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[font=宋体]重组蛋白的表达(尤其是使用细菌载体和宿主)是一项成熟的技术。难点在于如何将其以活化形式分离。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重组蛋白的纯化是生物学研究中的重要技术。为了研究蛋白的特定功能和结构,研究人员必须将重组蛋白从生物体中分离并纯化。蛋白纯化方法主要利用不同重组蛋白之间的相似性和差异性。可以根据蛋白之间的相似性去除非蛋白物质,然后根据蛋白之间的差异分离纯化目标重组蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]是一种可以提高重组蛋白的溶解度、简化蛋白纯化的简单有效的工具,并通过简单的方法跟踪蛋白表达和纯化过程。此外,蛋白标签是追踪活细胞中蛋白和进程的一种有效工具,可以通过显微镜直接跟踪或者通过[/font][font=Calibri]Western blot[/font][font=宋体]、免疫沉淀或免疫染色间接进行跟踪。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]蛋白纯化的原理:[/b][/font][font=宋体]不同的重组蛋白具有不同的氨基酸序列和空间结构,导致其物理、化学和生物学特性存在差异。我们也可以根据目标蛋白与其他蛋白和裂解液的性质差异设计合理的蛋白纯化方案。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大多数的纯化方案需要不止一步才能达到理想的纯度水平。该过程中的每一步都会造成一定的产品损失,假设每一步的获得率为[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]。因此,建议尽可能减少纯化步骤。起始原料的选择是纯化过程设计的关键。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在背景信息、检测方法和样品规格都已到位的情况下,可以考虑采用三阶段纯化策略。纯化分为捕获、中度纯化和精细纯化三个阶段,每个阶段都有特定的目标。捕获阶段的目标是分离、浓缩和稳定目标产物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification]蛋白纯化[/url]操作步骤:[/b][/font][font=宋体]理想情况下,最终的纯化过程包括样品制备,其中包括在需要时进行萃取和澄清,然后进行上述捕获、中度纯化和精细纯化三个阶段的纯化。步骤的数量始终取决于所需的纯度和蛋白的预期用途。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供不同表达系统的蛋白纯化服务,有细菌系统蛋白纯化、哺乳动物瞬时系统蛋白纯化、杆状病毒系统蛋白纯化。详情可以参看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification[/font][/font]
一般来说,不同的组织或细胞中可能同时存在多种蛋白质,蛋白的含量也不尽相同,因此,若生物化学实验中要对某一特殊蛋白质进行研究,首先要选择合适的细胞来表达这蛋白,再对其进行蛋白分离纯化,蛋白纯化工作非常复杂,除了需要实验者的细致和耐心之外,还需要选择合适的纯化系统。最常被使用的是蛋白亲和层析法(affinity chromatography),一般分为以下步骤:1. 选择适合标签来标记目标蛋白2. 将目标蛋白温和的从原来的组织或细胞中以裂解出来,使其与适当的配体结合。3. 进行数次清洗,将其它杂蛋白移除。4. 将目标蛋白从配体上洗脱下来。实验步骤看似简便,但其中所需细致和精力只有参与实验的研究人员才能体会,您是否厌倦了蛋白纯化后的杂带?厌倦了为一个纯化流程调配多种不同的缓冲液溶剂?厌倦了为了后续实验需要在目标蛋白上接入多种标签?第三代Strep-tag系统:[b]「Strep-TactinXT:Twin-Strep-tag」[/b]蛋白纯化系统,能有效提升您目标蛋白的纯度,解决您实验中所遇到的常见问题。[img=,435,288]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704271044_01_3223241_3.png[/img][b]STREP-TACTINXT:目标蛋白纯度95%[/b]纯化出纯度极高的融合蛋白是Strep-tag系统的最主要特点,优于其他亲和纯化系统,如常见的His-tag。上图展现了STREP-TACTINXT的纯化程序,利用第三代Strep-tag系统仅需进行一次纯化程序,不需另使用其他纯化手续就可得到高纯度的目标蛋白。而新一代的Strep-tag系统,因Strep-TactinXT与Twin-Strep-tag的极佳亲和力,还可应用于变性条件下的纯化、批量纯化、高通量筛选等领域。[img=,602,378]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704271044_02_3223241_3.png[/img][b]STREP-TACTINXT:高效率的固定目标蛋白[/b]由于Strep-TactinXT与Twin-Strep-tag间的亲和力极佳,第三代Strep-tag系统能够高效率的固定目标蛋白,纯化后能直接将其固定在您所需的介面上,不需另外使用其他亲和标签!
[size=18px] 汉邦全自动蛋白纯化系统是公司自主研发的一款高效、快速、可靠的全自动蛋白纯化系统。可用于微克到克级水平的蛋白、多肽和核酸等生物分子的快速高效纯化。该系统采用模块化设计、配套智能化软件并结合公司的各类层析柱,可满足实验室各类生物大分子的纯化需求。它的模块化设计、智能化软件并结合汉邦科技的各类层析柱,可以满足实验室中各类生物大分子的纯化挑战! 欢迎来电咨询:18952338196 [img=,690,469]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205261525020323_4695_2788731_3.jpg!w690x469.jpg[/img][/size]