生物安全柜操作规程

[font=幼圆][size=14px]生物安全柜不仅可以保护样品也可以保护操作者，所以才被成为“安全”柜。是一种负压过滤排风柜，用于生物安全实验室和其他实验室的生物安全防护，可以防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶；对操作人员、样品及样品间交叉污染和环境提供安全保护。[/size][/font][font=幼圆][size=14px]随着科学技术的发展和人们对生物安全意识的提高，生物安全柜在实验室、医院及研究单位的应用日益广泛，但是在人们在观念里认为是最简单的排风设备，选型、安装、使用等方面中存在很多问题和误区，给生物安全防护、避免实验室感染带来极大的隐患。[/size][/font][font=幼圆][size=14px] [/size][/font][size=14px][color=#007aaa][b][font=幼圆]误区一：洁净工作台代替生物安全柜[/font][/b][/color][/size][font=幼圆][size=14px]目前有很多医院在大量使用医用洁净工作台，很多操作人员认为这两种设备外形相同，作用大同小异，并认为他们操作的样本都是普通的样本，不具有高致病性。其实，生物安全柜和洁净工作台具有本质的差别，洁净工作台将通过高效过滤器的净化空气向下吹过工作区，用来保护样品，由于工作区是正压区，气流通过操作窗口外溢，只保护样品，而对操作人员和环境不提供保护，如操作含有任何已知或潜在致病气溶胶，都会给操作人员带来极大隐患。[/size][/font][font=幼圆][size=14px]生物安全柜是一种负压净化工作台，可以防止操作者和环境暴露于实验室过程中产生的有害气溶胶，是传染性微生物的牢笼，正确地操作生物安全柜，能够完全保护操作人员、样品、工作环境。因此，医院临床检验、诊断、病理分析、肿瘤药物的配制等工作及相关生物医学研究所、实验室都应使用生物安全柜。[/size][/font][font=幼圆][size=14px]同时，为了安全起见，各医疗单位及相关实验室应重新对实验室微生物危险度进行评估，如有潜在危险，应及时替换原有洁净工作台，并根据需要选配生物安全柜。[/size][/font][font=幼圆][size=14px] [/size][/font][size=14px][b][font=幼圆][color=#007aaa]误区二：超前化 [/color][/font][/b][/size][font=幼圆][size=14px]生物安全柜选型不当，根据结构设计、排风比例和保护对象和程度不同，生物安全柜分为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级，其中Ⅱ级又分为A2、B2型。不同级别的生物安全实验室应选用不同级别的生物安全柜，也可根据要保护、防护的不同类型来选择适当的安全柜。在操作少量挥发性化学试剂或放射性核素时，可选择Ⅱ级B2型生物安全柜；操作大量挥发性化学试剂或放射性核素时，必须使用Ⅱ级B2型生物安全柜。目前全世界应用最广的是Ⅱ级A2型安全柜，它能够满足医院的一般用途，另外，从节能角度也较为经济。在实际工作中，很多单位认为设备选型应具有一定的超前性，常常在A2型能满足应用的情况下选用B2型，造成问题很多。安全柜的选择应主要从安全柜的性能考虑，如高效过滤器、风路设计、报警装置、负压保护等指标比较安全柜的优略。[/size][/font][font=幼圆][size=14px] [/size][/font][size=14px][b][font=幼圆][color=#007aaa]误区三：安全柜安装问题多多[/color][/font][/b][/size][font=幼圆][size=14px]现有实验室购置安全柜，一般在房间腾出一小块空地安放，存在问题很多，安装位置不当，会造成污染。生物安全柜两侧、后侧应留30cm，顶部留出足够30~34cm的空间；为减少气流扰动，保证安全柜正常工作，生物安全柜应放置在远离实验室入口、门窗、暖气、走道，避开送风口，避免外界气流对柜内气流造成扰动。生物安区柜放置的房间必须有足够的送风量，Ⅱ级A2排气量约在700~1200m3/h，B2则在1000~1600 m3/h,有的型号更高，如果没有足够的补充送风，生物安全柜所在房间成为高负压状态，生物安全柜无法正常工作。很多实验室购置Ⅱ级A2生物安全柜后，认为排风管道接到室外比排到室内安全。其实，生物安全柜排风出口带有高效过滤器，所排出的气体被证明是安全的，对室内环境没有影响；另外，将室内舒适工作环境的洁净空气排到室外会大大增加运行成本，因此，除了操作危险度较高的实验对象或能产生化学气味的化学试剂，Ⅱ级A2生物安全柜排风排到室内是安全可行的。[/size][/font][font=幼圆][size=14px]Ⅱ级A2型生物安全柜采用硬连接，这种连接方式以前被广泛使用，A2型生物安全柜使用密闭硬管连接到带抽风机的排风系统时，其安全运行完全依赖于排风系统，如当排风的速度升高或降低，生物安全柜内不平衡发生变化，会产生污染环境、样品的严重后果。在美国NSF49:2002标准中禁止Ⅱ级A2生物安全柜使用密闭硬管连接。如果Ⅱ级A2安全柜外排气体时，建议排风管采用套管连接，套管安装在生物安全柜的排风管上，与安全柜高效过滤器之间保留2.5cm的缝隙，以便让房间的空气也能吸入到建筑物的排风系统中，这种连接方式是最安全的连接方式，柜内的气流平衡独立与排风系统，无论排风系统如何波动柜内气流平衡都不会受到影响。Ⅱ级B2必须通过硬管连接，密封地连接到排风系统上，排风系统的排风量和静压必须与安全柜制定要求一致。在安装有多台Ⅱ级B型生物安全柜时，应各自使用独立的排风管道，不能共用排风管道。[/size][/font][font=幼圆][size=14px] [/size][/font][size=14px][color=#007aaa][b][font=幼圆]误区四：有生物安全柜，就一切“OK”了[/font][/b][/color][/size][font=幼圆][size=14px]安全柜的使用和局限应向每个操作者说明，严格按要求操作，如使用提前开机“自净”、柜内物品的摆放合理、定期保养验证等。当操作失误或发生泄漏、破损时，生物安全柜不能够保护操作者。生物安全柜前的空气幕很脆弱，极易受到干扰而造成污染。实验中不能随意开启前窗的位置，操作动作缓和，手臂避免频繁出入安全柜，以防止打扰气流。在安全柜工作时，开关房门、人员在房间内走动、甚至在操作人员背后咳嗽等都会形成湍流而增加微生物气溶胶溢出量，而造成实验室污染。国外学者Oster曾报道，工作人员在安全柜内用吸管吸取立克次体悬液，另外一人在柜旁与之谈话14分钟后即感染发病。有很多污染事件是因为实验人员违反操作规程、注意力不集中、操作动作不稳定、操作方法或器材不当所致。[/size][/font][font=幼圆][size=14px] [/size][/font][font=幼圆][size=14px]因此，操作人员必须牢固树立安全意识，养成良好操作习惯，杜绝违规操作，严格遵照微生物学标准操作规程和生物安全实验室操作规程，并使用规范的实验器材。个人防护是防止实验室气溶胶感染的最后一道防护，通常由物理防护和疫苗免疫两种，物理防护主要是对呼吸道和眼睛的防护，如防风镜、口罩、防护面罩、正压头盔和正压工作服等。生物安全柜投入使用后，其管理是一项重要的工作，也是一项薄弱的环节，由于设备人员、实验人员责任界限不清，疏于管理，给实验室安全带来极大隐患，必须建立科学的管理制度，严格执行，责任落实到人，并进行监督，确保实验室安全。[/size][/font][b]转载自实验室设计与建设平台，仅供参考，侵权必删[/b]

[align=center] [/align] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]作为生物安全实验室的一级屏障，生物安全柜是科研或医疗实验室中重要的硬件装备，为了让实验室人员规范使用生物安全柜，现归纳出以下注意事项，希望大家在实际操作中尽可能规避风险。 生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的，在使用时一定要遵从其标准操作规程。 但是您真的用对了方法吗？总结归纳出以下安全柜日常操作注意事项。 1、注意分区 在日常操作过程中，安全柜内部应分为3个区，依次为洁净区、工作区、污染区。洁净区用于摆放吸头盒、培养基等必要物品；工作区用于无菌操作；废弃吸头等弃于位于污染区的垃圾盒内。（如图1所示）。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img=,341,266]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190500harmfcxacwyxdffa.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]图1、安全柜内部分区 2、注意进气格栅 安全柜的进气格栅通常位于操作台前方，在操作时应尽量避免衣袖遮挡进气格栅干扰安全柜的安全气流，从而带来安全隐患。如图2所示：左边是非正确操作-----操作人员手臂和实验物品挡住了格栅；右边为正确操作-----安全柜搁手架高于操作台面，操作人员手臂避免了遮挡进气格栅。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190600xm98jg8j4jjzmq74.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 3、勿放置过多物品 安全柜的操作台除了前面有进气格栅，后面也有格栅。如果在操作过程中放置的物品遮挡住后格栅，也会影响安全气流，给操作带来安全隐患。如图3所示。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190616i51m8sujus4xz43r.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 图3、物品遮住操作台后方格栅 4、保持操作台面下方清洁 建议定期将安全柜操作台面提起，清理台面下方区域，保持该区域清洁。如图4 所示为非正确操作-----台面下方的污物易造成样品污染。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190636bcaechra818fxz8m.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 5、正确使用紫外灯 紫外灯杀菌的特点是快速、方便、易遮挡。因此，在使用紫外灯照射工作台时应保证内部干净无遮挡物品。如图5所示为非正确操作。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190709g0a7illvg07iggg6.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 图5、安全柜内放置大量物品 6、安全柜内勿使用酒精灯 正规合格的安全柜无需酒精灯即可进行无菌操作。点燃酒精灯还有可能干扰安全柜内的安全气流，使用不当还可能造成核心部件如超高效过滤器损坏，因此不建议在安全柜内使用酒精灯。如图6所示，超高效滤器被破坏。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190727tprus03zk0063pvo.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 图6、被破坏的ULPA滤器 7、超净工作台≠生物安全柜 超净工作台不等同于生物安全柜，超净工作台只保护工作区的样品免受外来污染，适用于需要局部洁净无菌工作环境的试验操作。生物安全柜可以为人员，样品提供双重保护，是一种能防止实验操作处理过程中含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的安全防护设备。 8、进行特殊材料操作的注意事项 在处理特殊材料操作，例如，有毒，易燃，易爆等材料之前，应当由专业的生物安全专员或工程师来确定生物安全柜是否适用于您的应用需求。 9、正确选择生物安全柜的放置地点 安全柜应当尽量远离外部气流干扰因素，例如门窗、空调通风口、人员过道以及其他实验室气流干扰设备（如同房间的其他生物安全柜、通风橱或者超净工作台等）。 10、安全柜警报响起时请勿继续操作 当安全柜的警报系统触发时，请立即停止手上的工作，并联系专业的工程师。 11、 请勿在生物安全柜内摆放过多物品 安全柜的工作区域内严禁堆积过多的物品，以免影响安全柜本身的气流和安全性能。 12、避免对气流屏障的干扰 请遵循缓慢移动原则，操作时手臂应尽量水平缓慢移动，以避免影响正常的气流状态。避免垂直和过快移动造成污染物外泄。 13、安全柜自净周期 开启安全柜时，让安全柜先自主运行3-15分钟，来达到气流的稳定和净化操作区的空气以达到相应的洁净度级别。然后操作者再进行相关的实验操作即可。 14、正确的生物安全柜工作高度 请确保安全柜在工作时前窗处于规定的安全高度。 15、在安全区域内进行操作 切勿阻塞安全柜前窗处的进气格栅和工作腔内的空气回流孔。尽量在工作区的中心部位进行操作。 16、安全柜安全分区原则 生物安全柜的工作区应该从左往右或者从右到左被依次划分为三个区域：清洁区、操作区和污染区。而实验供给品应放置在洁净区内；实验仪器和样品应放置在操作区域；废弃物应放置在污染区内。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190813x3cb333gwy65gw5a.jpg.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 17、确保生物安全柜连续使用 安全柜尽量不关机连续不间断使用，确保气流屏障的持续稳定，以避免污染物的外泄。 18、日常维护灭菌 紫外灯灭菌无法代替安全柜的日常表面除菌。因此在安全柜使用前后，请按照程序为安全柜进行表面除菌。可用75%酒精擦拭表面，注意不能用含氯消毒剂，因为会腐蚀不锈钢。 19、正确着装为操作提供必要保护 当进行高危险性操作，如在BSL-3和BSL-4实验室防护等级，要进行三级个人防护，应选用医用防护口罩或N95口罩、双层乳胶手套、面屏、护目镜、医用防护服、防水靴套、双层医用防护帽。必要时双层口罩（外医用防护口罩，N95）。 20、生物安全柜必须进行年度认证 根据国际和中国相关生物安全实验室和生物安全柜标准，安全柜在移位、更换过滤器或内部维修后，都需要进行性能认证检测，而认证检测需要至少每年一次。[/color][/size][/font]