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各位大虾,有哪位有磷脂的脂肪测定的方法吗,不知道是否有磷脂脂肪测定这个项目???
[align=left][font='times new roman'][size=18px]磷脂的结构与[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]功能[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=16px]磷脂是一[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]种[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]脂类[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]物质[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],是植物和动物细胞中生物膜[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]组织的基本成分。它们同时是具有亲水性和亲脂性的两亲[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]性分子[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。如图所示,[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的分子结构[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]中[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]包含一个极性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]“[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]头[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]”[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]同时[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]连接着两个[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]有时只有一个[/size][/font][font='times new roman'][size=16px])[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]不同长度和不同饱和度的非极性链。一般对于极[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]头,磷酸基[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]酸性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px])[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]pKa≈0[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]~[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],胺基[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]胆碱、乙醇胺和丝氨酸的基本官能团[/size][/font][font='times new roman'][size=16px])[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]pKa≈9[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]~[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]11[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],羧基[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]如[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]R[/size][/font][font='times new roman'][sub][size=16px]1[/size][/sub][/font][font='times new roman'][size=16px]或[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]R[/size][/font][font='times new roman'][sub][size=16px]2[/size][/sub][/font][font='times new roman'][size=16px]=H[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的甘油磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px])[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]pKa≈3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]~[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]5[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。从图[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]中[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]可以看出,磷脂有许多亚类,根据[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]骨架[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的不同可分为两个亚群,鞘磷脂和甘油磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px];[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]其他亚[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]类[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]可以根据脂肪链的数量进行分类[/size][/font][font='宋体'][size=16px],例如溶血卵磷脂是一类只含有一个非极性尾部的磷脂,[/size][/font][font='宋体'][size=16px]要么在[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]sn-1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]位置[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1-[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]溶血[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]卵[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px])[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],要么在[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]sn-2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]位置[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2-[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]溶[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]血卵[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]);[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]还可以根据[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]修饰[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在磷酸基上的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]R[/size][/font][font='times new roman'][sub][size=16px]3[/size][/sub][/font][font='times new roman'][size=16px]基团来分类,最常见的磷脂是磷脂酰胆碱[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]([/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PC[/size][/font][font='times new roman'][size=16px])[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],占血浆磷脂总量的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]60[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]%[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]-70%[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。几种[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]常见磷脂及其亚类的分子结构[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]如图[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]所示。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012156432272_6764_5389809_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman']图[/font][font='times new roman']1 [/font][font='times new roman']磷脂分子的结构图[/font][/align][align=center][font='times new roman']Fig.1 Structural diagram of phospholipid molecules[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012156435665_2656_5389809_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman']图[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']常见磷脂及其亚类的分子结构[/font][font='times new roman'][sup][size=13px][4][/size][/sup][/font][/align][align=center][font='times new roman']Fig[/font][font='times new roman'].2 Molecular structure of common phospholipids and their subclasses[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]2 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px] [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]的[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]生理[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]功能[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=16px]磷脂是生命[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]基础物质,细胞膜中脂质含量高达[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]50%[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],其中大部分为磷脂。磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],如[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]卵磷脂、脑磷脂和肌醇磷脂等,分别对人体的不同器官起着[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]不同[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的生理作用。磷脂的三种主要生理功能分别是乳化作用、增殖作用和活化细胞作用。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂的乳化作用主要体现在对心脑血管疾病的防治上,例如[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]糖尿病和肥胖代谢综合征[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]研究表明[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂可以分解体内过高的血脂和胆固醇,使血管通畅,有[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]“[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]血管清道夫[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]”[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]之称。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂具有活化细胞的作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]——[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]线粒体存在于大多数细胞中,是由两层磷脂双分子膜包被的细胞器,它是哺乳动物细胞的动力源[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在细胞代谢、细胞凋亡、类固醇合成、信号转导等生理活动中发挥着关键作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],磷脂作为线粒体膜的主要成分,肩负着重要使命。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012156436790_9940_5389809_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman']图[/font][font='times new roman']3 [/font][font='times new roman']哺乳动物细胞线粒体(大鼠肝脏)膜的磷脂[/font][font='times new roman'][sup][size=13px][25][/size][/sup][/font][/align][align=center][font='times new roman']Fig[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']Phospholipids of the mitochondrial membranes in mammalian cells (rat liver)[/font][/align][font='times new roman'][size=16px]合理利用磷脂可以[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]防治疾病[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],而体内磷脂代谢失衡也会[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]致[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]疾病的发生[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。值得注意的是,有研究表明,人体内磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]代谢[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]与[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]多种[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]癌症密切相关。除此之外,磷脂[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]复合物[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]还被用于药物递送,包括经皮药物递送、细胞内药物递送、透皮贴片给药、眼部给药和中枢神经系统靶向给药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]等[/size][/font][font='times new roman'][size=16px],图[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]为鼻给药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]之[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]后,脂质纳米颗粒复合药物对中枢神经系统进行靶向治疗的可能途径。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]由于磷脂在生化和临床方面的重要性,需要快速和可靠的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]分离[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]分析方法来识别和定量生物样本中的磷脂。[/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308012156437338_2831_5389809_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman']图[/font][font='times new roman']4 [/font][font='times new roman']鼻给药后药物转运的可能途径示意图[/font][font='times new roman'][sup][size=13px][34][/size][/sup][/font][/align][align=center][font='times new roman']Fig.4 Possible routes of drug transport after nasal administration[/font][/align]
[align=left][font='times new roman'][size=16px]磷脂分离分析方法[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]及难点[/size][/font][/align]磷脂的极端复杂性和低丰度问题使其可靠的分离带来了一定的困难,进一步深入研究其生物学功能,磷脂仍然是一个重要研究目标。早期的磷脂分析方法常采用络合光度法和比色法对磷脂总量进行检测和质量分析,该方法不能实现单一组分的分析检测。近年来,薄层色谱法(TLC)、高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法(HPLC)和质谱法(MS)等新型分离分析技术用于磷脂的分离分析研究。TLC是最早应用于磷脂分离分析的一种方法,由于具有操作简便和样品处理量大等优势特点一直使用至今。TLC的主要缺点是其仅对同一类别的磷脂具有分离效果,无法对单一类别磷脂中分子种属进行分离分析。在TLC分析过程中,磷脂分子完全暴露在空气中,会导致部分不饱和脂肪酸氧化,使结果产生偏差。HPLC是近年来广泛采用的磷脂分离分析技术,这种分离分析技术能够实现对不同类别和种属关系磷脂的分离,进而对复杂磷脂具有很好的分离效果。在HPLC分离磷脂时,对于不同类的磷脂多采用正相色谱(NPLC);对于同一类不同种属关系的磷脂往往采用反相色谱(RPLC)进行分离。随着HPLC技术的不断发展,二维高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]在磷脂的分离分析中的优势越来越明显,可以通过色谱柱的选择对磷脂的分子类别和种属实现双重分离。例如,Zhang等建立了一种离线二维混合模式结合反相高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法分析复杂样品中脂质的方法。在第一维色谱中,按照中性脂类到极性脂类的洗脱顺序,22种不同的脂类可成功被硅胶色谱柱分离;在第二维色谱中,根据脂酰基链的长度和不饱和程度,采用反相C30色谱柱分离,从而进一步提高了分离效率。HPLC虽然是目前最常采用的磷脂分离技术,但对于磷脂的定性鉴别还存在较大的困难。HPLC与MS联用技术是目前磷脂鉴定最常用的技术,电喷雾电离技术(ESI)是磷脂质谱分析中最常用的离子源。HPLC-ESI-MS技术联用可以有效降低复杂样品中基质的干扰,提高磷脂的定性鉴别能力。例如,Kim等利用二醇基正相色谱柱建立了NPLC-ESI-MS定量和定性分析新方法,可从大鼠心脏和骨骼肌线粒体中检测到7类磷脂,包括PE、PC、PA、PI、PS、心磷脂(CL)和单溶血心磷脂(MLCL),并对除PS以外的所有磷脂进行定量分析,显示出良好的重现性和准确性。[align=left][font='times new roman'][size=16px]1.1.[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]磷脂分离分析的难点[/size][/font][/align]首先,磷脂在细胞功能中发挥着细胞屏障、信号传递和能量库等多种功能,细胞脂质非常复杂,有着数以百计的分子物种。细胞脂质在生命活动中也是高度动态的,细胞膜将细胞彼此分离,包围细胞器,并将细胞器细分成更小的隔间。以这种方式,细胞膜在细胞内产生了许多不同的环境,这些环境中发生着不同的生化反应,因此细胞脂质随着细胞所处的环境不断发生着变化。最后,磷脂分子具有多种多样的异构体,这进一步增加了磷脂分离鉴定的挑战性。如图所示,以PC([color=#000000]36:1[/color])为例介绍磷脂可能存在的异构体。PC存在的主要异构体形式包括sn位置同分异构体、双键位置异构体、双键顺反同分异构体和R/S手性对映体。此外,生物样品中磷脂成分复杂、种类多样且含量极低以及磷脂结构中很少存在易电离基团等特性使得磷脂的定量分析存在困难。利用衍生化技术对磷脂进行后修饰,可提高磷脂的离子化效率,使得定量分析效率提高。[align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211162152007402_7183_5389809_3.png[/img][/align][align=center][size=13px]图[/size][size=13px] [/size][size=13px]脂质分子异构体形式[/size][/align][align=center][/align]