVs)是由细胞释放到细胞外环境中的小囊泡。EVs 由脂质双层膜组成,该膜包裹着小的无细胞器的细胞质,EVs 的摄取特定于细胞类型。但白杨素与金纳米粒子在单独运用时对癌症缺乏特异性,有证据表明,纳米粒子与 EVs结合可作为靶向癌细胞的药物载体。因此,纳米材料与 EVs 结合可以提高癌症治疗的效率。为了探究该方法,王东旭教授与刘炜炜教授团队首先使用白杨素治疗 TSCC 细胞和分离的 EVs-白杨素。然后将四氯金酸(HAuCl4)与 EVs-白杨素一同孵育形成 Au-EVs。在 EVs-Con 和 EVs-chrysin 之间进行转录组测序筛选后,对 let-7a 家族进行了分析。该研究结果表明,Au-EVs 通过TSCC中的 let-7a 诱导细胞凋亡。▲图2 |实验方案示意图文章中,研究 Au-EVs在体内的抗肿瘤作用的实验使用了博鹭腾AniView600多模式动物活体成像系统拍摄观察。在该实验中,首先将SCC9 细胞注射到裸鼠体内。7天后,将Au-EVs注射到肿瘤下方,并在第8天和第15天用近红外光照射裸鼠并进行肿瘤生长分析。结果表明,Au-EVs具备肿瘤靶向性,且荧光强度随时间增加而增加。此外,近红外辐射可以淬灭 Au-EVs 的荧光。在第21天时收集肿瘤,与预期结果相符,Au-EVs 与 NIR 结合显着抑制了肿瘤生长,并且没有改变体内其他器官。这些结果表明,Au-EVs 有效地介导了等离子光热疗法(PPT)并抑制了体内肿瘤的生长。▲图3|注射Au-EVs 后的荧光强度本研究发现,Au-EVs作为一种新型纳米材料,在SCC9 细胞中具有吸收特异性。在经过近红外辐射后,Au-EVs 能够有效增强细胞凋亡。通过RNA-seq,筛选 EVs-chrysin miRNA,Let-7a-3p,并且过表达let-7a-3p会诱导细胞凋亡,此结果表明经NIR 处理的 Au-EV 显著抑制了体内肿瘤的生长。综上所述,本研究结果提供了一种能够提高 AuNPs 靶向性的纳米材料,并且该材料可能与针对 TSCC 的疗法相关。论文链接:doi: 10.3389/fbioe.2021.766380
  • Clinical Cancer Research文章:miRNA的表达与肺鳞癌的
    世界上每年有超过160万例肺癌新发病例,超过137万人死于肺癌。中国每年有52万例肺癌新发病例,超过45万人死于肺癌。80%肺癌是非小细胞肺癌,非小细胞肺癌中40%是鳞癌。ⅠA期肺鳞癌患者的5年存活率约为60%,而Ⅱ-Ⅳ期肺鳞癌患者的5年存活率为5% - 40%。因此,发现新的标志物并应用于早期诊断和预后对于提高肺鳞癌患者的生存率具有重要意义。   中国医学科学院肿瘤研究所赫捷教授与清华大学郭永副研究员合作利用microRNA芯片系统的比较了60对肺鳞癌和癌旁组织microRNA表达谱的差异,发现了一个包含5个microRNA的分类器(hsa-miR-210, hsa-miR-182, hsa-miR-486-5p, hsa-miR-30a and hsa-miR-140-3p)。该分类器区分肺鳞癌和正常肺组织的准确率超过94%。与此同时,他们还发现hsa-miR-31的表达量与病人的存活期负相关。DICER1基因是hsa-miR-31的靶基因。   上述研究的博奥生物晶芯® 哺乳动物miRNA芯片服务与Real time RT-PCR服务在博奥生物有限公司完成。 原文摘要:   A 5-MicroRNA Signature for Lung Squamous Cell Carcinoma Diagnosis and hsa-miR-31 for Prognosis   Purpose: Recent studies have suggested that microRNA biomarkers could be useful for stratifying lung cancer subtypes, but microRNA signatures varied between different populations. Squamous cell carcinoma (SCC) is one major subtype of lung cancer that urgently needs biomarkers to aid patient management. Here, we undertook the first comprehensive investigation on microRNA in Chinese SCC patients. Experimental Design: MicroRNA expression was measured in cancerous and noncancerous tissue pairs strictly collected from Chinese SCC patients (stages I&ndash III), who had not been treated with chemotherapy or radiotherapy prior to surgery. The molecular targets of proposed microRNA were further examined.   Results: We identified a 5-microRNA classifier (hsa-miR-210, hsa-miR-182, hsa-miR-486-5p, hsa-miR-30a, and hsa-miR-140-3p) that could distinguish SCC from normal lung tissues. The classifier had an accuracy of 94.1% in a training cohort (34 patients) and 96.2% in a test cohort (26 patients). We also showed that high expression of hsa-miR-31 was associated with poor survival in these 60 SCC patients by Kaplan&ndash Meier analysis (P = 0.007), by univariate Cox analysis (P = 0.011), and by multivariate Cox analysis (P = 0.011). This association was independently validated in a separate cohort of 88 SCC patients (P = 0.008, 0.011, and 0.003 in Kaplan&ndash Meier analysis, univariate Cox analysis, and multivariate Cox analysis, respectively). We then determined that the tumor suppressor DICER1 is a target of hsa-miR-31. Expression of hsa-miR-31 in a human lung cancer cell line repressed DICER1 activity but not PPP2R2A or LATS2.   Conclusions: Our results identified a new diagnostic microRNA classifier for SCC among Chinese patients and a new prognostic biomarker, hsa-miR-31. 原文出处:http://clincancerres.aacrjournals.org/content/17/21/6802.abstract
  • 气相色谱质谱技术助力:发现识别肺癌细胞关键挥发物
    近日,中国科学院合肥物质科学研究院健康所医用光谱质谱研究团队采取糖酵解控制策略,通过气相色谱质谱非靶向分析,发现用一种挥发性有机物(VOC)可以识别出肺癌细胞。该研究结果日前发表在《科学报告》期刊上。  2022年我国肺癌新发106.06万例,死亡73.33万例,发病率和死亡率均位列全部恶性肿瘤首位。早期肺癌多无明显症状,临床上多数患者出现症状就诊时已属晚期,晚期肺癌患者整体5年生存率在20%左右 若能早诊早治,5年生存率可达90%以上。  呼气测试具有大众易于接受等特点,有望用于肺癌的无创筛查。然而,肺癌的呼气VOC标志物迄今还没有达成共识。因此,开展细胞实验,确立肺癌细胞特征VOC,将为肺癌呼气标志物检测技术的开发提供科学基础和依据。  在前期开展肺癌患者呼气分析研究的基础上,考虑到糖酵解是癌细胞普遍存在的代谢过程,并且利用该代谢特征的正电子发射计算机断层成像已用于肿瘤的临床诊断。为此,研究团队采取抑制糖酵解的方法,检测分析了三种肺癌细胞和正常肺上皮细胞挥发性代谢物的变化特征,发现肺癌细胞释放的羟基丁酮升高了2.6至3.3倍,而正常肺细胞挥发出的该物质几乎没有变化,表明用一种VOC即羟基丁酮就可以识别肺癌细胞。此外,他们还通过阻断谷氨酰胺酵解等实验手段,研究了肺癌细胞代谢物羟基丁酮异常的生化机制。  研究人员介绍,该项工作发展的控制糖酵解产生肺癌细胞特征VOC新方法,将为癌细胞的鉴别提供一种新方案。  相关论文信息:https://doi.org/10.1038/s41598-024-67379-x

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  • timsTOF SCP—— 拓展单细胞研究视野timsTOF SCP 专为无偏深度 4D-定量单细胞蛋白组学、免疫肽组学、表观蛋白质组学和翻译后修饰组学( PTM )设计,和 scRNA-seq 技术形成补充,从而拓展单细胞研究的视野。重新定义单细胞蛋白质组学 —— 发现真正的蛋白质组异质性拓展单细胞研究视野超高灵敏度:开创性的新的离子源几何设计,让离子传输效率提高 5 倍,并带来更高的稳定性。数据更完整:数据非依赖性采集 —— 平行累积连续碎列( dia-PASEF )超越定量重复性的极限,为大规模研究细胞异质性铺平道路。超快采集速度:高采集速度与 dia-PASEF 灵敏度相结合,可采用短色谱梯度进行样本分析,从而减少极低的样本量分析时的色谱稀释效应。更稳定:经过双正交反射后,离子再进入捕集离子淌度谱( TIMS )中,连续分析数千个样本也无需仪器的清洗。重新定义单细胞蛋白质组学先进的离子透镜和 PASEF 技术,可从单个细胞中发现细胞异质性和生物学特性基于质谱的蛋白质组学已成为现代研究理解生物功能和疾病机制的主要工具。健康或疾病组织看起来是同质的,但其蛋白质组是非常不同的。破解每个细胞中的蛋白组的差异( 细胞异质性 )是充分理解其功能的关键。timsTOF SCP 采用了一个全新改进的离子源概念,结合平行积累连续碎裂( PASEF )采集方法的优势,提供了极高的速度和灵敏度,以应对单细胞的蛋白组或后几个细胞的翻译后修饰的分析挑战。开创性的离子传输技术发现真正的蛋白质组异质性timsTOF SCP 采用经过改进的离子源几何设计,包括 1 毫米离子传输毛细管可将离子传输提升五倍,更高压力级的离子漏斗和八级真空系统。更大的离子传输毛细管带来超高灵敏度,额外的正交离子反射和高压离子漏斗,提供独立的、差分真空系统,依然维持了 timsTOF 仪器系列所固有的系统稳定性。蛋白质组学性能的显著提升timsTOF SCP 全新的设计提高了离子在离子源里的传输,更高的真空度维持了仪器的稳定性,这些改进让离子传输提升近 5 倍。当与以 100 nL/min 流速运行的 Evosep One Whisper 方法和 dia-PASEF 方法相结合时,Evosep One 的灵敏度比以前的高流速方法提高了约 100 倍,这使得单细胞水平的无偏蛋白质组学具有非常好的重现性和稳定性,并首次实现每个细胞覆盖约 1,500 种蛋白质。双 TIMS,CCS 支持的分析捕集离子淌度谱( TIMS )首先是前级的气相分离技术,在高性能液相色谱(HPLC)和质谱分离的基础上,离子淌度带来的额外的一个维度分离,降低了样品的复杂离,提高了峰容量和分析的可靠性。同样重要的是,TIMS 还对特定质量和淌度值的离子进行累积和聚焦,从而实现灵敏度和速度的独特提升。通过双 TIMS 技术,前部 TIMS 进行离子累积的同时,后部 TIMS 跟据离子淌度对离子进行释放,这样的设计可以实现近 100% 的离子利用率。这个过程也即为碰撞横截面( CCS )辅助的平行累积连续碎裂( PASEF )分析。支持 CCS 的分析为数据进一步的分析提供了很多的可能性,从更可靠的化合物鉴定到更可靠的数据库比对,以及的更大确定性到自信的库匹配,以及降低大型数据集中的误发现率( false discovery rates,FDRs )。免疫肽组学和其它富集工作流程的理想检测工具除了无偏真单细胞蛋白质组学应用外,timsTOF SCP 还提供了出色的灵敏度,可用于一些需要进行肽段富集的工作流程,比如免疫肽组学研究就需求从血浆或组织中纯化免疫肽开始。由于免疫多肽在这些样本中以相对较低的丰度存在,timsTOF SCP 是理想的免疫肽组学分析,在可用材料有限的情况下进行新生抗原发现,比如生物活检的样本。timsTOF SCP 突破性的灵敏度还可用于在癌症信号通路的研究中的磷酸化蛋白质组学研究。PASEF肽段离子通过捕集离子淌度谱( TIMS ) 分离,洗脱( ~ 100 ms ),并在四极杆飞行时间质谱( QTOF )上进行检测,生成 TIMS MS 热图。在 PASEF 方法中,相同的 TIMS 分离后的离子又通过四极杆对特定离子进行逐一隔离。母离子和碎片离子谱图按离子淌度值进行对齐。平行积累序列碎片( PASEF )技术实现了 120 Hz 的扫描速度, 使用 PASEF 通过多次选择低丰度肽来提高低丰度肽的 MS/MS 谱图质量。PASEF :鸟枪法蛋白质组学的完美选择由 PASEF 驱动的 timsTOF SCP 提供 120 Hz 的扫描速度,而不会牺牲灵敏度或分辨率,这是通过四极杆筛选离子和碰撞池中的离子碎裂与 TIMS 中肽段离子包释放保持同步而实现的。PaSER Run & Done —— 无偏单细胞分析数据的实时质量控制imsTOF SCP 可以以超过 120 Hz 的扫描速度,对数百个微量样本( 200 ng )进行分析。这改变了蛋白质组学的研究方式,但增加的数据量对数据分析提出了新的要求。数据分析已经成为许多工作流程中常见的瓶颈。现代分析方法经常需要在 timsTOF SCP上生成数百个数据,布鲁克已经推出的实时数据库搜索功能 —— 实时并行数据库搜索引擎( PaSER ),从而消除了这一障碍,使用 PaSER, LC-MS 运行一旦完成,结果就即使呈现 —— 也就是 “ Run & Done ”。MaxQuant/Perseus 和 PEAKS Studio 数据处理开放式数据格式允许研究人员直接使用原始数据,并使用自己选择的先进软件。MaxQuant 软件通过保留时间、离子淌度、质量和信号强度来提取 4 维( 4D )特征。这有利于肽、蛋白质和翻译后修饰的鉴定和定量。PEAKS Studio 将 de novo 测序与传统数据库搜索相结合,并对 timsTOF 原始数据的处理进行了优化。超高灵敏度的 dia-PASEF 加持的 4D-蛋白质组学CCS 支持的分析使鉴定更可靠timsControl 允许针对感兴趣的离子进行 dia-PASEF 窗口的自定义,并能调整质量隔离窗口,TIMS 的扫描范围,和循环时间,以使 dia-PASEF 方法适应不同的色谱方法有趣的离子。结合 Evosep One 系统的低流速方法与 timsTOF SCP 高灵敏度的 dia-PASEF 方法,可从 500pg 细胞消化液内鉴定出超过 2,000 个蛋白质,从 250pg 的细胞被鉴定出超过 1,500 个蛋白质。这展示了真正的单细胞蛋白质组学所需的灵敏度。从 250pg 中鉴定出的蛋白质的丰度范围约为 4 个数量级,可以在单细胞水平上进行蛋白质组定量分析。探索肿瘤微环境理解 TME 及其浸润性免疫细胞可被认为是影响疾病进展、治疗反应和患者生存的关键步骤。凭借其高灵敏度,timsTOF SCP 能够在 FFPE 组织样本的激光捕获显微切割( LMD )获得的细胞上获得足够的蛋白质组深度。典型的工作流如图所示。在 timsTOF SCP 仪器上,细胞标记物用于识别肿块中的黑色素瘤癌细胞和那些与基质密切相关的细胞,随后通过 LMD 对这两个群体分割,然后进行无偏 4D-蛋白质组学分析。关键发现:富集分析揭示了中枢和外周黑色素瘤细胞之间的差异调控蛋白,有可能进行疾病分型以指导临床决策。结果由 Matthias Mann 教授提供。
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  • 人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA试剂盒本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组SCCAg-2浓度。主要相关肿瘤:宫颈鳞癌。其它相关肿瘤:肺鳞癌、头颈部鳞癌、食管癌以及外阴部鳞状细胞癌等
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  • Maestro Z/ZHT--细胞增殖、毒性与活性检测仪应用案例:FTH高表达可促进肝癌细胞增殖 肝细胞癌 (HCC) 是最常见的原发性肝癌类型,目前对于HCC晚期患者来说,有效的治疗方法很少。与其他类型癌症(如乳腺癌、非小细胞肺癌和胰腺癌)相似,HCC 细胞富含铁并且容易发生铁死亡——这是近期发现的一种由于铁过载引发脂质过氧化物的异常积累所致的程序性细胞死亡类型。一些证据表明,铁蛋白重链(下文简称为FTH)是一种由 FTH1 基因编码的亚铁氧化酶,起到了调控铁死亡的作用。但FTH在HCC的铁死亡抗性中的机制尚不清楚。 为了探索FTH是如何影响肝癌细胞生长的,来自浙江省人民医院的杜静团队使用 Axion Maestro Z细胞无损实时检测系统对过表达FTH的癌细胞进行活细胞分析,发现其相比对照组,展现出更快的增殖速度。 A, B分别为HCC-LM3, MHCC97H的对照组及FTH过表达组细胞增殖曲线 实时无标记的阻抗数据表明,无论HCC-LM3(人高转移肝癌细胞)还是MHCC97H(人肝癌细胞),在过表达FTH(图3A, B中OE-FTH组)后增殖速度都会变快。这说明在不同的肝癌细胞谱系中FTH的过表达均会促进细胞的增殖。◆ ◆ ◆ ◆实时无标记真阻抗细胞动态检测仪◆ ◆ ◆ ◆PART I 什么是真阻抗细胞检测 阻抗指贴附细胞对检测电流所起的阻碍作用。Maestro Z的真阻抗技术采用不同频率的交流电来检测细胞的阻抗变化。该技术不但可以检测因细胞数量变化导致的阻抗变化,还能实时检测因细胞形态、通透性变化而导致的细微阻抗变化。PART II Maestro Z的特点一体化设计 该仪器无需额外占用培养箱空间。专门设计的样本仓可以屏蔽外界电磁和机械噪音,避免培养箱开关门等额外操作导致检测结果偏差。真阻抗检测技术 该平台延续了Axion BioSystems公司成熟的高信噪比电生理检测技术,采用不同频率交流电,可用来检测细胞细微阻抗变化。友好易用的软件 操作软件提供实时数据记录,自动数据分析,自动数据报告生成。除此之外,还提供自动扣除本底,Nomalization等高阶数据分析,免除繁琐的手工计算。软件还符合FDA 21 CFR Part 11条款,兼容企业在GXP方面合规要求。数据安全性 自带数据储存,无惧电脑宕机,确保重要数据安全。PART III 应用方向简介 样本类型:悬浮细胞,贴壁细胞,3D培养细胞,类器官等 实时记录细胞增殖、凋亡过程,建立专属功能档案细胞毒性动态研究癌细胞浸润、迁移能力,划痕实验癌症免疫疗法,肿瘤免疫学,细胞治疗病毒学研究跨内皮/上皮细胞电阻(TEER)研究G蛋白偶联受体(GPCR),信号通路研究细胞愈合能力测试想要了解更详细特点,快来联系我们吧! Axion BioSystems ImagineExploreDiscover
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  • TU212(人喉癌细胞)的培养步骤及方法!
    TU212(人喉癌细胞)的培养步骤及方法! 一、细胞简介平台编号:bio-106163a规格:1*10 6拉丁属名:TU212(人喉癌细胞)型号:HTX2130细胞名称:TU212人喉癌细胞生长特性:贴壁组织来源:人喉癌细胞培养基:89%1640+10%FBS+1%双抗物种:人规格:2X10^6 cells培养温度:37℃引种来源:BioSample传代:1:2~1:4传代,两天左右换液。冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)。包装:专业的无菌保温运输包装。细胞用途:仅供科研使用。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。 二、细胞特性1)来源:头颈鳞癌2)形态:上皮细胞样,贴壁生长3)含量:1x1064)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 三、细胞接收后的处理方法1)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2)在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。3)观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。4)贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。5)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。 四、细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备: 1)准备IMDM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。2、细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3、按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4、将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。 五、TU212(人喉癌细胞)的注意事项1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 六、TU212(人喉癌细胞)的运输和保存可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。 中国微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 人乳腺癌细胞(通过STR鉴定)
    人乳腺癌细胞(通过STR鉴定) 一、细胞简介平台编号:bio-73188拉丁属名:ZR-75-1细胞名称:人乳腺癌细胞种属:人 年龄(性别):女 组织来源:乳腺癌 生长特性:贴壁 细胞形态:上皮细胞样 背景描述:ZR-75-1细胞产生高水平的黏液素MUC-1 mRNA,低水平的MUC-2 mRNA,但不表达MUC-3基因;ZR-75-1细胞表达雌激素受体。 生长培养基:RPMI-1640(货号:PM150110)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120) 培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃细胞用途:仅供科研使用。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。 二、细胞接受后的处理方法1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。4)如果细胞长满(80%-90%)请及时进行细胞传代。5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 三、ZR-75-1人乳腺癌细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备:1)准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;添加0.01mg/ml胰岛素;双抗,1%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 2、细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 四、细胞的运输和保存可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。 五、ZR-75-1人乳腺癌细胞实验要点及说明:1、本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2、所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 3、盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4、如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5、如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 中国微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 百欧博伟生物 Capan-1 人胰腺癌细胞
    百欧博伟生物 Capan-1 人胰腺癌细胞 一、细胞简介平台编号:bio-106177拉丁属名:Capan-1(人胰腺癌细胞)规格:1ml/T25细胞名称:人胰腺癌细胞种属:人源细胞系/甲状腺、胰腺、垂体、肾上腺、扁桃体、胸腺到货周期:10-15个工作日细胞用途:仅供科研使用。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。 二、细胞介绍该细胞来源于一位40岁白人男性患者的肝转移。细胞表达粘液素,Rh+, HLA A2,,A9,B13,B17。含有刺激素受体和乙二醇激素受体。 三、细胞特性1)来源:胰腺癌,肝转移2)形态:上皮细胞样,贴壁生长3)含量:1x106 个/mL4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 四、细胞接受后的处理:1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 五、本公司的细胞培养操作规程,供参考1、培养基及培养冻存条件准备:1)准备IMDM培养基(IMDM,GIBCO,货号C12440500BT),80%;优质胎牛血清,20%。 。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。2、细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。3、轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。4、移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 六、运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80 度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。收到细胞后请拍照,3 天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。 七、注意事项:1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 中国微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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