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机器是Syltech STI500机,柱子是Vertex C18柱,流动相是磷酸和甲醇;完全参考药典的梯度法完全看不到芦丁的主峰,就算是标准品也测不出芦丁的峰,换乙腈做流动相并用自己的梯度法就能做出来,但我们一定要用药典的方法去测芦丁的含量,怎么办呢?不知道大家有没有碰过这样的问题?药典的方法是不是很有代表性的?是不是所有机器都能按照它定义的方法测出含量来呢?
【作者】 刘元昀; 王志玲; 勾凌燕; 刘会敏; 王憬;【机构】 白求恩军医学院;【摘要】 研究槐角中芦丁和槐角苷含量与生长时间(采摘时间)的关系,确定不同应用目的槐角药材的最佳采摘时间。在2006~2008年的89、1、0月中旬分别采摘槐角样品,采用无水甲醇连续提取法提取槐角中的总黄酮,并用HPLC法测定提取物中芦丁和槐角苷含量。色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为无水甲醇-浓度1%冰醋酸-乙腈(30.4∶64.6∶5,V/V/V);流速为1.0 ml/min;检测波长为260 nm。8月中旬采摘的槐角中芦丁的含量最高,为(0.87±0.16)%8,月中旬以后采摘的槐角中芦丁的含量逐渐降低;槐角苷在9月中旬到10月中旬达到高峰期,含量分别为(5.76±0.22)%和(5.33±0.39)%,明显高于冬季含量。槐角中芦丁和槐角苷含量具有明显的季节变化规律,而冬季恰是槐角中芦丁和槐角苷含量最低的时期。根据槐角的不同用途选择合适的采摘时间,为科学利用现有槐角资源提供一定的理论依据。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207231719_379267_2379123_3.jpg
我做的是植物中芦丁、槲皮素、绿原酸的含量测定,请问一下分别得对照液及混合对照液是按怎样的比例配制的,还有流动相是如何确定的,谢谢。