Lambda(λ )DNA的紫外分光光度法分析
脱氧核糖核酸即DNA,其在特定波长范围内具有吸光性,因此实验室常使用紫外分光光度计定量分析核酸的浓度和纯度。通常在260 nm波长下,吸光度显示为1时,表示双链DNA(dsDNA)为50 μg,单链DNA(ssDNA)为33 μg,RNA为40 μg。由此,我们可以根据260 nm下的吸光度计算DNA浓度。另外,蛋白质的吸收峰波长是280 nm。因此,可计算出DNA(260 nm处)与蛋白质(280 nm处)的吸光度比值,并将该比值除以预期值,从而判断DNA的纯度。应用数据测定条件仪器:U-5100紫外可见分光光度计测量波长范围:230~330nm响应:低速样品Lambda (λ) DNA(日本基因株式会社)TE缓冲液附件单样品池支架Eppendorf公司的微量样品池测量结果 图1 Lambda (λ) DNA的标准曲线图图2 Lambda (λ) DNA的吸收光谱如图所示,根据吸光度测定结果绘制了Lambda (λ) DNA在2~60 ng/μL范围内的曲线图,结果显示相关系数R2=0.999,数据良好。其中Lambda (λ) DNA浓度在30 ng/μ L时,吸光度比(A260/A280)为1.96。根据吸光度比≥1.8时表示为高纯度,因此本样品的纯度较高。总结紫外分光光度法定量分析DNA,操作简单,测量速度快,在核酸定量中使用频率高。日立紫外可见分光光度计U-5100采用轻巧紧凑的设计,搭配长寿命光源和双光束系统,为DNA 分析提供可靠方案。END公司介绍:日立科学仪器(北京)有限公司是世界500强日立集团旗下日立高新技术有限公司在北京设立的全资子公司。本公司秉承日立集团的使命、价值观和愿景,始终追寻“简化客户的高科技工艺”的企业理念,通过与客户的协同创新,积极为教育、科研、工业等领域的客户需求提供专业和优质的解决方案。 我们的主要产品包括:各类电子显微镜、原子力显微镜等表面科学仪器和前处理设备,以及各类色谱、光谱、电化学等分析仪器。为了更好地服务于中国广大的日立客户,公司目前在北京、上海、广州、西安、成都、武汉、沈阳等十几个主要城市设立有分公司、办事处或联络处等分支机构,直接为客户提供快速便捷的、专业优质的各类相关技术咨询、应用支持和售后技术服务,从而协助我们的客户实现其目标,共创美好未来。