肾上腺素受体激动剂

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肾上腺素受体激动剂相关的耗材

  • 瘦肉精专用柱 酸解法不用酶解只需2小时快速准确FaVEx-AG受体激动剂
    瘦肉精专用柱 酸解法不用酶解只需2小时快速准确FaVEx-AG受体激动剂FaVEx-AG净化原理:称取畜类肌肉或内脏等样品,加入盐酸溶液酸解,让瘦肉精类兽药残留充分释放出来,然后加入酸化乙腈溶液萃取目标物;上清液通过FaVEx-AG瘦肉精类专用SPE净化柱时,杂质被保留在填料上,浓缩转溶,以液相色谱-串级质谱仪的方法(LC-MS/MS)分析。 FaVEx-AG适用的瘦肉精种类:验证过29种(包括但不限于):3-邻甲基-甲酚、福莫特罗、班特罗、溴丁烯醇、溴氯丁烯、卡莫特罗、西马特罗、西布特罗、克伦特罗、环己醇、氯戊醇、克伦特罗、克伦丙罗、科尔特罗、酚甾醇、福莫特罗、羟甲基克伦特罗、茚达特罗、异丙肾上腺素、美特罗、马喷特罗、奥达特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、沙美特罗、叔丁基去甲肾上腺素、特布他林、杜洛特罗、齐帕特罗。 FaVEx-AG净化方法特点:Ø 不需酶解,只需酸解,大大节省时间,1.5h完成一批20个样品净化;Ø 操作简单,SPE柱无须活化平衡,节省溶剂、实验设备和人力;Ø 样品溶液以每秒一滴的速度通过SPE柱,5分钟完成净化;Ø 搭配正压固相萃取装置,批量6只/12只过柱,效率更高; 样品提取与净化:畜肉或畜内脏基质 ² 称取2.0g样品,加均质石、一定体积的盐酸溶液、剧烈震荡5min;² 加10mL 乙腈溶液(1%乙酸),剧烈振荡5min,离心(≥4000rpm)5min;² 取一定体积的上清液加入FaVEx-AG SPE柱中,以每秒1滴的速度流出,收集全部滤液;² 取一定体积的滤液,浓缩至近干,以甲醇/水(V/V=6:4)溶液定容至1.0mL;² 过0.22μm滤膜后,上机LC-MS/MS分析。备注:使用HPPE-48高通量真空振荡浓缩仪,批量48个做浓缩回溶,效率更高; 产品信息:品牌存货编码描述规格巨研FAVEX-AGFast Veterinary Drug Extraction Kit- Agonist 50/PK50只/盒 欢迎联络索取29种瘦肉精类药剂清单和仪器分析方法!
  • SupelMIP SPE 全β-受体(β-阻断剂和β-激动剂)
    SupelMIP SPE 全&beta -受体(&beta -阻断剂和&beta -激动剂) 25mg/10ml,50支/盒 开发用于从人类尿液和废水中选择性萃取 beta-激动剂和 beta-阻断剂。 该方法重现性极佳,当通过 LC-MS/MS 条件分析时可从 1mL 具有最小离子抑制的尿液中得到 50-90% 的萃取回收率。 SupelMIP 固相萃取相由 MIP Technologies AB 所开发,它是分子印迹聚合物的的领导者和商业先锋之一。此固定相可用于大规模分离、分析色谱和样品制备。 SupelMIP 固相萃取产品线是由高度交联聚合物组成。该类特殊的固定相对提取单个目标分析物或结构相似的分析物具有极高的选择性。在 MIP 合成过程中模仿目标分析物设计模板分子,该模板分子形成的洞穴或印记正好与目标分析物的立体和化学结构相匹配,这使得在 MIP 合成中引入选择性成为可能。 精心设计的印迹点是通过分子模拟、实验设计或筛选方法形成的,该印记点或洞穴能够提供多种与目标分析物的相互作用点。这可实现固相和分析物之间更强的相互作用。从而,在固相萃取方法中可允许更苛刻的冲洗条件,最终得到更干净的萃取物。由于萃取选择性得到显著提高,观察到的背景更低,使得分析物的检测限更低。
  • SupelMIP SPE 全β-受体(β-阻断剂和β-激动剂) 25mg/3ml,50支/盒
    SupelMIP SPE 全&beta -受体(&beta -阻断剂和&beta -激动剂) 25mg/3ml,50支/盒 开发用于从人类尿液和废水中选择性萃取 beta-激动剂和 beta-阻断剂。 该方法重现性极佳,当通过 LC-MS/MS 条件分析时可从 1mL 具有最小离子抑制的尿液中得到 50-90% 的萃取回收率。 SupelMIP 固相萃取相由 MIP Technologies AB 所开发,它是分子印迹聚合物的的领导者和商业先锋之一。此固定相可用于大规模分离、分析色谱和样品制备。 SupelMIP 固相萃取产品线是由高度交联聚合物组成。该类特殊的固定相对提取单个目标分析物或结构相似的分析物具有极高的选择性。在 MIP合成过程中模仿目标分析物设计模板分子,该模板分子形成的洞穴或印记正好与目标分析物的立体和化学结构相匹配,这使得在 MIP 合成中引入选择性成为可能。 精心设计的印迹点是通过分子模拟、实验设计或筛选方法形成的,该印记点或洞穴能够提供多种与目标分析物的相互作用点。这可实现固相和分析物之间更强的相互作用。从而,在固相萃取方法中可允许更苛刻的冲洗条件,最终得到更干净的萃取物。由于萃取选择性得到显著提高,观察到的背景更低,使得分析物的检测限更低。

肾上腺素受体激动剂相关的仪器

  • 爪痛觉测试仪 390/390G 400-860-5168转1674
    爪痛觉测试仪主要特点是动物不受限制,可自由活动,因此避免实验前刺激动物而引起的非正常反应。可重复测试,因此可在同一动物身上进行自身对照实验。产品品牌:IITC/USA产品型号:390/390G产品特点: 适用于 6只大鼠/12只小鼠用以测量啮齿类动物热刺激的反应,评估实验动物的痛觉阈值动物无需固定和对其进行抓取操作,可消除此因素引起动物肾上腺素的分泌(影响动物的痛觉阈值和动物对疼痛的反应时间)人性化自动切断功能(预设切断时间),以防止动物组织损伤与甩尾测试一样,重复测试不会导致动物敏感化与Randall-Selitto测试一样,属于双边测试(左右脚爪互作对照)测试的同时,可增加对“动物撤爪时长”“撤爪反应速度”“其它相关行为如舔爪”的主观记录,为检测药物的效果和动物的状态提供更多的信息加热强度0-250℃可调,精度1%,聚光尺寸4x6mm动物“提爪”反应时间精确度0.01秒(手动停止)3种方式(按钮、按键和脚踏开关)控制测试的起始、停止和复位刺激装置配有反面镜,角度可调节,方便观察动物脚爪位置数字键输入设置动物编号、最高加热温度、日期、时间、切断时间等参数测试数据可打印输出,也可传输至电脑可配置加热玻璃(30-40℃),以减少动物反应时间主机物理尺寸:18" x 18"
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  • 一.机型称号:激su荷尔蒙均质混合机,药物均质混合机,毫微米均质混合机,超飞快均质混合机,水管式均质混合机,3级均质混合机,高剪切均质混合机。二.研磨机:机型19款,处理量50到8*10000KG/小时,旋转1100到1.4*10000转/分钟,线速度23到44m/秒,电滚功耗1.5到160kW,磨头胶体磨&锥体磨。三.研磨分散机:机型6款,处理量50到6*1000KG/小时,旋转1100到9*1000转/分钟,线速度23m/秒,电滚功耗2.2到150kW,磨头胶体磨。四.小型分散乳化机:机型30款,处理量0.2克到10KG/小时,旋转50到3*10000转/分钟,线速度3到33m/秒,电滚功耗0.3到0.8kW。五.真空分散乳化机:机型32款,处理量5到2*10000KG/小时,旋转14到1.4*10000转/分钟,线速度44m/秒,电滚功耗0.18到120kW。六.均质匀浆机:机型4款,处理量0.2到150克/小时,旋转3500到8*1000转/分钟,线速度3到10m/秒,电滚功耗0.145到0.18kW。七.多效用分散乳化均质机:机型27款,处理量150到12.5*10000KG/小时,旋转960到1.4*10000转/分钟,线速度10到44m/秒,电滚功耗1.5到160kW。八.混合机:机型I6款,处理量300到12.5*10000KG/小时,旋转1100到9*1000转/分钟,线速度20到23m/秒,电滚功耗1.5到160kW。九.实用物料种类:胶粘溶胶,巨粒子固态液体悬空液乳剂,不包溶等。十.终级粒径:主腔内有叁组定转子,每组粗齿、中齿、细齿、超细齿。调动定转子间隙,加工后地终级粒径在10微纳米之下。十一.胚料配件:百分之八十以上进ロ海内外公司。十二.技艺出处:引荐德国技艺,立发明加工,备有专利。十三.工作方式:有在线式,批次式,内外循环式,水管式,可倒式,若干效用式。十四.机型合成:靠预加工锅、搅动锅、泵、液压系统、倒料系统、电力调动系统、主腔等部件合成。十五.智力化:CIP冲洗系统,液压升降松盖,包括配料给料吸料安装。?.磨头长处:研磨头可搭5个模板,6个分散头,20多个作业头。?.锥磨长处:锥磨转子外表含合金碳化物&不相同粒体的陶粒保护层等高品材料,避免毁坏侵蚀。?.产品材料:全部触及物料得材料都是进口不锈耐酸钢,腔体及管道内为光面磨光300emsh(卫生级),没死角。?.密封长处:博格曼双机械密封,液压均衡系统(可承担16BAR压强),软密封。?.翻搅形式:可定刮壁式/锚杆式/熔解式/页片式。?.产品特点:产品采取上边同轴3重装翻搅器,回路管路,出口阀。?.操控柜长处:不单可以控制电动调速,气温减温加温(经过电力,热气,油水回路,可承担负40—250度),压强,酸碱值,黏度。更可以设定不相同功用模板,表现互相配得各个参量,可线性变大大量出产。?.可抉选:参观窗,硅氟酸玻璃参观,电导率计,二层绝缘保护,稳定夹,作业台,底盘,图案解析多功用显微硬度仪(测量界线1—4千维氏硬度),管路式测量电炉(测量界线zui高1350度),传送泵/转子泵/气动隔膜泵/锚杆泵/离心泵(产量850—4.3万升/H),反应翻搅单罐/多罐(500—3千升/H),反渗入/全自动纯净装备(0.5—3千升/H),超氧产生器,过流式紫外光灭菌器等。?.别的特长:整体立方小,电耗低,分贝低,可每日不断出产。?.访客垂访:按照访客实况必要恰当抉选!别的可订制非标和生产线!假若是非常情况,比方超温,超压,易烧易炸,侵蚀性,可产品升级!?.物料测量:得到访客物料后当即投入测量,瞧可否到达要求&答复测量进程&成果。?.方案价格:断定好产品功用后当即策画方案,包含2D部署图,总安装出产线表示图,立体成果图,&呈上本该得价格单子!?.结语:我们是出产厂家,详尽信息可以企业查看,因此分外恭候访客去垂访&更深一步长谈!以上信息不容坊造,非常道谢!扩展内容可不看:荷尔蒙由人和动物的内分泌器官或组织直接分泌到血液中的对机体有特殊作用的物质。 胃肠器官和胎盘等组织也分泌激su,如胰分泌激su、胃液分泌激su、绒毛膜促性腺激su等。 各种激su的协调作用是维持人体新陈代谢和功能所必需的。 从化学性质上看,有些激su是酚类衍生物,如肾上腺素、甲状腺素等; 有些是多肽或蛋白质,如垂体激su释放因子、垂体激su、胰岛素、胰高血糖素、降钙素、甲状旁腺激su等; 有些是类固醇化合物,如雄激su、雌激su、肾上腺皮质激su等。许多激su制剂和合成产品在医药和畜牧业中有重要用途。荷尔蒙,希腊文“上升活动”的原意,在调节人体的新陈代谢、生长、发育、生殖、性、性欲和性活动等方面发挥着重要作用。激su是由高度分化的内分泌细胞合成并直接分泌到血液中的化学信息物质。 它们通过调节各种组织细胞的代谢活动来影响人体的生理活动。 内分泌腺或内分泌细胞分泌的高效生物活性物质在体内作为信使传递信息,调节机体生理过程的物质称为激su。它是我们生活中的重要物质。
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  • 在适合生化和细胞实验应用需求的同时还要能有一定的检测通量是许多药物开发和研究实验室所面临的一大挑战。多功能检测的平台通常可提供实验的灵活性,但是通量却被妥协了,特别是在一些需要整合转液的实验上尤为突出,例如钙流检测和其他快速动力学检测。为了解决这一问题,Molecular Devices推出了FlexStation 3多功能读板机系统,FlexStation 3把SpectraMax M5e和8道/16道的移液系统整合在一起成为体积小巧功能强大的读板机系统。该整合系统不但为用户提供了多功能检测平台,还增加了液体处理的通量和提升了检测生化和细胞动力学实验的灵活性。主要特点 ● 七种微孔板测读模式,四种快速动力学检测模式 ● 内置灵活的液体转移系统提供更多实验选择 ● 用户定义的移液方式简化实验优化过程中、高通量钙流、离子通道药物筛选应用领域FlexStation 3出众的光路、全自动加样方式,可大批量地读数并应用均相和非均相的生化和细胞微孔板检测。使用8道或16道的移液系统,应用范围可以拓展到快速光吸收、荧光和化学发光实验。而且自动化液体转移系统可以进行五种功能的大批量终点法和动力学实验。应用包括钙流检测、膜电位检测、心肌细胞跳动频率检测、双荧光素酶报告基因检测、如DNA、RNA及蛋白定量和纯度检测、ELISAs/酶学动力学检测、药物分解实验、细胞活力、细胞毒性、细胞增殖检测;Caspase-3/7和蛋白酶检测、CatchPoint cAMP/cGMP检测、色氨酸自发荧光检测、SNP分析、绿荧光蛋白检测、报告基因检测、ADME-Tox实验、细胞迁移、基于法国CisBio公司推出的HTRF原理的各种检测实验等。实验举例已知血小板为体积小,无细胞核的血细胞,其通过在血管损伤处聚集形成血栓来减少失血达到止血的作用。然而当血小板对血管损伤处理不当时就可能发生血栓性疾病,如心梗和缺血性中风等。血小板起初由胶原蛋白经糖蛋白VI受体(GPVI)激活,后经多种分泌出来靶向G蛋白偶联受体(GPCRs)的激动剂和血栓素A2进一步激活,这些GPCRs通过结合血小板中磷脂酶C(PLC)亚型引起钙离子从致密管道系统(Dense tubular system,DTS)释放到胞浆中。DTS中钙离子的消耗则会通过钙池调控的钙进入机制引发细胞外钙离子的涌入。由上述机制介导的胞浓度的上升是血小板所有功能,包括粘附、形状改变和聚集的基础。因此,深入了解不同的激动剂在正常和疾病情况下如何调控钙离子浓度的变化会协助我们进一步开发新的,更为安全的抗血栓药物。基于FlexStation 3酶标仪的方法可做到精确且快速的分析获得激动剂EC50和拮抗剂IC50值,并在人原代组织的基础上支持中等通量新药物筛选和发现。
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肾上腺素受体激动剂相关的试剂

肾上腺素受体激动剂相关的方案

  • 香港环球分析:超临界萃取用于提取牛肝中的β-agonists肾上腺素受体激动剂残留
    本文建立了用超临界萃取提取牛肝中的β-agonists兴奋剂的方法.此方法适用于不同的β-agonists激动剂类别.如:替代苯胺类(β肾上腺素受体激动剂clenbuterol)和酚类(β肾上腺素受体激动剂salbutamol).开发的实验采用超临界萃取和酶免疫测定技术,可以检测ppb级的激动剂的残留. 添加一定的甲醇改性剂和样品的除水对于极性比较强的salbutamol的萃取是必要的.实验结果表明了很好的回收率和低的误差.
  • 人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒
    人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒中文名称 人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒英文名称 A1A human adrenergic receptor (ADRA1A) ELISA Kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)抗原、生物素化的人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  • 人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)检测试剂盒
    人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)检测试剂盒人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)抗原、生物素化的人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度

肾上腺素受体激动剂相关的论坛

  • 鸡肉中的β-受体激动剂的检测

    鸡肉中的β-受体激动剂的检测

    β-受体激动剂是一类人工合成的肾上腺激动剂,俗称“瘦肉精”,在动物体内会提高其瘦肉率,但使用含有瘦肉精的肉类,将对人体造成极大伤害。我国相关法律法规规定禁止在生猪等食源性动物养殖过程中使用β-受体激动剂类药物。β-受体激动剂是一类化学合成的苯乙醇胺类衍生物,根据苯环上取代基的差异,可分为苯胺型和苯酚型。苯胺结构的化合物,轭合反应率和蛋白结合率低;苯酚结构的化合物轭合代谢过程较强,药物进入人或动物体内后,通过糖苷键结合参与代谢,转换为葡萄糖醛酸轭合物或硫酸轭合物。所以β-受体激动剂的检测通常需要酶水解步骤,β-葡萄糖醛酸酶是一种可以使葡糖醛酸苷键加水分解的酶,它可以把葡萄糖醛酸轭合物或硫酸轭合物的糖苷键切断,释放出游离态。目前,检测β-受体激动剂通常参照GB-T22286-2008方法,具体检测流程为:称量2g样品 — 加50μl酶水解12小时 - 添加内标物 - 振荡提取15min - 离心10min(5000r/min) - 移取4mL上清液加入0.1mol/L高氯酸溶液5mL,混合均匀 - 高氯酸调节PH值至1±0.3 - 离心10min(5000r/min) - 移取全部上清液至新的离心管中,用10mol/L的氢氧化钠溶液调PH至11 - 加入10 mL饱和氯化钠溶液和10 mL异丙醇-乙酸乙酯(6: 4)混合溶液,充分提取 - 离心10min(5000r/min)- 取全部有机液氮气吹干 - 加5 mL乙酸钠缓冲液(pH 5.2)复溶残渣 - 净化样品 - UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS检测。在β-受体激动剂检测过程中,酶水解是检测中的关键步骤之一,然而12小时的酶水解时间严重影响了工作效率,所以选择一种合适的酶,提高水解效率是需要解决的问题。目前,市场上的β-葡萄糖醛酸酶一般提取自鲍鱼,蜗牛,大肠杆菌,还有IMCSzyme生物工程改良的β-葡萄糖醛酸酶,相较其他同类产品,IMCSzyme活性、纯度得到显著提高。 IMCSzyme 不仅能缩短酶解反应时间、简化后期纯化步骤,其高纯度也大大降低了对检测仪器的干扰和损害。下面我们就用实验来验证IMCSzymeβ-葡萄糖醛酸酶的性能。参照GB-T22286-2008方法,做IMCSzyme β-葡萄糖醛酸酶与蜗牛β-葡萄糖醛酸酶对比实验。分别取沙丁胺醇和特布他林阳性鸡肉样品2 g,加入0.2 mol/L乙酸钠缓冲液(pH 5.2) 8 mL,蜗牛β-葡萄糖醛酸酶50 μL,37 ℃放置12 h;另取沙丁胺醇和特布他林阳性鸡肉样品各2 g,加入快速水解缓冲液(pH 7.4) 8 mL,IMCSzyme β-葡萄糖醛酸酶50 μL,37 ℃放置12 h;酶解反应后,样品前处理并净化,最后UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS检测。结果如图1所示,含沙丁胺醇和特布他林的阳性鸡肉样品经蜗牛β-葡萄糖醛酸酶酶解处理的测定结果分别为8.62 μg/L和9.66 μg/L;经IMCSzyme水解测定结果分别为10.7 μg/kg和13.17 μg/kg;结果表明,采用相同的酶用量和酶解时间,IMCSzyme对底物的水解效率高于蜗牛β-葡萄糖醛酸酶。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106041039356819_1444_2617624_3.png[/img][/align][align=center][color=black]图1 不同酶制剂水解效率的比较[/color][/align]采用IMCSzymeβ-葡萄糖醛酸酶水解样品,实验设计了2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h水解时间,考察水解效率。实验步骤:分别取含沙丁胺醇和特布他林阳性鸡肉样品2 g,加入快速水解缓冲液(pH 7.4) 8 mL,IMCSzyme β-葡萄糖醛酸酶50 μL,37 ℃分别放置2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h,酶解反应后,按照GB-T22286-2008方法进行处理并净化,UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS检测。结果如图2所示,由图表明沙丁胺醇、特布他林水解2h,水解产物逐渐增多;水解2-8h,水解产物变化不大,水解超过8h,水解产物开始降解。由此推断2小时已水解已基本完成。[align=center][img=,446,267]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/06/202106041041150241_6306_2617624_3.png!w446x267.jpg[/img][/align][align=center]图2 IMCSzyme不同时间水解效率对比[/align]综上述实验可得,使用[font=宋体]IMCSzyme[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]β-葡萄糖醛酸酶水解样品只需2小时就能水解完全,这大大的缩短了β-受体激动剂水解时间,提高了检测效率。[/font]

  • 受体激动剂检测

    最近看到一些文献:做动物组织中β-受体激动剂检测,前处理一般标准中都要做酶解,但是我看到的这些文献都不用酶解,直接用到盐酸或者碳酸钠之类,回收率做的不错。这算不算我们常说的酸解或者偏碱性的碱解啊。大家遇见过吗?这些前处理可行吗?

  • 肉中β-受体激动剂的问题

    我在做肉中β-受体激动剂时,参考的是SN-T1924-2011标准,我做的样品上机结果几乎都有被测组分,我怀疑有污染,如何排除,有没有好的建议

肾上腺素受体激动剂相关的资料

肾上腺素受体激动剂相关的资讯

  • Cell Reports | 阐释肾上腺素受体的多样性和配体的选择性——α 2型受体晶体结构解析
    人肾上腺素受体是G蛋白偶联受体,是重要的药物靶标。目前已知肾上腺素受体有三类(α1, α2和β)九种亚型(α1A, α1B, α1D, α2A, α2B, α2C, β1, β2和β3)。2007年,β2肾上腺素受体的非激活这是第一个人源G蛋白偶联受体的晶体结构,是G蛋白偶联受体结构解析的重大突破。2011年,β2肾上腺素受体和G蛋白的复合物结构获得解析,该工作获得了2012年诺贝尔化学奖。这些结构的解析极大地推动了人们对G蛋白偶联受体(特别是β肾上腺素受体)机理的理解。然而,三类肾上腺素受体偶联的G蛋白不同:α1, α2和β类分别偶联Gq、Gi和Gs。通过序列比对,也可以发现三类受体的配体结合口袋也有明显区别。对肾上腺素受体下游信号选择的多样性以及配体的亚型选择性的理解,一直受制于缺乏α类受体的三维精细结构。2019年12月3日,上海科技大学赵素文和钟桂生课题组在Cell Reports上共同发表两篇论文,报道了两个α类受体的三个晶体结构,阐释了肾上腺素受体多样性和配体特异性的机理。在“Structural Basis of the Diversity of Adrenergic Receptors”一文中,作者通过解析α2A受体与部分激动剂和抑制剂的复合物结构,辅助细胞信号实验和计算生物学,分析阐明了在肾上腺素受体家族中序列多样性是如何导致功能多样性的。α2A受体的两个结构整体非常相似,而配体结合口袋的多个残基(包括在肾上腺素受体中不保守的F4127.39)则发生了剧烈的构象变化。通过观察结构和突变实验,研究人员解释了影响配体选择性的重要氨基酸F4127.39的功能:F4127.39是配体结构口袋的“盖子”,它与口袋中的另外三个芳香氨基酸一起形成了一个芳香笼来结合配体中的正电基团,使配体结合时空间和能量效应俱佳。突变F4127.39会使α2A受体的完全激动剂和部分激动剂均丧失效力。α2A受体具有双重药理学效应:激动剂浓度较低时,α2A受体主要和Gi偶联;激动剂浓度较高时,与GS的偶联占据更主导的地位。相应地,在临床中,α2A受体部分激动剂的效果比完全激动剂要好,如用于降压的可乐定(Clonidine)和用于ICU镇静(在我国也广泛用于手术麻醉)的右美托咪定(Dexmedetomidine)都是α2A受体的部分激动剂。为了更好地理解α2A受体的部分激活性(partialagonism),研究人员对多个已知的α2A受体完全激动剂和部分激动剂进行了分子对接,他们发现可以用配体与Y3946.55形成氢键与否,来区分α2A受体的部分激动剂和完全激动剂。作者还发现了三个氨基酸(Y3946.55,I13934.51和K14434.56,第一个位于配体结合口袋,后两个位于G蛋白结合口袋)对α2A受体的G蛋白选择性具有重要作用。精心设计的三个突变体Y3946.55N,I13934.51A和K14434.56A,在细胞信号实验中对部分激动剂的刺激均表现出Gi通路的偏好性,而Gs通路的活性遭到削弱甚至完全被抑制。图1:α2A受体中对配体结合(紫色)和G蛋白通路偏好性(红色)起关键作用的残基而在“Molecular mechanism for ligand recognition and subtype selectivity of α2C adrenergic receptor”文章中,作者展示了α2C受体的三维结构,并通过分子对接、功能实验等手段揭示了α2亚型受体的结构特异性,为相关药物研发提供了分子基础。通过将α2C受体与α2A受体的结构进行对比和巧妙的嵌合体设计,作者发现α2C与α2A的结构主要差异存在于胞外域。在α2C受体口袋边沿,D206ECL2-R409ECL3-Y4056.58形成氢键-盐桥互作网络,特异地影响了α2C受体选择性拮抗剂JP1302和OPC-28326的作用。而在α2A受体口袋上方,由Y98ECL1、R187ECL2、E189ECL2和R4057.32形成的互作网络直接遮盖了部分入口,使得JP1302和OPC-28326这些较大的分子可能被阻挡在外。细胞信号实验结果也显示,破坏Y98ECL1-R187ECL2-E189ECL2-R4057.32互作网络并添加D206ECL2-R409ECL3-Y4056.58相互作用得到的α2A嵌合体对JP1302和OPC-28326有着很好响应。图2:α2CAR-RS79948复合物的结构和决定α2肾上腺素受体亚型选择性的胞外域这两篇文章很好地阐述了肾上腺素受体的多样性和α2受体的配体选择性,为基于精细三维结构的下一代α2受体药物开发奠定了基础。在这两篇论文中,均使用珀金埃尔默的EnVision微孔板检测仪对GPCR的cAMP实验进行定量测定。同时,在α2受体的配体结合实验中,珀金埃尔默提供了从放射性受体拮抗剂、耗材(UniFilter GF/B)到放射性微孔板检测仪MicroBeta的整体解决方案。珀金埃尔默为中国科学家药物研发加油助力。扫描下方二维码,或点击文末“阅读原文”,即可查看论文原文。
  • ACQUITY UPLC XevoTQ-S同时测定猪尿液中21种β-受体激动剂
    今年3月,瘦肉精事件引发全国拉网式排查,瘦肉精事件闹得沸沸扬扬,10年间瘦肉精屡禁不绝,添加瘦肉精喂出来的猪不仅颜色光亮,而且可以增加猪的瘦肉率,现在人们都关注身材,不吃肥腻的肉,这也导致饮食习惯吃瘦肉,而添加瘦肉精的猪肉正好符合当今人们的饮食习惯,瘦肉精事件一出大家都在徘徊这肉还吃不吃? 简介瘦肉精:一类动物用药的统称,任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前,能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂的药物。与传统瘦肉精盐酸克伦特罗同属“肾上腺受体激动剂”的莱克多巴胺等同类药物同样也能提高猪的瘦肉率。盐酸克伦特罗的检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、胶体金免疫层析法、高效液相色谱法、气质联用法及液质联用法。国家标准GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定中规定方法为气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法、酶联免疫法,其方法检出限均为0.5ug/kg。SN/T 1924—2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法采用LC/MS/MS法,该方法具有高灵敏度等优点被普遍使用。本文使用UPLC/XEVO TQ-S对猪尿液中的β-受体激动剂进行分析。实验方法UPLC条件LC系统: ACQUITY UPLC® 运行时间: 10min色谱柱: ACQUITY® BEH C18 1.7μm,2.1mm x 100mm流动相A: 0.1%甲酸水流动相B: 乙腈流速: 0.40mL/minMS条件MS系统: Xevo TQ-S离子模式: ESI+毛细管电压: 3.5kv源温度: 150℃雾化气温度: 500℃雾化气流速: 900L/hr锥孔气流速: 20 L/hrMRM条件:Quanpedia数据库Quanpedia是沃特世特有的一种可扩展和可搜索的数据库,为您提供LC/MS/MS定量方法信息,目前数据库已有超过1200种化合物,包括色谱方法、质谱方法、定量方法等,您可自由选择其中的任意化合物或化合物种类自动形成您所需的方法,无需再重新进行方法开发过程。下图为数据库得到的方法信息:自动生成MRM方法: 样品制备样品制备参照GB/T 22286-2008《动源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定》进行。■ 量取2.0mL猪尿液样品,加入8mL 0.2M的PH为5.2的乙酸钠缓冲液,充分混匀■ 加入50μLβ-Glucuronidase/aryl sulfatase混匀,于37℃水浴水解过夜■ 水解液振荡15min,在5000r/min条件下离心分离10min后,取4mL上清液中添加100uL 10ng/mL的内标溶液混匀,加入5mL 0.1M高氯酸混合均匀,并调节溶液PH值到1±0.3。以5000r/mim条件下离心分离10min后,移取上清液并用10M的氢氧化钠溶液调节PH值到11。■ 加入10mL饱和氯化钠溶液和10mL异丙醇-乙酸乙酯(6:4)混合溶液,离心分离后取有机相,在40℃水浴下用氮气将其吹干■ 提取残渣中加入5mL 0.2M乙酸钠缓冲液(PH5.2),超声混匀溶解残渣■ 样品净化(如下图所示),使用Oasis MCX(3cc/60mg)小柱■ 净化后的洗脱液用氮气吹干,用流动相溶解定容至1.0mL,过0.22μm滤膜,待进样分析 下图为数据库得到的方法信息: 固相提取净化过程Oasis MCX(3cc/60mg):实验结果与讨论本方法才用一次进样同时监测猪尿液样品中的21种β-受体激动剂进行检测,在灵敏度、分离度方面获得满意的结果。与常规的串联四极杆质谱仪不同的是,Xevo TQ-S为您提供最好的定量数据的同时,还为您提供高质量的光MS/MS信息。对猪尿液中含0.5ug/L的受体激动剂样品,启用PICs(子离子确认扫描)功能,可在不影响MRM定量的同时得到各化合物子离子扫描图,与标样子离子图进行匹配,对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。 结论本方法采用多离子反应监测(MRM)方式对21种β-受体激动剂进行检测,具有快速、准确、灵敏度高、分析周期短、适用范围广等优点。适用各类动物组织或动源性食品等的测定。IntelliStart技术可以使得开发分析方法过程变成流线型工作流程。这意味着需要更少的时间来开发方法,大大提高工作效率。强大的Quanpedia数据库包含上千种化合物的方法,自动生成方法文件让你轻松简单快速应对各种突发事件。PICs(子离子确认扫描)功能为您提供最好的定量数据的同时,还为您提供高质量的光谱MS/MS信息,对样品中阳性结果定性起到帮助判断的作用。关于沃特世公司 (www.waters.com)50多年来,沃特世公司(NYSE:WAT)通过提供实用和可持续的创新,使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步,从而为实验室相关机构创造了业务优势。作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者,沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。2010年沃特世拥有16.4亿美元的收入和5,400名员工,它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 联系人:张林海沃特世公司市场部86(21) 61562642lin_hai__zhang@waters.com 周瑞琳 (Grace Chow)泰信策略(PMC)020-83569288grace.chow@pmc.com.cn
  • 关注新型受体激动剂,吃肉更放心
    导 语社会各界对“瘦肉精”食品安全问题的关注,促使了β2-受体激动剂的检测技术得到了飞速发展,从而有效遏止了β2-受体激动剂在动物养殖中的非法使用。而α2-受体激动剂作为一种新型的具有促进生长及提高瘦肉率作用的药物也在逐步引起关注,且在饲料行业中已有非法添加使用的趋势。早在2010年,农业部1519号公告已明确把可乐定、赛庚啶等列入了农业部《禁止在饲料和动物饮水中使用的物质》清单。 什么是α2-受体激动剂 α2-受体受体激动剂对α2受体具有特异亲和性,主要用于治疗人类的高血压症。有研究表明,在饲料中添加0.5 mg/kg可乐定,能显著提高猪的瘦肉率,改善猪胴体组成,其它α2-受体激动剂也具有类似的作用。《GB 31650-2019 食品中兽药最大残留限量》规定,仅赛拉嗪可用于非产奶期的牛、马等动物,其他α2-受体激动剂均禁止用于畜禽养殖,且不得检出。《GB 31660.6-2019 动物性食品中5种α2-受体激动剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》食品安全国家标准,提供了替扎尼定、赛拉嗪、溴莫尼定、安普乐定和可乐定在猪、鸡肌肉及内脏中残留检测方法,该标准已于2020年4月1日正式实施。 岛津解决方案 实验部分 检测仪器本实验使用超高效液相色谱仪LC-40与三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统。 前处理方法参照《GB 31660.6-2019 动物性食品中5种α2-受体激动剂残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》标准,猪肉样品经用碳酸钠缓冲溶液、乙酸乙酯提取,SHIMSEN Styra MCX (岛津实验器材有限公司,P/N:380-00853-01)固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。 主要方法参数色谱柱:Shim-pack Velox C18(100 mm×2.1 mm I.D.., 1.8 μm, Shimadzu SGLC, P/N: 227-32010-04)流动相:A相-0.2%甲酸水溶液,B相-乙腈洗脱方式:梯度洗脱离子化模式:ESI(+) 分析结果 标准品色谱图5种α2-受体激动剂的标准品色谱图如下图所示。0.5 μg/L 标准样品色谱图(1替扎尼定,2赛拉嗪,3溴莫尼定,4安普乐定,5可乐定) 回收率考察在空白猪肉中添加标准溶液,加标浓度为2 μg/kg,平行测定3次,替扎尼定、赛拉嗪、溴莫尼定、安普乐定和可乐定回收率均在69.6%~91.8%之间,回收率完全满足标准要求。 实际样品分析某市售猪肉样品中分析结果如下图所示,未检出α2-受体激动剂残留。猪肉样品色谱图 小结使用岛津超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统,参考GB 31660.6-2019食品安全国家标准,建立了猪肉中替扎尼定等5种α2-受体激动剂测定方法,该方法灵敏度高,分析时间短,结果准确,可用于猪肉中α2-受体激动剂的快速检测。 岛津超快速三重四极杆液质联用仪
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