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仪器: LC-100高效液相色谱仪色谱柱: SHOEDEX C18-120-5, 4.6*250mm, 5um流动相: 甲醇 流速: 1mL/min检测波长:326nm;7.5min后264nm,10.5min后285nm进样量: 10uL柱温: 28℃ http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110949_549816_1635904_3.png 按照出峰顺序依次为 VA, VD3, VE注意事项:维生素A乙酸酯需保存在棕色瓶中,溶液配好后尽快检测 VA,1微克/毫升;VD3,5微克/毫升;VE,0.1微克/毫升
维生素A、维生素D(D2和D3)和维生素E是机体维持正常代谢和机能必需的脂溶性维生素。维生素A具有促进机体生长、维持表皮完整、生殖、骨骼及视觉等功能;维生素D(主要包括D2和D3),它们对哺乳动物有促进钙磷代谢及成骨作用;维生素E又称为生育酚,具有促进生育、抗衰老的作用。由于这3种维生素在外界环境中不稳定,很容易受光、氧等影响而被氧化破坏,因此科研工作者一直在努力寻找合适的测定方法来得到准确、重现性好的结果。 迪马科技用户采用超高效液相色谱法,DAD检测器成功实现维生素A、D、E的分离、测定,具有分析时间短,分析结果准确,重现性好的特点。UPLC色谱分析条件*:色谱柱:Endeavorsil C18 50 × 2.1 mm, 1.8 μm(Cat.#.:87002)流动相:A:20 mmol/L三乙胺水溶液,B:甲醇 A:B=4:96流速:0.3 mL/min柱温:35 ℃检测器:DADhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304181555_435961_708_3.jpg维生素A、E色谱图*以上实验数据来源于北京市疾病预防控制中心http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304181557_435963_708_3.jpg维生素D色谱图*以上实验数据来源于北京市疾病预防控制中心UPLC法检测维生素A、D、E相关产品信息:货号名称规格样品前处理37177针头式过滤器 Nylon[size=16p
[b][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体]维生素主要分为水溶性维生素和脂溶性维生素两大类,基本都可以用液相色谱法检测,下面分别进行介绍。[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])水溶性维生素的检测[/font][font=宋体]由于水溶性维生素(主要是[/font]B[font=宋体]族维生素和维生素[/font]C[font=宋体])易溶于水,极性较强,很难直接在如[/font]C[sub]18[/sub][font=宋体]等反相柱上保留。因此该类物质分析一般有两种方式:一是用含[/font]NH[sub]2[/sub][font=宋体]等极性键合相的正相色谱柱,如图[/font]6-24[font=宋体]的[/font]HILLIC[font=宋体]模式;二是在反相色谱(如[/font]C[sub]18[/sub][font=宋体]、[/font]C[sub]8[/sub][font=宋体]等)流动相中添加离子对缓冲试剂(如[/font]Na[sub]3[/sub]PO[sub]4[/sub][font=宋体]、[/font]KH[sub]2[/sub]PO[sub]4[/sub][font=宋体]、己烷磺酸盐等)增加其保留时间,见图[/font]6-25[font=宋体]。[/font][align=center][img=,465,269]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103231425192145_3285_3389662_3.jpg!w465x269.jpg[/img][/align][align=center][i][font=宋体]图[/font]6-24 HILIC[font=宋体]模式色谱柱分离水溶性维生素的色谱图[/font][/i][/align][align=center][i]1—[font=宋体]烟酰胺;[/font]2—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]7[/sub][font=宋体];[/font]3—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]6[/sub][font=宋体];[/font]4—[font=宋体]维生素[/font]C[font=宋体];[/font]5—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]12[/sub][font=宋体];[/font]6—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]1[/sub][/i][/align][align=center][img=,428,242]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103231425367458_9741_3389662_3.jpg!w428x242.jpg[/img][/align][align=center][i][font=宋体]图[/font]6-25 C18[font=宋体]柱分离水溶性维生素色谱图[/font][/i][/align][align=center][i]1—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]1[/sub][font=宋体];[/font]2—[font=宋体]维生素[/font]C[font=宋体];[/font]3—[font=宋体]烟酸;[/font]4—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]6[/sub][font=宋体];[/font]5—[font=宋体]泛酸;[/font]6—[font=宋体]叶酸;[/font]7—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]12[/sub][font=宋体];[/font]8—[font=宋体]维生素[/font]B[sub]2[/sub][/i][/align][font=宋体]([/font]2[font=宋体])脂溶性维生素的[/font]HPLC[font=宋体]检测[/font][font=宋体]脂溶性维生素(维生素[/font]A[font=宋体]、[/font]D[font=宋体]、[/font]E[font=宋体]等)极性较弱,可以直接用[/font]C[sub]18[/sub][font=宋体]、[/font]C[sub]8[/sub][font=宋体]等反相色谱柱分离。需要注意的是,维生素[/font]E[font=宋体](生育酚)共有[/font]α[font=宋体]、[/font]β[font=宋体]、[/font]γ[font=宋体]、[/font]δ[font=宋体]四种结构类型,[/font]C[sub]18[/sub][font=宋体]等反相柱很难将这四种完全分开,而硅胶、二醇基([/font]Diol[font=宋体])等正相柱能很好地分离这四种结构,见图[/font]6-26[font=宋体]。[/font][align=center][img=,403,187]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103231425477785_8072_3389662_3.jpg!w403x187.jpg[/img][/align][align=center][i][font=宋体]图[/font]6-26[font=宋体]维生素[/font]E[font=宋体]在二醇基色谱柱上的色谱图[/font][/i][/align][align=center][i]1—α-[font=宋体]维生素[/font]E[font=宋体];[/font]2—β-[font=宋体]维生素[/font]E[font=宋体];[/font]3—γ-[font=宋体]维生素[/font]E[font=宋体];[/font]4—δ-[font=宋体]维生素[/font]E[/i][/align][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]