直层流超净工作台

关于超净工作台里有没有必要用酒精灯，一直是许多科研者谈论的火热话题之一。一部分人认为超净工作台里不需要放置酒精灯，大致会有如下一些观点：现在绝大多数细胞培养使用的试剂瓶子，都是塑料制品，经不起灼烧，短暂的过火达不到高温，肯定没有局部消毒的效果，更别说灭菌了；超净台内的气流本来就应该是无菌的，酒精灯的热气流会干扰通风的流动，反而影响超净台本身的层流除菌除尘效果；所谓酒精灯周围是无菌区，是在没有超净台的时候，灼烧能产生上升气流，防止灰尘落入瓶口，但有超净台的时候就没有必要；在正常情况下，快速操作比在酒精灯附近无菌区磨蹭效果更佳；使用酒精灯增加了火灾的隐患；二、支持方理由如下：无菌是分等级的，超净工作台一般可以达到局部百级，不是完全无菌无尘，且紫外线台内不能100%的消灭微生物。而酒精灯周围10cm处可以形成一个天然无菌区，是对局部无菌环境的更进一步保障。酒精灯有上升气流，可以使其附近大约10cm处的范围内，没有灰尘落下，开启的瓶盖放置在此区域，就算是暴露状态下，也不用太担心灰尘掉落的问题。培养的试剂，有时不是一次就用完的，需要放置在非无菌环境的冰箱里保存，这过程难免会导致瓶身、瓶口附近附着细菌、灰尘。尽管带入超净台内都会用酒精喷洒，但酒精仍然无法完全灭菌和除尘。其实细菌自己是不会跑的（跑得太慢了），所以细菌的移动不是随着气流，就随着液流，我们适当灼烧瓶口等有液流的地方，使其干燥，就产生了相当于“局部固定”细菌或灰尘的作用，就减少了它们随液流扩散的可能性。很多单位超净工作台，并没有定期检查维护（达不到国外发达国家的条件），最多也就是定期更换滤网，但是否更换滤网之前，其除菌除尘效果已经早就不达标了也不得知，此时在关键操作环节置于酒精灯附近操作，是更有保障的。超净台内的酒精灯是不会影响超净台的层流除菌除尘效果的，酒精灯局部的气流范围本身是无菌无尘的，那些看不见的被酒精灯“赶跑”的细菌灰尘，会进入附近超净台提供的层流里，被排出工作台外。关于安全问题，酒精灯虽然是明火，正确使用下已经算是很安全的了。不要在酒精瓶身、手套沾有未干的酒精情况下去点灯；不要使酒精灯瓶内的酒精过多或过少；不要使酒精灯倾倒；不要加热易燃易爆炸物品。三、小结，简单来说：酒精灯提供了明火，除了一些干燥、高温的独特作用外，其周围大约10-15cm范围内、可以形成一个无菌区域，此范围下方的超净台面，也不会有灰尘落下。

需要明确了解生物安全柜与通风柜/超净工作台的区分。通风柜和超净工作台不属于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中。 生物安全柜（Biological safety cabinets，BSCs）是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护工作人员、实验室环境以及实验品，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。WHO出版的《实验室生物安全手册》中明确说明：“生物安全柜可以有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交*污染，生物安全柜同时也能保护工作环境”。当然，安全柜有效工作的前提是选购合格的安全柜和正确使用安全柜。 通风柜（通风橱）是为在化学实验过程中清除腐蚀性化学气体和有毒烟雾而设计的。由于没有装备HEPA过滤器，通风柜不能有效清除微生物介质。放置在通风柜内微生物样品会散播到柜外，污染实验室环境。 超净工作台（超净台）是为了保护试验品或产品而设计的，通过吹过工作区域的垂直或水平层流空气防止试验品或产品受到工作区域外粉尘或细菌的污染。一旦微生物样品放置于工作区域，层流空气将把带有微生物介质的空气吹向前台工作人员而产生危险。