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?我们用岛津ELSD-16做知母皂苷B2 含量测定时为什么理论塔板数达不到10000,蒸发光检测器的设置是多少?谢谢!
【作者】 范辉; 谷忠良;【机构】 广东药学院药科学院; 广东药学院中医药研究院;【摘要】 目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定清肺抑火丸中知母皂苷BII含量的方法。方法采用Diamonsil-C8色谱柱,柱温为30℃;以乙腈-水(21∶79)为流动相,流速为1.0 mL.min-1;蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为80℃,载气压力30 psi。结果在选定的色谱条件下,以知母皂苷BII峰面积的常用对数(Y)对浓度的常用对数(X)进行线性回归,回归方程为Y=1.7850X+1.9723,线性范围为8.2~82.0μg.mL-(1r=0.9997),知母皂苷BII的平均回收率为101.2%,RSD为1.05%(n=6)。结论该法可用于清肺抑火丸中知母皂苷BII的含量测定。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207231711_379259_2379123_3.jpg
应雪妖版主的客户要求,对月旭不同型号的C8色谱柱进行知母皂苷BⅡ的测试,最终选择一款适合知母皂苷BⅡ测试的柱子。前言很快我就收到了雪妖寄来的快递,里面装了满满5根柱子,当然还有知母皂苷BⅡ对照品溶液和知母样品溶液。因为当时氮气用完了,中间等待了两天才开始实验,实验总共花了3天时间。1、实验部分1.1、仪器和和设备LC310 液相色谱仪-ELSD 蒸发光散射检测器(LC310 为江苏天瑞仪器股份有限公司生产,ELSD 为美国奥泰公司提供);超纯水机(南京易普易达科学发展有限公司);超声波清洗机(张家港市神科超声电子有限公司)1.2 试剂氮气(购于昆山当地,纯度大于99.999%);乙腈(色谱纯,美国TEDIA 公司生产);超纯水:自制;色谱柱(C8)共5根,均为月旭材料科技(上海)有限公司提供。5根色谱柱型号如下:1#:Xtimate C8,编号:22904 ,4.6mm*250mm,5um;2#:XB-C8,编号:Ult 101202c1,4.6mm*250mm,5um;3#:Ultimate LP-C8,编号:631001522,4.6mm*250mm,5um;4#:Xtimate C8,编号:4311015264.6mm*250mm,5um;5#:Topsil C8,4.6mm*250mm,5um。1.3 色谱条件知母药材中知母皂苷BⅡ的含量测定在中国药典2010 版一部正文198 页中规定:以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈:水=25:75 为流动相,蒸发光散射检测器检测。理论板数按照知母皂苷BⅡ峰计算应不低于10000。备注:因客户按药典方法制备提供的对照品和供试品溶液,因此制备溶液部分不做深究。 2 实验数据按液相色谱仪器操作规程打开仪器、氮气钢瓶、调整流动相比例,同时参照相关网络文献,首先将流速设置为1.0ml/min,色谱柱温:35℃,氮气压力设置为0.3MPa, 漂移管温度70℃。用1#色http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191501_317791_1628076_3.jpg在此色谱条件下对照品溶液进样10ul,色谱图如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191503_317792_1628076_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191503_317793_1628076_3.jpg按照同样的色谱条件,对供试品进样测试,谱图如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191504_317795_1628076_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191505_317796_1628076_3.jpg对照品与供试品谱图叠加如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191505_317797_1628076_3.jpg备注:在此之前,对氮气压力做过调整,试过0.25MPa,漂移管温度试过65℃,与0.3MPa和70℃基本没有什么区别,故将色谱条件设置为0.3MPa 的氮气压力和70℃的漂移管温度。且在此色谱条件下,色谱图能满足测试要求,理论板数都大于10000。同样的色谱条件,对其他几根色谱柱进行试验。2#色谱柱试验谱图基线谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191507_317798_1628076_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191508_317799_1628076_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191509_317800_1628076_3.jpg供试品溶液色谱图如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191509_317801_1628076_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191510_317802_1628076_3.jpg对照品和供试品谱图叠加如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109191511_317803_1628076_3.jpg备注:用2#色谱柱进行测试,理论板数均大于10000,且峰形对称。3#色谱柱,色谱条件同前:空跑基线谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211054_318270_1639959_3.jpg两针对照品溶液色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211055_318274_1639959_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211055_318275_1639959_3.jpg供试品溶液色谱图如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211057_318276_1639959_3.jpg对照品与供试品色谱图叠加如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211057_318278_1639959_3.jpg备注:3#色谱柱测试谱图,理论板数均大于10000。4#色谱柱,色谱条件同前:空跑基线谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211058_318279_1639959_3.jpg对照品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211059_318280_1639959_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211100_318281_1639959_3.jpg供试品色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211100_318282_1639959_3.jpg对照品与供试品色谱图叠加如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109211101_318283_1639959_3.jpg5#[size