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流动相流速影响分离度吗
液相流动相A、B相均由乙腈-甲醇-缓冲溶液组成,只是比例不一。但是配置得到的不同批次流动相,在分离目标体系(比较复杂)时,峰的分离结果不一90min的梯度洗脱程序,在50-55min区段内两峰理想时R=1.0,不理想时两峰共洗脱成一个峰。流动相配置时:为了减少批次间的差异,用容量瓶进行缓冲盐溶液的配置(缓冲体系是KH2PO4-H3PO4)每次调节pH前均会校准pH计量取乙腈、甲醇和缓冲盐时用同一量筒以确保比例的准确因为分离结果直接与不同批次有关,不存在同一批次的流动相分离结果有好有坏,所以应该不会是柱效的降低、流动相脱气不充分等问题想请问造成不同批次流动相下分离效果差异的原因还有哪些,出现这样的问题是不是说明缓冲体系的缓冲容量不够呢?应该怎么解决?Ps:Buffer: 10.2 g of monobasic potassium phosphate in a 1000-mL volumetric flask. Dissolve in 950 mL of water. While stirring, adjust with phosphoric acid to a pH of 3.1, and dilute with water to volume.Solution A: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:5:75)Solution B: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:30:50)
我用自制的磺化环糊精键和硅胶作为手性分离的填料,在选择流动相时,我看到不同文献,对不同的样品用的流动相都不一样选择流动相时,有什么注意的地方吗,或者一些规律?另外,看到《液相色谱手性分离》一书中提到用乙酸三乙胺(TAEE)缓冲液,加有机溶剂,但是好像没有乙酸三乙胺这种物质?