质谱前处理设备

液相色谱串联质谱技术因其特异性好、灵敏度高、能够同时检测多种待测物，而广受临床认可。但是由于临床样本要进行前处理，目的是为了将目标分析物从生物基质中有选择性地分离出来，减少其他基质组分的干扰，而目前样品制备方法种类较多、步骤复杂且主要依赖人工操作，此环节也是整个质谱检测流程中耗时最长的一环。样品前处理的方法选择、方法开发以及标准化操作等方面存在一定难点，目前尚无相关专业领域指导文件。　　2023年12月，由中国医疗保健国际交流促进会基层检验技术标准化分会、中国医院协会临床检验专业委员会组织起草的《液相色谱‐串联质谱法临床样品前处理专家共识》正式发布，旨在为实验室方法建立提供指导，助力临床质谱检测方法的研发规范发展。　　　　建议1：样品前处理技术人员应经过色谱质谱原理、分析化学和药物分析专业知识、仪器使用及维护、检测项目、标准操作程序(Standard　Operating　Procedure，SOP)等专项培训，考核合格方可上岗。　　建议2：样品前处理方法选择与仪器的灵敏度相关。浓度低或者质谱离子化效率低的化合物，建议采用衍生化的方法提高化合物的离子化效率，或采用灵敏度更高的质谱仪器。　　建议3：实验室应根据待测物的理化性质、生理水平、检测精密度、灵敏度等要求，选择合适的前处理方式和检测仪器，实现可接受的性能要求和临床预期用途。　　建议4：鉴于液质系统对于所使用的常见试剂、流动相化学级别和样本的净化程度要求较高，建议实验室使用HPLC或LC‐MS纯度的试剂，并采用净化程度较高的前处理方法，减少对液质系统的损耗或污染。根据实验室对检测通量的要求，选择经济高效的前处理设备(管式或板式)。　　建议5：待测物浓度高且基质成分简单的体液样本(尿液、泪液、脑脊液等)推荐采用稀释法。　　建议6：对于含有丰富可溶性蛋白的血清、血浆和全血样本，测定小分子化合物时推荐采用蛋白沉淀法。推荐采用酸、金属盐、有机溶剂等作为沉淀剂与样本按一定比例混合，涡旋混匀，离心取上清后上机检测。　　建议7：根据待测物的不同理化性质和极性特征，实验室可以采用适当的萃取方式对待测物和基质其它成分进行分离，并综合干扰物分离难度选择合适的萃取载体，如从常规萃取(干血斑)、液液萃取、固液萃取到固相萃取，样本的净化能力递增。　　建议8：对于有磁珠法试剂盒的检测项目而言，建议在经过实验室性能验证合格后采用。搭配全自动样本前处理系统，将极大地提高样本前处理的自动化水平。　　建议9：在使用超滤法时，应注意超滤的速率。超滤膜的孔径应该低于结合目标化合物的蛋白质的分子量，孔径过大则杂质过高，不能充分分离，孔径过小则有效成分通透率较低，损失较大。超滤过程中，另外，应控制超滤的条件和时间，如生理条件(37℃、pH7.4)和低至中等的离心力。　　建议10：PH值和温度对于结合态激素和游离激素的平衡至关重要，应在合适的pH值和温度下进行透析操作。建议使用生化成分尽可能与血清/血浆离子环境接近的透析缓冲液。实验室应控制适当的缓冲液条件(如37℃、pH7.4)。　　建议11：免疫亲和提取中的亲和柱需要平衡至室温，再进行样本提取 对于超过亲和柱载量的样本，需要减少上样体积进行检测。　　建议12：衍生可以提高待测物稳定性和分析灵敏度，但也有耗时耗力的劣势，实验室应选择合适的衍生试剂和条件，提高检测效率。　　建议13：实验室应注意前处理过程可能产生的挥发性气体、发热、噪音等污染，配备良好的通风、散热或者隔音设备。有条件的实验室可以设置独立的前处理区域，与仪器区分离开，降低对其它仪器和人员的干扰。实验室应对环境中影响检测结果的微生物污染、灰尘、电磁干扰、湿度、供电、温度、声音和振动等进行评估并设定相应要求。

近年来，随着科技的不断进步，质谱技术在生命科学领域中扮演着越来越重要的角色。然而，传统的质谱样本前处理过程中，手工移液操作一直是让人头痛的问题，实验人员需要花费大量时间和精力进行反复操作，这不仅效率低下，还容易导致样本污染和误差累积。此外，技术水平参差不齐和难以复现也是手工移液操作的普遍难题。这些都严重影响了质谱前处理效率和准确性。NEMO全功能移液工作站作为一种自动化移液设备，能够完美地替代传统的手工移液操作。它具有高度精准的液体分配能力、简单易用的软件系统、智能化的样本跟踪系统等功能。通过使用NEMO全功能移液工作站，用户可以实现质谱样本前处理过程的自动化和智能化管理。质谱前处理自动化解决方案汉赞迪NEMO全功能移液工作站配置灵活/移液精准/性能稳定//操作简易/安全防污/用户案例1实验目的：培养基成分及其代谢产物的分析定量前处理方法：样本稀释法（根据检测需求，将样本分别稀释至20倍、1500倍、7500倍、15000倍后进行LC-MS检测）实验流程：配置方案：1、仪器型号：NEMO-15D（15板位，单臂双头）2、移液头：单道1000 μL + 单道50 μL（含液面探测功能）3、适配器：50 mL离心管适配器（2个）1.5/2 mL离心管适配器卧式管盖（2个）色谱进样小瓶适配器（2个）台面布局：检测结果：共检测到49种化合物，移液工作站4次重复的峰面积RSD%＜10%，自动化移液的峰面积大小与手动移液相近，符合标准。用户案例2实验目的：临床血液样本代谢小分子检测前处理方法：液液萃取法实验流程配置方案：1、仪器型号：NEMO-15（15板位，单臂单头）2、移液头：4道1000 μL（含液面探测功能）3、适配器：1.5/2 mL离心管适配器卧式管盖（4个）96采血管适配器（1个）台面布局：总而言之，NEMO全功能移液工作站是一种简单高效、智能便捷的替代手工移液操作的解决方案。它不仅提高了实验室质谱样本前处理效率和准确性，还降低了人力成本和风险。相信随着科技不断发展，在未来更多领域中将会看到NEMO全功能移液工作站带来的革新和变革！

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