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[align=center]浅谈生物安全柜操作规范[/align] 生物安全柜作为致病菌接种必备设备,在微生物检测中有着很重要的作用,为规范生物安全柜的操作,本文从人员、使用环境、设备操作流程及注意事项等几个方面进行阐述吗,使微生物检测人员能够正确使用生物安全柜。 首先微生物检测人员需进行生物安全柜的使用培训才能进行操作,未经授权人员不能使用。 其次使用环境条件建议安置在10,000洁净度以上环境安置,环境在温度 0~40℃、相对湿度不超过90%、无腐蚀性气体和通风良好的室内,远离高速尘源和震源。安全柜附近不得有超过安全柜正面吸入风速(0.5m/s)的气流。禁止在有人员频繁进出的场所、门和通道口处及空调送风口附近安装使用安全柜,以免空气干扰操作口及排气口气流。在安全柜周围应留有保养检修空间(至少应在两侧留出25cm,背面留出30cm)。 然后是仪器原理及操作流程:生物安全柜工作原理是空气由前窗操作口进入 负压风道与柜体内空气充分混合后,由风机送入静压箱,经高效过滤器过滤后以垂直层流的状态进入操作区,操作区左右及后部墙体均为负压风道,使工作区与外部环境形成气幕及箱体双层隔离。同时工作区被负压包围,保证样品不发生泄漏,操作区的气流由于风机的作用,通过负压风道与前窗操作口进入的空气混合后,其中部分混合气体(约70%)由风机送入静压箱循环使用,其余混合气体(约30%)经排风高效过滤器过滤后排出柜体。操作流程:生物安全柜玻璃门为手动操作,正常工作时玻璃门的开启高度200mm,如果超出表示高度时,声光报警系统启动,提醒用户玻璃门超高。注:当玻璃门开启时,紫外灯无法开启。[img=,690,457]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301343253_1757_3295053_3.png!w690x457.jpg[/img]生物安全柜电源为220V、50Hz,柜体后部方有接地标志,必须做到可靠接地后方可使用。接通电源后,通电进入待命状态。[img=,690,540]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301379361_1495_3295053_3.png!w690x540.jpg[/img](1)按下[img=,117,173]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301393874_6018_3295053_3.png!w117x173.jpg[/img][紫外灯控制键],开启紫外灯消毒30分钟后将紫外灯关闭。(注:此时玻璃门应是关闭状态)(2)打开玻璃门到标识处。(3)按下[img=,117,169]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301396123_5363_3295053_3.png!w117x169.jpg[/img][风机启动键],开启风机约30分钟左右,使操作区达到规定的洁净度。(4)按下[img=,125,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301398555_747_3295053_3.png!w125x175.jpg[/img][照明控制键],开启照明灯,操作人员方可进行工作。当检测人员完成工作后,应将仪器关闭,首先关闭风机、玻璃门,打开紫外灯消毒30分钟,以杀灭残留在安全柜内部的病菌。然后关闭紫外灯,打开玻璃门,清洁工作台面及集液槽。最后关闭电源。最后是注意事项和维护保养,注意事项:生物安全柜在使用中,前玻璃挡板应处于工作状态(开口20厘米)。生物安全柜中的器材和设备应减少至最少,在据工作区周边15cm范围内进行操作。(建议大型容器间应留有空隙)生物安全柜内不能使用本生灯,可用小型电子炉,建议使用无菌一次性接种环。工作前,操作者应调节椅子高度,确保自己的脸在前开口之上,手臂放入安全柜内约1分钟后,才能进行材料操作,操作者手臂不可频繁出入生物安全柜。决不能让实验记录簿、废塑料包装物,吸样器等堵住前格栅,所有操作都应在操作平面中部或后部据前格栅10厘米以内进行。尽量减少在操作者背后走动,房间内不应有产生干扰气流的设备,安全柜的正面不应对着经常开启的门窗。操作者的手臂不可频繁出入生物安全柜,否则会打乱气流破坏保护气幕。在生物安全柜内工作时可采取一些避免发生交叉污染的措施:开口的试管和瓶子不应垂直放置,操作者用培养皿和组织培养皿时应拿着盖遮其上方。(直立式吸管收集容器不应在生物安全柜内使用)瓶盖和试管帽操作完成后应尽快盖上。禁止在强辐射源(如非屏蔽的射频源)旁使用本设备。维护与保养:操作人员应严格按照说明书中的要求进行操作,且应有详细的当班工作记录备查。日常维护:运行安全柜,检查安全柜各部分功能是否正常运行。a.用清洁剂擦拭设备表面和操作区表面;b.用玻璃专用清洁剂清洁生物安全柜玻璃;c.对操作室进行消毒灭菌处理。(1)定期维护:每三个月对设备进行全面检查一次,认真维护保养。a.全面清洗设备,并消毒灭菌;b.检查各部件是否启闭灵活,各部分功能是否正常;c.检查高效过滤器网是否积尘,是否需要清洗。(2)生物安全柜的现场检测有下列情况之一时,应对生物安全柜进行现场检测:a.生物安全柜安装完毕,即将使用前;b.生物安全柜被移动位置后;c.对生物安全柜检修后;d.对生物安全柜更换高效过滤器后;e.生物安全柜一年一度的常规检测。综上,生物安全柜在使用过程中需要注意事项较多,很容易犯错的就是门开启过高,手频繁进出等,只有进行规范操作,才能够保证检测人员在进行检测工作中的人身安全,顺利的进行微生物检测作业。
生物安全柜对于广大的科研实验人员来说是非常熟悉的常规设备,但对其使用维护,特别是在特定条件下的彻底熏蒸消毒却不一定很了解,由于多方面方因,大多数实验室的生物安全柜自投入使用以后,甚至多年,也没有经过必要的的维护,有的甚至已经在不正常状态仍在使用。这给实验室生物安全留下了隐患,特别是在一些特定情况下,如使用3~5年后需要更换排风高效过滤器时,安全柜发生故障需要打开维修之前,生物安全柜受到严重污染时需要进行彻底的熏蒸消毒。 一般常用的熏蒸用消毒剂包括甲醛、过氧化氢、二氧化氯等,甲醛虽然成本最为低廉,但因其致癌作用已经越来越受到使用限制,而且做过甲醛熏蒸的人大多会头痛不已,因为要将整个安全柜用塑料布封闭起来、计算需要的消毒剂用量、布置生物指示剂、中和消毒剂、等待漫长的十几小时等,最担心的恐怕还是甲醛的泄漏,以及生物挑战实验的成败等安全问题。 现在有一种新的方法可完全代替传统的甲醛熏蒸,既采用过氧化氢蒸汽对生物安全柜进行消毒,通常发生器通过一个喷射接口与主舱体连接,已经有部分型号的安全柜提供此接口,同时有门封板将前面的操作口进行密封。如果这两个配置都没有的话,可以使用一个临时的门封板,并且已经预装好了合适的连接接口,将其安装在前面操作口上,通过门封上的接口将过氧化氢蒸汽喷入生物安全柜内。 通常蒸汽回路连接于安全柜排风过滤器的后面,当然确切的连接类型和位置取决于带消毒的生物安全柜的型号。在更换过滤器或对安全柜进行维护时,这种连接会推送过氧化氢蒸汽穿过安全柜的排风过滤器并将其彻底消毒。 只对主舱体进行消毒也是可行的,可以用于准备下一个实验前杀灭舱内及工作台下面的所有微生物,避免交叉污染。这种方案相比对主过滤器消毒循环时间变短,使用的过氧化氢也更少。 所有的生物安全柜都有或多或少的气体泄漏,为了确保过程的安全,过氧化氢发生器可以保持一个不大的负压状态,保证在灭菌过程中过氧化氢蒸汽不会从舱体泄漏到实验室。这个功能是在消毒前通过在门封板上安装连接一个小型压力控制管来获得。 下图所示为典型的生物安全柜消毒配置方法。http://www.bio-equip.com/imgatl/2011/201111816654.jpg对于三级生物安全柜可以将蒸汽通过安装好的传送舱口,通过小型供风高效过滤器喷射进舱内,由排气管连接返回的蒸汽形成闭合回路,将供气和排气过滤器一并消毒。 Bioquell甚至提供更为完整的解决方案,其Mircoflow系列的高级别生物安全或微生物实验用二级生物安全柜,根据BS5726 / EN12469标准设计制造,并通过应用微生物学研究中心CAMR的独立验证,提供操作者和样品最高级别的保护,在软硬件系统整合连接Bioquell Clarus系列过氧化氢蒸汽发生器,包括引入气体进入操作舱体并从排气高效过滤器的下游排出,充分灭菌工作舱及排气HEPA过滤器。 HPV技术简介过氧化氢蒸汽(HPV)消毒技术正迅速成为制药、生物技术和医疗卫生行业生物净化方法的选择,对与高压锅相同的生物指示剂-嗜热脂肪芽孢杆菌达到6-log的杀灭率。在试运行或停工期间可采用广泛的消毒产品和服务对设施进行生物净化。Bioquell采用专利的Clarus双循环技术合并PLC程控将灭菌循环的效果最佳化,当过氧化氢在房间或舱体的表面形成微冷凝时达到生物消毒,这个阶段可以在显微镜下看到一个肉眼不可见的亚微米级的过氧化氢薄层,科学研究证实这个低温、无残留的过程已经在蒸汽发生阶段开始杀灭微生物。微冷凝的形成确保形成了微生物杀灭的最佳条件,当达到凝露点时,减少一个对数级别(1-log)微生物的时间(D值)最短。从灭菌动力学曲线可以看到微生物的数量陡降,伴随着微冷凝的形成,生物指示剂数量曲线从舒缓变得急剧下降。在某些产业一个生物性洁净的环境是非常重要的,Bioquell的HPV技术相比其他消毒方法具有明显的优点。传统的消毒方法和消毒剂如甲醛熏蒸不仅冗长而且也非常危险,甲醛已经被世界卫生组织分类作为对人类致癌的物质,甲醛消毒在房间中通常推荐12小时接触时间,接下来是一个漫长的排气和通风过程(大约24小时)。相比之下,过氧化氢在房间的消毒循环可低至2小时,对于整个约8000m3的设施可以在短至24小时内完成。Bioquell的过氧化氢蒸汽(HPV)消毒过程是快速、无残留和安全的,生成产物只有水和氧气。HPV相比其他消毒剂也具有广泛的材料适应性,意味着对建筑物造成损坏的风险更小, 可作为设施的固定装置和设备。在生命科学和食品行业,HPV消毒过程是一个非常好的消毒方法,被主要监管机构所接受。如需要可提供一个完整的材料兼容性指南。对于影响生命科学、食品等行业的多种微生物,HPV消毒技术已经被证实具有广谱灭菌作用,如需要也可提供一个完整的消毒效果指南。Bioquell的消毒设备和服务可以为用户选择提供多种解决方案, 事实上Bioquell过氧化氢蒸汽发生器就像一台既可以自动也可以手动操作的高档单反相机,当您熟练掌握使用方法以后,可以自行开发更多不同的应用,为您的投资创造更大的价值。
生物安全柜对于广大的科研实验人员来说是非常熟悉的常规设备,但对其使用维护,特别是在特定条件下的彻底熏蒸消毒却不一定很了解,由于多方面方因,大多数实验室的生物安全柜自投入使用以后,甚至多年,也没有经过必要的的维护,有的甚至已经在不正常状态仍在使用。这给实验室生物安全留下了隐患,特别是在一些特定情况下,如使用3~5年后需要更换排风高效过滤器时,安全柜发生故障需要打开维修之前,生物安全柜受到严重污染时需要进行彻底的熏蒸消毒。 一般常用的熏蒸用消毒剂包括甲醛、过氧化氢、二氧化氯等,甲醛虽然成本最为低廉,但因其致癌作用已经越来越受到使用限制,而且做过甲醛熏蒸的人大多会头痛不已,因为要将整个安全柜用塑料布封闭起来、计算需要的消毒剂用量、布置生物指示剂、中和消毒剂、等待漫长的十几小时等,最担心的恐怕还是甲醛的泄漏,以及生物挑战实验的成败等安全问题。 现在有一种新的方法可完全代替传统的甲醛熏蒸,既采用过氧化氢蒸汽对生物安全柜进行消毒,通常发生器通过一个喷射接口与主舱体连接,已经有部分型号的安全柜提供此接口,同时有门封板将前面的操作口进行密封。如果这两个配置都没有的话,可以使用一个临时的门封板,并且已经预装好了合适的连接接口,将其安装在前面操作口上,通过门封上的接口将过氧化氢蒸汽喷入生物安全柜内。 通常蒸汽回路连接于安全柜排风过滤器的后面,当然确切的连接类型和位置取决于带消毒的生物安全柜的型号。在更换过滤器或对安全柜进行维护时,这种连接会推送过氧化氢蒸汽穿过安全柜的排风过滤器并将其彻底消毒。 只对主舱体进行消毒也是可行的,可以用于准备下一个实验前杀灭舱内及工作台下面的所有微生物,避免交叉污染。这种方案相比对主过滤器消毒循环时间变短,使用的过氧化氢也更少。 所有的生物安全柜都有或多或少的气体泄漏,为了确保过程的安全,过氧化氢发生器可以保持一个不大的负压状态,保证在灭菌过程中过氧化氢蒸汽不会从舱体泄漏到实验室。这个功能是在消毒前通过在门封板上安装连接一个小型压力控制管来获得。 下图所示为典型的生物安全柜消毒配置方法。http://www.bio-equip.com/imgatl/2011/201111816654.jpg对于三级生物安全柜可以将蒸汽通过安装好的传送舱口,通过小型供风高效过滤器喷射进舱内,由排气管连接返回的蒸汽形成闭合回路,将供气和排气过滤器一并消毒。 Bioquell甚至提供更为完整的解决方案,其Mircoflow系列的高级别生物安全或微生物实验用二级生物安全柜,根据BS5726 / EN12469标准设计制造,并通过应用微生物学研究中心CAMR的独立验证,提供操作者和样品最高级别的保护,在软硬件系统整合连接Bioquell Clarus系列过氧化氢蒸汽发生器,包括引入气体进入操作舱体并从排气高效过滤器的下游排出,充分灭菌工作舱及排气HEPA过滤器。 HPV技术简介过氧化氢蒸汽(HPV)消毒技术正迅速成为制药、生物技术和医疗卫生行业生物净化方法的选择,对与高压锅相同的生物指示剂-嗜热脂肪芽孢杆菌达到6-log的杀灭率。在试运行或停工期间可采用广泛的消毒产品和服务对设施进行生物净化。Bioquell采用专利的Clarus双循环技术合并PLC程控将灭菌循环的效果最佳化,当过氧化氢在房间或舱体的表面形成微冷凝时达到生物消毒,这个阶段可以在显微镜下看到一个肉眼不可见的亚微米级的过氧化氢薄层,科学研究证实这个低温、无残留的过程已经在蒸汽发生阶段开始杀灭微生物。微冷凝的形成确保形成了微生物杀灭的最佳条件,当达到凝露点时,减少一个对数级别(1-log)微生物的时间(D值)最短。从灭菌动力学曲线可以看到微生物的数量陡降,伴随着微冷凝的形成,生物指示剂数量曲线从舒缓变得急剧下降。在某些产业一个生物性洁净的环境是非常重要的,Bioquell的HPV技术相比其他消毒方法具有明显的优点。传统的消毒方法和消毒剂如甲醛熏蒸不仅冗长而且也非常危险,甲醛已经被世界卫生组织分类作为对人类致癌的物质,甲醛消毒在房间中通常推荐12小时接触时间,接下来是一个漫长的排气和通风过程(大约24小时)。相比之下,过氧化氢在房间的消毒循环可低至2小时,对于整个约8000m3的设施可以在短至24小时内完成。Bioquell的过氧化氢蒸汽(HPV)消毒过程是快速、无残留和安全的,生成产物只有水和氧气。HPV相比其他消毒剂也具有广泛的材料适应性,意味着对建筑物造成损坏的风险更小, 可作为设施的固定装置和设备。在生命科学和食品行业,HPV消毒过程是一个非常好的消毒方法,被主要监管机构所接受。如需要可提供一个完整的材料兼容性指南。对于影响生命科学、食品等行业的多种微生物,HPV消毒技术已经被证实具有广谱灭菌作用,如需要也可提供一个完整的消毒效果指南。Bioquell的消毒设备和服务可以为用户选择提供多种解决方案, 事实上Bioquell过氧化氢蒸汽发生器就像一台既可以自动也可以手动操作的高档单反相机,当您熟练掌握使用方法以后,可以自行开发更多不同的应用,为您的投资创造更大的价值。 来源:倍尔科技(深圳)有限公司