水杨梅苷对照品

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  • 59.2 HPLC法测定杨梅叶中杨梅苷的含量

    59.2 HPLC法测定杨梅叶中杨梅苷的含量

    作者:齐洁;万竹青;李默影;吴秋月;刘丽芳(中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室 江苏南京210009)摘要:目的:建立HPLC法测定杨梅叶中杨梅苷含量的方法。方法:采用DiamonsilC18(150mm×4.6mm,5耻m)柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长358nm,柱温30cC。结果:杨梅苷在0.088-0.880mg/mL内与峰面积呈良好线性关系,A=36113C-401.56,r=0.9994;平均回收率为102.4%,RSD:1.9%(n:9)。测得杨梅叶中杨梅苷含量为1.43%。结论:该测定方法准确,可靠,对于杨梅的进一步开发利用具有重要的参考意义。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208211741_385107_1609970_3.jpg

  • 杨梅的功效与作用

    杨梅的功效与作用

    [align=center][color=#444444][img=,380,275]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908200938344012_6965_676_3.png!w380x275.jpg[/img][/color][/align][color=#444444]1、杨梅对大肠杆菌、痢疾杆菌等细菌有抑制作用,能治痢疾腹痛,对下痢不止者亦有良效。杨梅性味酸涩,具有收敛消炎作用,加之其能够抑菌,故还可治各种泄泻。而杨梅树皮含鞣质、杨梅树皮甙等,也是主治痢疾、目翳、牙痛、恶疮疥癞等病症的良品。[/color][color=#444444]2、生津止渴是夏季祛暑之良品可以预防中暑去痧解除烦渴。且助消化增食欲,因其含有多种有机酸,维生素C的含量也十分丰富,鲜果味酸,食之可增加胃中酸度,消化食物,促进食欲。[/color][color=#444444]3、降血压防中风。杨梅鲜果中钾的含量极为丰富,每100克鲜果含钾量达100毫克左右。钾元素在维持心脏功能、参与新陈代谢以及降低血压等方面的功效突出,还有助于调节情感,稳定情绪,减少中风的发病率。因此具有理气活血,调节血脂,降低胆固醇和血压,预防中风等作用。[/color][color=#444444]4、防癌抗癌杨梅中含有维生素C、B对防癌抗癌有积极作用。杨梅核仁中含有维生素B17,这是一种抗癌物质,所含的氰苷类、脂肪油等也有抑制癌细胞的作用。[/color][color=#444444]5、注意事项。一般人群均能食用,但溃疡病患者慎食牙疼、胃酸过多、上火的人不要多吃糖尿病患者忌食。[/color]

  • CNS_08.149_杨梅红

    CNS_08.149_杨梅红

    [align=center][/align][align=center][font='仿宋'][size=16px][color=#000000]丁磊[/color][/size][/font][/align][align=center][font='黑体'][size=21px][color=#000000]目录[/color][/size][/font][/align][url=#_Toc6221][font='calibri'][size=14px]第1章:食品着色剂的开发和利用[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]3[/size][/font][url=#_Toc25066][font='calibri'][size=14px]1.1食品着色剂[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]3[/size][/font][url=#_Toc22488][font='calibri'][size=14px]1.2食品天然着色剂[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]3[/size][/font][url=#_Toc27630][font='calibri'][size=14px]1.3食品天然着色剂与应用[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]4[/size][/font][url=#_Toc17278][font='calibri'][size=14px]第2章:杨梅红色素的提取与分析[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]5[/size][/font][url=#_Toc24833][font='calibri'][size=14px]2.1杨梅[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]5[/size][/font][url=#_Toc15566][font='calibri'][size=14px]2.2提取实验仪器与方法[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]5[/size][/font][url=#_Toc27032][font='calibri'][size=14px]2.21实验仪器[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]5[/size][/font][url=#_Toc19226][font='calibri'][size=14px]2.22实验方法[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]5[/size][/font][url=#_Toc13728][font='calibri'][size=14px]2.23杨梅红色素组成鉴定[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]6[/size][/font][url=#_Toc13535][font='calibri'][size=14px]2.3杨梅红色素的组成[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]6[/size][/font][url=#_Toc30430][font='calibri'][size=14px]第三章:杨梅红色素的理化性质[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]7[/size][/font][url=#_Toc15645][font='calibri'][size=14px]3.1研究方法[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]7[/size][/font][url=#_Toc9051][font='calibri'][size=14px]3.1.1[/size][/font][/url][url=#_Toc9051][font='calibri'][size=14px]杨梅红色素的光谱试验取测试液[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]7[/size][/font][url=#_Toc27803][font='calibri'][size=14px]3.1.2 p[/size][/font][/url][url=#_Toc27803][font='calibri'][size=14px]H值对杨梅红色素稳定性的影响[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]8[/size][/font][url=#_Toc26656][font='calibri'][size=14px]3.1.3[/size][/font][/url][url=#_Toc26656][font='calibri'][size=14px]温度对杨梅红色素稳定性的影响[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]8[/size][/font][url=#_Toc20019][font='calibri'][size=14px]3.1.4[/size][/font][/url][url=#_Toc20019][font='calibri'][size=14px]氧化剂对杨梅红色素的影响[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]8[/size][/font][url=#_Toc14023][font='calibri'][size=14px]3.1.5[/size][/font][/url][url=#_Toc14023][font='calibri'][size=14px]还原剂对杨梅红色素的影响 [/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]8[/size][/font][url=#_Toc32406][font='calibri'][size=14px]3.1.8[/size][/font][/url][url=#_Toc32406][font='calibri'][size=14px]金属离子对杨梅红色素稳定性的影响[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]8[/size][/font][url=#_Toc27826][font='calibri'][size=14px]3.2结果分析[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]9[/size][/font][url=#_Toc13106][font='calibri'][size=14px]3.3结论分析[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]12[/size][/font][url=#_Toc18666][font='calibri'][size=14px]参考文献[/size][/font][/url][font='calibri'][size=14px]13[/size][/font][align=center][/align][align=center][font='calibri'][size=14px]第1章:食品着色剂的开发和利用[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=14px]1.1食品着色剂[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]食品着色剂(Food Colorant)又称食品色素,是以食品着色为主要目的的一类食品添加剂。食品的色泽是人们对于食品食用前的第一个感性接触,是人们辨别食品优劣,对其做出初步判别的基础,也是食品质量的一个重要指标。食品天然的颜色,可以预见其营养价值、变质与否以及商品价值的高低。食品若具有鲜艳的色泽不仅可以提高食品的感官性质,给人以美的享受,还可以引起人们的食欲。反之,若食品在加工过程中,由于受到光、热、氧气或化学药剂作用等各种原因,使天然色素褪色或造成食品色变而失去光泽,引起色泽失真,会使人产生一种不协调的食品变质的错觉,从而严重影响食品的感官质量。因此,在食品加工中为了更好地保持或改善食品的色泽,需要向食品中添加一些食品着色剂。[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]食用着色剂是食品添加剂的重要组成部分,不仅广泛应用于饮料、酒类、糕点、糖果等饮料食品,以改善其感官质量,而且也大量用于医药和化妆品生产中。[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=14px]1.2食品天然着色剂[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]食品天然着色剂,也称食品天然色素,主要是指从动、植物和微生物中提取的着色剂,一些品种还具有维生素活性(如β胡萝卜素),有的还具有一定的生物活性功能(如栀子黄、红花黄等)。其品种繁多,色泽自然,无毒性,而且使用范围和日允许用量(ADI)都比合成着色剂宽,但也存在成本高、着色力弱、稳定性差、容易变质,-些品种还有异味、异臭、难以调出任意色等缺点。近年来天然着色剂的开发应用发展很快,一-些国家天然着色剂的用量已超过合成着色剂。天然食用色素按其来源不同,主要有以下三类:①植物色素,如甜菜红、姜黄、β胡萝卜素、叶绿素等 ②动物色素,如紫胶红、胭脂虫红等 ③微生物类,如红曲红等。按其化学结构可以分成六类:①四吡略衍生物(卟啉类衍生物),如叶绿素等 ②异戊二烯衍生物,如辣椒红、β胡萝卜素、栀子黄等 ③多酚类衍生物,如越橘红、葡萄皮红、玫瑰茄红、萝卜红、红米红等 ④酮类衔生物,如红曲红、姜黄素等 ⑤醌类衍生物,如紫胶红、胭脂虫红等 ⑥其他,如甜菜红等。按照溶解性质的不同,天然食用着色剂可分为水溶性和油溶性两类。但是其溶解性是可以改变的,如β胡萝卜素不溶于水,在脂肪为主的食品中溶解较慢,且易被氧化,但经工艺处理后,则可以转变为可溶于水、油,又可延缓氧化。[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]在19世纪中叶以前,主要是应用一些比较粗制的天然色素作为食用着色剂 随着化学工业的发展,合成色素相继问世,并以其具有色泽鲜艳、稳定性好、着色力强、适于调色、易于溶解、品质均一、 无臭无味以及价格 便宜的优点,很快就取代了食用天然着色剂在食品中的应用。但随着毒理学研究的进展,合成者色剂作为食品添加剂的安全性问题受到广泛关注,很多国家部分甚至全部禁止了食用合成者色剂,所以,食品着色剂,特别是食品天然着色利的研究与开发有着广蟈的发展前景和很大的市场潜力。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=14px]1.3食品天然着色剂与应用[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]食品天然着色剂以植物性着色剂占多数。天然食品着色剂不仅安全,而且许多具有一童说.定的营养价值和生理活性:如β胡萝卜素不仅是食品天然着色剂,同时还是一种重要的营养强化剂,在防癌抗癌和预防心血管疾病方面具有明显作用。目前,许多国家和地区都致力于天然着色剂的发掘和研制。由于食品天然着色剂的安全性较高,因而发展较快,世界各国许可使用的品种和用量都在不断增加,国际上开发出的天然着色剂已有100种以上。[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]大力发展天然着色剂已成为食品着色剂的发展方向。缺点:成本高、着色力弱.稳定性差容胃天然着色剂作为食品添加剂的一种已经被人们所接受,而且随着人们对食品添加剂安有些身全性意识的提高,大力开发“天然、营养、多功能”的食用天然色素,如胡萝卜、黄酮类异口.色素等,将越来越得到人们的重视。但天然着色剂来自于天然产物,其成分复杂,而且有难叭的未经完全分离、精制和鉴定,所以研究天然色素中成分的结构、性质以及它们的功能性任常和安全性也是食用天然色素面临的重要课题。[/size][/font][/align][align=center][/align][align=center][font='calibri'][size=14px]第2章:杨梅红色素的提取与分析[/size][/font][/align][align=center][/align][align=left][font='calibri'][size=14px]2.1杨梅[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]杨梅:属于[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%9C%A8%E5%85%B0%E7%BA%B2][font='宋体'][size=16px][color=#000000]木兰纲[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]、杨梅科、杨梅属小乔木或灌木植物,又称圣生梅、白蒂梅、[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%A0%91%E6%A2%85][font='宋体'][size=16px][color=#000000]树梅[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]具有很高的药用和食用价值,在中国[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E5%8D%8E%E4%B8%9C][font='宋体'][size=16px][color=#000000]华东[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]和湖南、广东、广西、贵州等地区均有分布。杨梅原产中国浙江余姚,1973年余姚境内发掘新石器时代的河姆渡遗址时发现杨梅属花粉,说明在7000多年以前该地区就有杨梅生长。该属有50多个种,中国已知的有杨梅、[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%99%BD%E6%9D%A8%E6%A2%85][font='宋体'][size=16px][color=#000000]白杨梅[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%AF%9B%E6%9D%A8%E6%A2%85][font='宋体'][size=16px][color=#000000]毛杨梅[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E9%9D%92%E6%9D%A8%E6%A2%85][font='宋体'][size=16px][color=#000000]青杨梅[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]和[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%9F%AE%E6%9D%A8%E6%A2%85][font='宋体'][size=16px][color=#000000]矮杨梅[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000],经济栽培主要是杨梅。杨梅枝繁叶茂,树冠圆整,初夏又有红果累累,十分可爱,是园林绿化结合生产的优良树种。孤植、丛植于[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E8%8D%89%E5%9D%AA/8938060][font='宋体'][size=16px][color=#000000]草坪[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E5%BA%AD%E9%99%A2/181202][font='宋体'][size=16px][color=#000000]庭院[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000],或列植于[/color][/size][/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E8%B7%AF%E8%BE%B9/8962003][font='宋体'][size=16px][color=#000000]路边[/color][/size][/font][/url][font='宋体'][size=16px][color=#000000]都很合适;若采用密植方式来分隔空间或起遮蔽作用也很理想。经济用途果味酸甜适中,既可直接食用,又可加工成杨梅干、酱、蜜饯等,还可酿酒,有止渴、生津、助消化等功能。[/color][/size][/font][/align][font='calibri'][size=14px]2.2提取实验仪器与方法[/size][/font][font='calibri'][size=14px]2.21实验仪器[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]HPLC 仪(waters 600,GBC),UV-1200 仪(USA,PE 公司),723 型分光光度计(上海第三 分析仪器厂),超级恒温水浴锅(±0.2℃,重庆试验设备厂),pHS-3B 精密 pH 计(上海雷磁仪 器厂)。无水乙醇、甲醇、乙醚、石油醚、氯仿、丙酮,Al(NO3)3、Fe(NO3)3 等试剂,均为 AR级。“早红杨梅”、“海红杨梅”(市售)[/color][/size][/font][/align][font='calibri'][size=14px]2.22实验方法[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]提取 分别取“早红杨梅”、“海红杨梅”鲜果,洗净、滤干、压榨,各称取干渣 100g, 加 5000mL 1%(V/V)HCl-甲醇溶液,在高速匀浆机中控制 3000r/min 捣碎 5min,移入烧杯, 4℃下存放 12h,以 8000r/min,离心 6min,取上清液,分装入真空旋转蒸发器中于 25℃下浓缩 至 50mL,依次编为Ⅰ、Ⅱ。 [/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000] 取浓缩液于定性新华滤纸(50cm×40cm)上点样数次,吹干后在 1%(V/V)HCl 水溶液中层析 5h,取出风干,裁下红色部分,继用 0.01%(V/V)HCl-甲醇溶液解析,然后真空 浓缩至 5mL。浓缩液再点样、层析[展开剂(BAW)为正丁醇:冰醋酸:水=4:1:5]12h,取出 风干,剪取红色部分,用 0.01%HCl 解析,浓缩后点样,再层析[展开剂:15%(V/V)HAc]5h, 取出风干,红色部分用 0.01%HCl-甲醇溶液解析,真空浓缩、干燥,得“早红”杨梅红色素(Ⅰ)、 “海红”杨梅红色素( Ⅱ)。[/color][/size][/font][/align][font='calibri'][size=14px]2.23杨梅红色素组成鉴定[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]杨梅红色素组成鉴定 分别取 0.1mgI、Ⅱ杨梅红色素,用 5mL 1mol/L HCl 溶解,100 ±0.2℃保持 40min,冷却后加 2.5mL 戊醇,振荡,静置 15min。取有机相点样、层析[展开剂 为 BAW,1%HCl、Formic(HCOOH:浓 HCl:H2O=5:2:3)],测定 Rf 值;取水相用 HPLC 法鉴定, 标准糖为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖和木糖。 光谱分析 分别扫描Ⅰ、Ⅱ溶液及加 1.50mL 0.5%(W/V)AlCl3-CH3OH 溶液后的 UV-VIS 光谱,同时观测 254nm 紫外分析灯下斑点的荧光。[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]2.3杨梅红色素的组成[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]有机相经纸色谱分析,结果表明:Ⅰ、 Ⅱ均有 6 条谱带,其中 D 谱带分别占 95%、96%, 其余含量甚微;与文献[7]的 Rf 值比较,可推出 D 带为矢车菊花色苷元,其余可能为天竺葵花 色苷、飞燕草花色苷元和芍药花色苷等,详见表 1。 表 1 “早红”、“海红”杨梅红色素的 Rf 值。[/color][/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602003652_6234_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=left][font='宋体'][size=13px][color=#000000]([/color][/size][/font][font='宋体'][size=16px][color=#000000])内数据为文献[7]数值,下同。 [/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]水相用 HPLC 法检测,“早红”和“海红”杨梅水解的糖的保留值为 6.18 与 6.19min,而标 准葡萄糖为 6.21min,半乳糖 6.52min,阿拉伯糖 5.24min。由此可推测,“早红”及“海红”杨梅 花色苷中的糖为葡萄糖。 [/color][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]I 和Ⅱ的 6 条纸色谱带洗脱液的 UV—VIS 光谱数据表明:两种色素于 UV 和 VIS 区均有 最大吸收峰,当有 Al3+存在时,A、B、C、D 谱带在 VIS 区的最大吸收峰发生红移,说明β 环有邻位羟即含有矢车菊、牵牛花和飞燕草花色苷。在紫外灯下除 A 谱带外,无荧光现象, 说明花色苷的α位上无羟基。[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602003393_3153_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][font='宋体'][size=16px][color=#000000]据文献[7],在单苷中 E440/Eλmax=0.24,E1λmax/E2λmax=0.60 者只有矢车菊花色苷元-3-葡萄糖苷和芍药花色苷元-3-葡萄糖苷,从而推测 I、Ⅱ的花色苷组成主要为矢车菊花色苷,少量芍药 花色苷和天竺葵花色苷。[/color][/size][/font][/align][align=center][font='calibri'][size=14px]第三章:杨梅红色素的理化性质[/size][/font][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]3.1研究方法[/size][/font][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]3.1.1[/size][/font][font='calibri'][size=14px]杨梅红色素的光谱试验取测试液[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px]在440~560[/size][/font][font='宋体'][size=16px]n[/size][/font][font='宋体'][size=16px]m的波长范围扫描,得到红色素液的光谱图。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left]3.1.2 pH值对杨梅红色素稳定性的影响[/align][align=left][font='宋体'][size=16px]取等量的测试液11份于小烧杯中,用稀HC[/size][/font][font='宋体'][size=16px]L[/size][/font][font='宋体'][size=16px]和稀NaOH溶液调节PH值,放置5mi[/size][/font][font='宋体'][size=16px]n[/size][/font][font='宋体'][size=16px]于510[/size][/font][font='宋体'][size=16px]n[/size][/font][font='宋体'][size=16px]m处测吸光值。[/size][/font][/align][align=left]3.1.3温度对杨梅红色素稳定性的影响[/align][align=left][font='宋体'][size=16px]配置p[/size][/font][font='宋体'][size=16px]H值为[/size][/font][font='宋体'][size=16px]3和pH为5[/size][/font][font='宋体'][size=16px]的一定浓度的红色素溶液20mI,分别在25(室温)40.60.80°C[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]沸水的恒温水浴中保存2[/size][/font][font='宋体'][size=16px]h[/size][/font][font='宋体'][size=16px]测吸光度。[/size][/font][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]3.1.4[/size][/font][font='calibri'][size=14px]氧化剂对杨梅红色素的影响[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px]以[/size][/font][font='宋体'][size=16px]和[/size][/font][font='宋体'][size=16px]为氧化剂,在测试液中分别加入10mL[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0.[/size][/font][font='宋体'][size=16px]01%、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0.[/size][/font][font='宋体'][size=16px]02%、1.0%(不超过一般食品中的最大安全使用量2[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0% )”的溶[/size][/font][font='宋体'][size=16px]溶液,[/size][/font][font='宋体'][size=16px]或5mL0[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]10、0[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]50、1.00m[/size][/font][font='宋体'][size=16px]g[/size][/font][font='宋体'][size=16px]/mL的[/size][/font][font='宋体'][size=16px]溶液,测定吸光度值。[/size][/font][/align][align=left]3.1.5还原剂对杨梅红色素的影响 [/align][align=left][font='宋体'][size=16px]以[/size][/font][font='宋体'][size=16px]为还原剂,在测试液中分别加入10mL0.01、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0.[/size][/font][font='宋体'][size=16px]06、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0.[/size][/font][font='宋体'][size=16px]20m[/size][/font][font='宋体'][size=16px]g[/size][/font][font='宋体'][size=16px]/mL的[/size][/font][font='宋体'][size=16px]溶液,测定吸光度值。以维生素C为还原剂,在测试液中加入0.2.4[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]6[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]8.10mL1[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0.[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0mg/mI的维生素C溶液,测定吸光度值。[/size][/font]3.1.6食品基质对杨梅红色素稳定性的影响[/align][align=left][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]取一定浓度PH值为3的红色素溶液各20m[/size][/font][font='宋体'][size=16px]L[/size][/font][font='宋体'][size=16px],加入葡萄糖、蔗糖、淀粉、食盐各0、2、4、6、8、10mL10.0mg/[/size][/font][font='宋体'][size=16px]mL[/size][/font][font='宋体'][size=16px]浓度的基质,放置120min测吸光度值。[/size][/font]3.1.7自然光对杨梅红色素稳定性的影响[/align][align=left][font='宋体'][size=16px]取等量的测试液2份,在25°C[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px](室温)下,1份避光保存,另1份不避光。每隔1d测1次吸光度。[/size][/font][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]3.1.8[/size][/font][font='calibri'][size=14px]金属离子对杨梅红色素稳定性的影响[/size][/font][align=left][font='宋体'][size=16px]取等量的测试液8份,1份不添加金属离子,其余分别加入2[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0m[/size][/font][font='宋体'][size=16px]g[/size][/font][font='宋体'][size=16px]/mI.[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][size=16px]2mL[/size][font='宋体'][size=16px]放置30m[/size][/font][font='宋体'][size=16px]in[/size][/font][font='宋体'][size=16px]和测定吸光度。[/size][/font][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]3.2结果分析[/size][/font][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.1杨梅红色素的光谱试验。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]杨梅红色素在可见光范围440~560[/size][/font][font='宋体'][size=16px]n[/size][/font][font='宋体'][size=16px]m处有最大吸收波长为510[/size][/font][font='宋体'][size=16px]n[/size][/font][font='宋体'][size=16px]m[/size][/font][font='宋体'][size=16px]。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.2 pH值对杨梅红色素稳定性的影响。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]p[/size][/font][font='宋体'][size=16px]H值对杨梅红色素稳定性的影响结果如表1所示。由表1可知,杨梅红色素在PH值2~6时吸光度变化不大,PH值越小颜色越鲜艳,PH值大于7时,吸光度变化较大且颜色发生变化,所以不宜在碱性条件提取、保存和使用杨梅红色素。[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602004818_7713_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.3 温度对杨梅红色素稳定性的影响。 [/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]温度对杨梅红色素稳定性的影响试验结果见表2从表2可以看出,杨梅红色素随温度的升高吸光值不断减小。红色素随保存时间的推移,吸光度不断减小,但在60°C以下,变化率较小。所以,红色素在酸性条件下,60°C以下保存2h稳定性较好。[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602005590_837_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.4 氧化剂对杨梅红色素的影响.[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]由表3可以看出,随溶液中氧化剂[/size][/font][font='宋体'][size=16px]浓度的增加和时间的延长,吸光度值递减,表明杨梅红色素耐氧化剂较差,应用中应避免与氧化剂接触。由图1可知,氧化剂[/size][/font][font='宋体'][size=16px]的加入降低了红色素的吸光度值,但影响不大。[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602007577_1428_1608728_3.png[/img][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.5 还原剂对杨梅红色素的影响。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]由图2可知,[/size][/font][font='宋体'][size=16px]液对红色素的吸光度值有较大影响。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]溶液浓度越大,影响越大。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602008407_7557_1608728_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602009501_2891_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.1.6 食品基质对杨梅红色素稳定性的影响。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]由表4可知,随着食品基质加入量的增大,红色素的吸光度稍有减小,但减小的趋势非常缓慢,说明加入以上基质对红色素的稳定性影响不大。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602009203_6063_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.7自然光对杨梅红色素稳定性的影响。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]由表5可知,红色素在避光和不避光的条件下保存,吸光.度值都随着时间的延长而减小,在不避光条件下,吸光度降低得更快,说明自然光对红色素有很大的影响。在试验过程中应该注意避光。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602010004_8158_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]3.2.8 金属离子对杨梅红色素稳定性的影响。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]从表6可以看出,[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]对杨梅红色素吸光度基本无影响,[/size][/font][font='宋体'][size=16px]的影响较小,[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]响很大,不但吸光度值降低很多,而且溶液的颜色也发生显著变化。加入的溶液,颜色由红色变为浅橙色[/size][/font][font='宋体'][size=16px]。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602010824_2046_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][font='calibri'][size=14px]3.3结论分析[/size][/font][align=left][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]本研究结果表明,PH值对杨梅红色素的稳定性影响较大。色素在pH值2~6时较稳定,pH值越小颜色越鲜艳,pH值大于7时吸光度变化较大且颜色发生变化,所以该色素不宜在碱性条件下提取、保存和使用。杨梅红色素热稳定性较差,在加工过程中不宜超过60°C,控制在40°C以内效果最佳。自然光对红色素有影响,所以在试验过程中或作为产品,都应该避光保存。氧化剂[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、还原剂[/size][/font][font='宋体'][size=16px]对杨梅红色素的影响很大。氧化剂[/size][/font][font='宋体'][size=16px]对杨梅红色素基本无影响。还原剂维生素C对杨梅红色素有一定的增色作用,但增色作用不明显。本试验中加入的4种食品基质对杨梅红色素稳定性的影响甚微。在食品加工中可以不考虑这4种食品基质对杨梅红色素的影响。金属离子[/size][/font][font='宋体'][size=16px]、[/size][/font][font='宋体'][size=16px]和[/size][/font][font='宋体'][size=16px]对色素的影响很大,在加工中应避免接触,不使用铜制[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=21px][color=#000000]参考文献[/color][/size][/font][/align][font='calibri'][size=14px][1] [/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会. [/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]GB2760-2014[/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]食品安全国家标准, 食品添加剂使用标准[/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20][s][/s][/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]. 北京:中国标准出版社, [/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]2014.[/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][2] [/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]杨梅果实品质分析和红色素稳定性研究.严和平,陈瑞,刘卫,路俊梅,龙云惠,姚立华[/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][3] [/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]杨梅红色素的提取,纯化,及其理化性质。林璇[/color][/size][/font][font='calibri'][size=14px][4] [/size][/font][font='calibri'][size=14px][color=#231f20]食品添加剂第二版。孙包国主编[/color][/size][/font][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602011928_9621_1608728_3.png[/img][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106191602013827_479_1608728_3.jpeg[/img][/align]

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    我要测讯 诺如病毒(Norovirus)是一组杯状病毒属病毒,其原型株诺瓦克病毒(Norwalk-like viruses)于1968年在美国诺瓦克市被分离发现。诺如病毒感染性强,以肠道传播为主,可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播,常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。感染者发病突然,主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻。   世界上很多地区都有暴发的案例,例如2010年广州从化因为水污染引起的诺如病毒感染事件,共有429人发病 2012年9月底,德国首都柏林以及东部三个地区1万多名小学生和托儿所的幼儿发生疑以诺如病毒食物中毒 尤其以2012年12月,日本各地接连发生一系列因诺如病毒而引起的集体食品中毒事件最此人关注,从爱知县名古屋市一直到广岛县广岛市总的中毒人数1809人。   诺如病毒是全球流行性与散发性腹泻的主要病原之一,受污染的食品、水源是诺如病毒传播的重要污染源,例如贝类、水果、蔬菜、饮用水、水源水等。目前,我国在食品与水样中诺如病毒检测方面还没建立有相关的国家标准。根据文献报道,诺如病毒的检测方法主要包括电镜法、免疫法及分子扩增法(主要为PCR方法),其中分子扩增方法被认为是食品中检测诺如病毒的唯一方法(其他两种方法灵敏度差),而PCR则为“金标准”而被广泛作地采用。因此,完整的食品与水样中诺如病毒检测的主要流程共包括病毒的提取、核酸的纯化以及病毒的分子检测。   食品及水样中诺如病毒的检测方法   (protease K digestion & real-time reverse transcription-PCR)   一、实验原理   挑取被检样本或者被检样本中病毒易富集部位(例如贝类的消化腺组织),通过蛋白酶K消化的方法解离病毒,然后通过异硫氰酸胍等试剂纯化病毒RNA,接下来继续将病毒RNA进行反转录,最后将产物cDNA进行PCR检测。   二、仪器和试剂   荧光定量PCR仪、振荡培养箱、涡旋振荡器、离心机,TRIzol试剂、MMLV反转录试剂盒、Taqman realtime-PCR试剂盒超均为商品化试剂,其他试剂为国产分析纯,实验用水为不含核酸酶的超纯水。   三、实验方法   1.食品前处理   选取被检适当量样本(不同种类食品样本量不同)。以贝类样本为例,一般取5~10个左右,用无菌水冲洗干净贝壳表面后撬开贝壳,然后用无菌的手术刀切取其中的消化腺组织共1.5g,并尽量切碎贝类组织。   2.蛋白酶K消化   诺如病毒解离的方法有很多,包括PEG沉淀法、超滤法、超速离心法等等,而蛋白酶K消化的方法由于其自身简单、耗时短、稳定性高等特点,而被欧洲标准化委员会认定为贝类中诺如病毒解离的标准操作方法。   ①向1.5g被检样本中加入2mL PBS,并加入蛋白酶K至浓度0.2mg/mL   ②涡旋振荡混匀后,置于37℃、300r/min的振荡器中孵育1h   ③孵育后样本置于65℃10min,进行蛋白酶K灭活处理   ④灭活后样本于3000r/min下离心5min,取上清进行下一步实验。   3.核酸纯化   RNA纯化用硅胶膜试剂盒与TRIzol试剂是目前主要采用的病毒RNA的纯化方法。目前本实验室采用TRIzol试剂法进行诺如病毒RNA的纯化:   ①取300μL上清液,加入到含1mL预冷的Trizol的EP管中,混匀后室温放置5min,加入0.2mL氯仿,充分混匀或旋窝震荡15s,室温放置5min,12000g离心15min   ②小心取上层水相600μL至含有预冷的600μL异丙醇的EP管中,混匀,室温放置10min,12000g离心10min   ③小心倒掉上清,加入1ml 75%乙醇(用DEPC处理的水进行配制),洗涤沉淀,12000g离心5min 倒掉上清,尽量吸净残留液体,室温放置风干数分钟   ④加入50μL无Rnase的H2O溶解RNA,可选择于70℃水浴5min加速RNA溶解,然后放于-80℃保存或直接用于反转录操作。   4.反转录   本实验目前采用两步法RT-PCR的方法进行诺如病毒的检测,因此首先将纯化的RNA进行反转录操作。采用M-MLV反转录试剂盒进行病毒RNA的反转录:   ①取10μLRNA,2μL Rondom Primer(50uM),5.5μL无Rnase的H2O,混匀后70℃热激5min并立即冰浴   ②加入1μLM-MLV(200U/ul),0.5μLRNA酶抑制剂(40U/μL),5μL5×Buffer,1μL dNTP(10μmol/L),共25μL混匀离心   ③按以下程序进行反转录:30℃预处理10min,37℃反转录60min,最后70℃处理15min以灭活反转录酶等。   5.PCR检测   PCR检测的方法可分为定性检测与定量检测,而realtime PCR被引入到诺如病毒检测后,由于其灵敏度高、检测时间短、污染风险小等优点而被广泛使用。本实验室目前采用Taqman realtime-PCR方法进行诺如病毒的定量检测。   ①采用国际上普遍使用的引物与探针 名称 引物序列 方向 QNIF2d ATGTTCAGRTGGATGAGRTTCTCWGA + COG2R TCGACGCCATCTTCATTCACA - QNIFS FAM- AGCACGTGGGAGGGGATCG -TAMRA QNIF4 CGCTGGATGCGNTTCCAT + NV1LCR CCTTAGACGCCATCATCATTTAC - NV1LCpr TGGACAGGAGAYCGCRATCT   ②首先加入10 μL 2×PCR Mix,然后加入适当浓度的引物及探针,然后加入2 μL模板,最后ddH2O补足20 μL体系。   ③按以下程序进行反应:94℃预变性10 s,然后94℃变性5 s,60℃延伸20 s,共循环45次。 图1 荧光定量PCR仪 图2 荧光定量PCR反应   5.对照设置   为了保证实验的准确性,在过程每一步均设立阳性对照与阴性对照。其中阴性对照均采用超纯水,而阳性对照分别为:PCR过程采用构建的标准质粒,RT过程采用标准质粒体外转录得到的标准RNA。   四、附图:Realtime PCR定量检测的标准曲线 图3 两步法Taqman RT-qPCR标准曲线   其中X轴为检测模板拷贝数的对数值,Y轴为qPCR检测的CT值。一般以CT值处于15~35之间为检测范围,对应的检测模板量约为102~108copies。   附:广东省微生物分析检测中心   广东省微生物分析检测中心是1999年经广东省机构编制委员会批准,在广东省微生物研究所的基础上成立,并于当年通过计量认证(CMA),现隶属广东省科学院,在检测业务上接受广东省质量技术监督局领导。2004年,中心通过中国实验室国家认可委员会(CNAS)认可,是具有独立法人地位的第三方实检测验室。   主要对外业务包括:食品、保健品、饮料及饮用水检测 食品安全性检测与评价 农产品检测 药品、一次性使用医疗用品检测 化妆品、日化产品、卫生用品检测 防霉、抗菌、消毒产品及消毒器械的检测 玩具、电器、空气净化器、室内装饰装修材料检测 公共场所用具及包材检测 微生物菌剂的环境安全性测试和评价 水质检测 空气检测 菌种鉴定 微生物控制及检测培训与技术服务等。   检测中心自成立以来,业务遍及全国,具有很高的知名度和影响力。检测中心的科技人员积极跟踪国内外相关行业的国际标准、国家标准的制定、修订的发展情况,主持和参与了50多项国家标准、行业标准、地方标准的制修订工作。2006年被广东省科技厅批准为 “广东省食品安全检测与评价科技创新平台”食品微生物安全性检测与评价中心,并成为该平台建设的主要承担单位。2010年亚运会在广州举办之时,受邀参与“第十六届亚运会公共卫生保障合作实验室”,成为广州地区共同承担“亚运期间新发传染病、食物中毒等重大突发公共卫生事件实验室检验检测工作”的8家实验室之一。

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