匀浆仪操作规程

薄层制板器标准操作规程目　　的：建立一个薄层制板器使用操作规程。适用范围：适用于药物定性或定量分析的薄层色谱法的制板。责　　任：使用薄层制板器检验人员对本规程实施负责，检验室主任对本规程的有效执行承担监督检查责任。程　　序：1. 薄层色谱用的玻璃板必须经过洗液浸泡，并清洗至不挂水珠，干燥备用。2.将层析板搁置于制板器主机上，将所需规格（10×10，10×20，20×5，20×10，20×20cm）玻璃板，水平放置于搁板上。最前面的引板和最后的尾板分别用同等厚度20×5和20×6.3或10×5和10×6.3cm玻璃板。检查玻璃板之间是否水平，厚度不一致要更换成厚度一致的玻璃板。3.吸附剂调配。3.1粘合剂的配制，根据薄层板的用途配制适宜浓度的粘合剂。3.1.1称取0.2或0.3克羧甲基纤维素钠，置于100ml纯化水中，用玻璃棒搅拌，并加热煮沸至溶解。放冷，经四层纱布滤过。如果制含量测定之薄层板，为了减少气泡的影响，使用前先煮沸放冷再用。3.2按附表量取适当的溶液倒入匀浆筒内。3.3按比例称量吸附剂（用于定量分析时先过7号筛）加入匀浆筒内。3.4用玻棒将吸附剂与粘合剂在匀浆筒内搅匀。3.5将电源线两插针插入搅拌螺旋头上，再插上电源插头，螺旋桨动作，将螺旋桨从匀浆筒液面移至底部，使头部盖在筒上，然后放置混合2—3分钟即可。3.6匀浆结束，先拨取电源插头，再拨取插针，取出螺旋桨，即可倒入匀浆槽开始制板。4.制板4.1用所需厚度刮板装于供浆槽口内，将匀好的吸附剂浆液，倒入供浆槽内，即时将开关板至ON位置，制板自动开始，制板完毕自动停止，然后将开关置OFF位置。若进行第二架制板，可将制好的板连搁板架一起移至平稳的地方晾干，安上第二架搁板，按上述操作即可。4.2取下供浆槽及刮棉线清洗并擦干净，备用。5.附表：吸附剂用量粘合剂用量浆液量刮板厚度干板厚度16g　48ml　55ml0.3mm0.15mm20g58ml73ml0.4mm0.20mm26g74ml92ml0.5mm0.25mm32g92ml110ml0.6mm0.30mm6. 每次使用后，填写使用登记。7.注意事项：薄层制板的质量好坏，与浆液的混合方法和浆[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量有密切关系，应注意以下情况。7.1匀浆器使用前，要清洗干净，小心避免带入杂物。7.2匀浆器开始后，容器内壁上粘附的粉末要用浆液带下去充分混合。7.3匀浆器使用和清洁过程中，注意避免浆液及水从螺旋轴倒流入螺旋桨上部电机中。7.4层析玻璃板可选任意厚度（1—4mm），但必须均匀性好，平整度高的玻璃板。接头处缝隙越小越好。

总RNA分离纯化标准操作规程(SOP)3. 关键词：RNA 分离 纯化4. 目的：建立总RNA分离纯化的操作规程，以保证制备RNA的质量和效率。5. 主体内容：5.1主要仪器研钵，恒温水浴，旋涡振荡器，冷冻台式高速离心机，超低温冰箱，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。5.2试剂1．Trizol试剂（购自Invitrogen公司）2．焦碳酸二乙酯(DEPC)3．氯仿（新开封）4．异丙醇（新开封）5．无RNase灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（250℃ 3小时）装蒸馏水，然后加入0.1%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高压灭菌。6．75%乙醇：用DEPC处理后的水配制75%乙醇，（用高温灭菌器皿配制），然后装入高温烘烤的玻璃瓶中，存放于4℃冰箱。 5.3 相关器皿的预处理1．塑料制品的处理尽可能使用无菌，一次性塑料制品，已经标明RNase-Free的塑料制品，如果没有开封使用过通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理步骤如下：1）在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使其终浓度为0.1%。注意：DEPC为剧毒物质，活性很强，应在通风橱中小心使用。2）将需要处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC水溶液，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中。3）在通分橱中室温处理过夜。4）将DEPC水溶液小心倒入废液瓶中，用铝箔封住含有已用DEPC水处理过的塑料制品的容器，高温高压蒸汽灭菌至少30 min。5）在烘箱中用合适的温度烘烤至干燥。置于干净处备用。2．玻璃和金属制品先用去离子水将器皿清洗干净，晾干，用铝箔包好，然后至烘箱中250℃烘烤3 小时以上。5.4 操作步骤第一部分 匀浆A 从组织中提取总RNA、1）液氮研磨：组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按照每50~100mg组织加入1ml Trizol，转入离心管进行下步操作。2）匀浆：用电动匀浆器充分匀浆1~2min。注意，组织样品体积不能超过Trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好。B 从培养细胞中提取总RNA1）粘壁培养细胞：不需蛋白酶消化，先将培养基去除，然后直接将Trizol加入到培养瓶中消化、裂解细胞，Trizol体积按10cm2/ml的比例加入。2）悬浮培养细胞：直接离心收集细胞后用Trizol重悬、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106个动物、植物或酵母细胞，或1×107个细菌细胞。注意，在加入Trizol之前不能用其他缓冲液洗涤细胞，那样会增加mRNA降解的可能性。另外，在裂解酵母或细菌细胞时可以借助匀浆器。第二部分 相分离1．匀浆组织加入Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注意：此时可以放入-70℃长期保存。[

我们实验室的仪器现在都是将仪器简介挂在墙上，然后将操作规程和点检表放在仪器旁边，不知道这么是否合适。是否放在抽屉里会更好？或者直接将操作规程上墙？大家一般都是如何放置的？