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我们 按2010版中国药典做沙门菌检查时,阳性实验做到胆盐硫乳琼脂和麦康凯琼脂上划线,怎么做都没法检出有菌落生长。 后来为了查出原因,我们分别作了几个操作: 1.按药典步骤一步一步进行,先是肉汤,接种了沙门后培养24h后在胆盐硫乳上划线,同时也取肉汤培养物1ml接种至四硫磺酸钠亮绿培养基中,培养24h后在胆盐硫乳和麦康凯琼脂上划线。此实验的结果是,肉汤至胆盐硫乳上划线长出了菌落中心带黑色有的全部黑色的菌落,而由四硫磺酸钠亮绿培养基划线,什么菌落都没长。估计是四硫磺酸钠亮绿培养基出了问题,但是我们不知道问题所在,于是又往下做。 2.按药典现在肉汤中培养后转至四硫磺酸钠亮绿培养基,我们将四硫磺酸钠亮绿培养基的成分一一分开(四硫磺酸钠亮绿培养基是由四硫磺酸钠培养基中添加碘试液和亮绿试液所得,都按药典操作的),也就是,只用四硫磺酸钠培养基、添加了碘试液而未添加亮绿试液的四硫磺酸钠培养基、添加了亮绿而未添加碘试液的四硫磺酸钠培养基以及四硫磺酸钠亮绿培养基,培养24h后在胆盐硫乳和麦康凯上划线,发现四硫磺酸钠培养基和添加了碘试液而未添加亮绿试液的四硫磺酸钠培养基都长出了具有沙门菌特征的菌落,而添加了亮绿而未添加碘试液的四硫磺酸钠培养基和四硫磺酸钠亮绿培养基中未长出任何菌落。 结果显示的是只要培养基中添加了亮绿就没法检出,不知道是不是亮绿出了问题。但是,所有步骤都是按药典中进行的,亮绿试液和碘试液的配制都是的,相当的让人想不通。 究竟药典中设四硫磺酸钠亮绿培养基的意图只是增菌作用,还是也有选择作用,那后便胆盐硫乳和麦康凯不一样能鉴别么,四硫磺酸钠亮绿培养基这一步究竟有多大作用呢,可是药典出来了,又不可能不按其操作,毕竟客户都不明白其中的因果额。 唉~~,所以啊,又得麻烦大家了,有什么见解都给分析一下哈,多多益善,谢谢大家了^^
沙氏琼脂培养基(SDA)用途:用于医药工业洁净室(区)沉降菌的测试(GB/T 16294—2010)用法:取上述成分除琼脂,混合,微热溶解,调节ph值使灭菌后为5.6 ±0.2,假如琼脂,加热融化后,分装,灭菌,冷却至约60℃,在无菌操作要求下倾注约20ml至无菌平皿(¢90mm3 )中。加盖后在室温放至凝固。平皿培养及保存:制备好的培养基平皿宜在2℃-8℃保存,一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期记录的标记。
上周五灭菌的营养琼脂培养基一周天后一瓶长菌了?咋回事?请教高手帮忙。 我按照厂家说明书上要求配置和灭菌,115℃灭菌30分钟,灭菌完后等待冷凝了,放在4℃的冰箱中,每次微波炉加热熔化后使用都废弃,这几次实验时,偶尔出现异常现象,查找污染原因,稀释剂没问题,最后拿剩下的两瓶未使用的培养基直接培养,其中一瓶长菌了,我真不晓得咋回事? 配制培养基那一周做过菌液配制,但是所有的玻璃容器都灭菌的,除了装营养琼脂培养基的瓶子,觉得只是倒培养基,应该不会被菌种污染,所以没有灭菌。一直配营养琼脂培养基的锥形瓶都是这几个瓶子。一直以来我们都是我按照厂家说明书上要求配置和灭菌,115℃灭菌30分钟,灭菌完后等待冷凝了,放在4℃的冰箱中,都没有发生过培养基长菌。