红辣椒水份测定仪

苏丹红是一种人工合成的染料，并非食品添加剂，其结构为亲脂性偶氮化合物，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型。如果食品中的苏丹红含量较高，达上千毫克，则苏丹红诱发动物肿瘤的机会就会上百倍增加，特别是苏丹红有些代谢产物是人类可能的致癌物。 早在2003年5月，法国发现从印度进口的红辣椒产品中含有苏丹红Ⅰ号。随后，在欧盟成员国加强检测后，又在包括咖喱粉在内的一系列进口辣椒产品中发现了苏丹红Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号。2005年2月，英国食品标准局在英国&ldquo 第一食品公司&rdquo 制造的伍斯特郡辣酱油使用的辣椒粉中查出了苏丹红Ⅰ号，并于2月下旬，向全球发出十五项安全警告。随后，我国也加强了苏丹红Ⅰ~Ⅳ号的检测工作，发布了《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法》国家标准。 迪马科技一直致力于为食品安全检测提供完善的服务，面对苏丹红事件层出不穷，迪马科技在参考国标的基础上开发出辣椒红色素中苏丹红的检测方法。样品经乙腈两次提取后旋转蒸发至干，正己烷溶解，然后使用ProElut Silica 固相萃取柱进行净化，高效液相色谱法检测。相比较于国标方法前处理过程更加简便，色谱分析条件优化后分析时间更短，10分钟内即可实现四种苏丹红的完全分离。 下面为详细解决方案，敬请参考！ 辣椒红色素中苏丹红的测定 样品准备/提取 称取0.1 g~0.2 g样品于离心管中，加入10 mL乙腈； 涡旋混合5 min，超声提取5 min，6000 rpm下离心3 min，收集上清液； 残渣再用10 mL乙腈提取，每次涡旋混合5 min，超声提取5 min ，6000 rpm下离心3 min；合并两次提取液； 在40 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干，然后用5 mL正己烷溶解，待净化。 2. SPE柱净化&mdash &mdash ProElut Silica 1 g/6 mL（Cat.#：63006） (1)活 化： 10 mL正己烷，流出液弃去； (2)上 样： 将待净化液加入小柱，流出液弃去； (3)洗 脱： 15 mL乙醚：乙腈=1：9洗脱，收集流出液； (4)重新溶解： 在40 ℃下用减压蒸馏将收集的流出液蒸干，然后用乙腈定容至2 mL后供HPLC分析。 3 分析条件 色谱柱： Diamonsil C8(2) 150× 4.6 mm，5 &mu m（Cat.#：99650） 流 速： 1.0 mL/min 检测器： UV：478 nm 柱 温： 30 ℃ 进样量： 20 &mu L 流动相： A：乙腈，B：水 梯度 时间（min） 0 5 5.01 15 A（%） 85 90 85 85 B（%） 15 10 15 15 4 添加回收结果 辣椒油中苏丹红的添加回收结果 目标物 苏丹红Ⅰ 苏丹红Ⅱ 苏丹红Ⅲ 苏丹红Ⅳ 回收率 94.47% 93.44% 90.80% 92.12% 辣椒红色素中苏丹红的测定相关产品信息： 货号 名称 规格 样品前处理 63006 硅胶萃取柱ProElut Silica 1 g/6 mL, 30/pk 244358 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 12位 4803 1,3,6mL柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 37177 针头式过滤器 Nylon 13 mm,0.22 &mu m 100/pk 37180 针头式过滤器 Nylon 13 mm,0.45 &mu m 100/pk 色谱柱及保护柱 99650 反相高效液相色谱柱 Diamonsil C8(2) 150 × 4.6 mm，5 &mu m 6202 EasyGuard C8 保护柱套装 10 × 4.0 1个柱套 + 2个柱芯 标准品 50P-C16986101 苏丹红Ⅰ[842-07-9] 250 mg 50P-C16986102 苏丹红Ⅱ[3118-97-6] 250 mg 50P-C16986103 苏丹红Ⅲ[85-86-9] 250 mg 50P-C16986104 苏丹红Ⅳ[85-83-6] 250 mg HPLC溶剂Ÿ 缓冲盐Ÿ 离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4 L 50115 正己烷 HPLC级 4 L 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50 孔 52401A 瓶架/白色 50孔 5323 样品瓶（棕色/螺纹） 2 mL, 100/pk 5325 样品瓶盖/含垫（已经组装） 100/pk H80465 HPLC 进样针 25 &mu L

利用 Pure C-850 双模式辣椒素纯化分离Pure 应用”1介绍辣椒素主要来源于辣椒属植物，不同种类的辣椒含有不同量的辣椒素，通常辣椒的辣度与其中辣椒素的含量有关。此外，一些其他植物也可能含有少量的辣椒素，例如胡椒、姜等。▲ 辣椒素结构式辣椒素因其抗菌活性可用于生物膜和防污涂料，使其在食品包装、食品保鲜、海洋环境和牙科治疗等方面具有广阔的应用前景。辣椒素在代谢紊乱中也起着至关重要的作用，包括减肥、降压和降低胰岛素的作用。此外，辣椒素通过诱导细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖，对预防肺癌、胃癌、结肠癌和乳腺癌等人类癌症有效。先前的研究还表明辣椒素对缓解疼痛和认知障碍有积极作用。辣椒素是瞬时受体电位香草素 1 型 (TRPV1) 的激动剂，可选择性激活 TRPV1，诱导 Ca2+ 流入和相关的信号通路。最近，肠道菌群也参与了一些疾病的治疗，但其对辣椒素作用的影响仍有待深入研究。在天然辣椒中同时存在辣椒素与二氢辣椒素，用硅胶柱层析或正相薄层色谱法（TLC）等传统方法分离这两个结构相似的化合物十分困难。即使用中压快速制备色谱（FLASH）分离纯辣椒素也非常困难，因此往往需要使用中压制备色谱法和高压制备色谱法进行两步纯化。在本次的应用文章中，我们将会展示如何利用两步分离从红辣椒原料中提取 HPLC 峰面积达 95% 以上的辣椒素。2仪器、耗材与试剂仪器：步琦 Pure C-850 中高压一体纯化分离系统步琦 E-800 索氏萃取系统Agilent 1260 Infinity II 液相色谱分析系统▲ Pure C-850 制备色谱系统▲ E-800 索氏萃取系统耗材：VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mmFlashPure Ecoflex Silica 12gBUCHI PrepPure C18 100 &angst , 10 µ m, 250 x 20 mm试剂与样品：市售红辣椒 10g去离子水 4L乙腈（HPLC 级）4L甲醇（AR 级）4L二氯甲烷（AR 级）4L乙醇（AR 级）1L辣椒素标样 99.5% 100mg3实验部分样品准备：将市售红辣椒皮碾碎成粉状，取 5g 置于 E-800 索氏提取器的萃取腔内，溶剂杯内加入 100mL 乙醇，加热等级设定为 13 级，整个提取过程持续 4 小时，制成辣椒皮萃取液。确认辣椒素峰位置：HPLC 条件色谱柱VisionHT C18 3μm, 150 x 4.6mm流速1.5mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度，6 分钟紫外波长227nm▲ 辣椒素标样出峰图▲ 辣椒皮萃取液出峰图根据辣椒素标样，我们可以确定辣椒素的出峰位置为 3.884 min，通过这一参数我们可以确认之后每一步分离的馏分位置。辣椒素粗分离：色谱条件（C-850 FLASH 模式）色谱柱FlashPure Ecoflex Silica 12g平衡时间6 分钟流速10 mL/min溶剂 A二氯甲烷溶剂 B甲醇梯度10% 等度，40 分钟紫外波长254nm 227nm 280nm检测器灵敏度高上样量600mg 红辣椒皮粉末上样模式干法上样将 600mg 红辣椒皮粉末与 3g 硅胶拌匀，放入干法上样柱内进行上样，在 C-850 的中压模式下进行初步纯化分离。▲ C-850 中压模式下分离红辣椒皮内的化合物根据之前 HPLC 上辣椒素的出峰位置，我们大致判定目标化合物被收集在 9-11 管内，将这几管馏分合并后浓缩，进行 HPLC 检测。▲ 9-11 管馏分并管后 HPLC 检测图通过 HPLC 分离后，可以看到除了 3.882 min 的辣椒素，在 5.365 min 还有一个化合物，这是与辣椒素结构相似的二氢辣椒素。▲ 二氢辣椒素结构式中压模式下的色谱柱填料粒径通常为 30-50μm，很难将辣椒素与二氢辣椒素拆分开，因此我们需要将 C-850 切换至高压模式，利用粒径更小的高压不锈钢色谱柱分离这两个化合物。获取高纯度辣椒素：色谱条件（C-850 高压模式）色谱柱BUCHI PrepPure C18 100 &angst , 10 µ m, 250 x 20 mm平衡时间10 分钟流速15mL/min溶剂 A水溶剂 B乙腈梯度50% 等度，45 分钟紫外波长254nm 227nm 280nm检测器灵敏度高将之前获取的9-11 管馏分浓缩后，在 C-850 的高压模式下进行分离。▲ 样品粗分后 9-11 管馏分高压分离图根据之前 HPLC 的出峰顺序，我们可以推测 21-26 管馏分为辣椒素，31-33 管馏分为二氢辣椒素，取 21-26 管分别进行 HPLC 检测。▲ 高压模式下 21-26 管馏分 HPLC 检测图4结论辣椒皮中含有多种化合物，仅通过柱层析色谱或中压制备色谱很难获得高纯度的单一化合物。步琦 Pure C-850 纯化分离系统支持中压和高压双模式，一台仪器就能完成大量样品的中压粗分富集与高压高纯度纯化，分离天然产物时具有明显的优势。在本次应用中，通过中压和高压的两次分离，最终 24 与 25 管馏分的峰面积能达到 95% 以上，可以进行下一步的生物活性测试。

新疆辣椒可以做成口红？大家是否知道，新疆辣椒不仅口味极佳，还可以做成口红？本期带大家重新了解一下辣椒，一位天然的调色大师。“辣椒” 天然的调色大师辣椒原产于墨西哥及中南美洲，首先开始种植辣椒的是这些土地的原住民——印第安人。明朝末年，辣椒传入中国，开始了大规模的种植与推广，在全国多个省份都被广泛种植。至今，辣椒已经在中国发扬光大，诞生了各种各样不同特性的品种和底蕴深厚的辣味儿美食文化。 目前，中国已成为世界最大的辣椒生产和消费国。2020 年，中国辣椒种植面积约为 81.4 万公顷，产量达 1960 万吨。中国鲜辣椒产量占全球总产量的近 50%，排名第一。而我国的新疆的空气干燥、光照充足、热量丰富，非常适合辣椒的生长。新疆的辣椒具有产量高、个头大、粗纤维、辣味适中、糖分高、口味佳、红色素含量高等优点，干燥少雨的气候条件更是减少了病虫害对辣椒的危害，是很多检疫病害的无疫区；加之土地农药残留少，有害污染物含量低，是绿色有机辣椒生产的理想产区。目前新疆南北都种植了大量各种各样的辣椒，并且大多采用机械化大规模种植，不但提高了效率，更成为当地重要的经济作物，带领当地民众共同致富。也正因为大规模多品种的辣椒种植，新疆也就此孕育了这种神奇的“口红辣椒”：新疆沙湾种植着 10 余种辣椒，其中，板椒的颜色最深，十分适合制成天然的食用色素。这种从板椒中提取的天然色素叫做“辣椒红色素”，目前已经被广泛应用于蛋糕、冰激凌、药物、饮料，甚至口红中。基于实践验证和成分分析，辣椒红色素性状比较稳定，色泽鲜艳，着色性好，最重要的是它安全无毒，同时还具有一定的医疗价值。因此目前辣椒红色素成为人类公认为比较安全的色素。WHO 更是将辣椒红色素列为 A 类色素的行列之中。农业专家介绍，每吨板椒仅能提取四五十公斤色素，“带辣味的辣椒素已经去掉，做口红也不会辣 ”。这样优秀的性状和广泛的应用，让辣椒红色素无愧于“天然调色大师”的称号。将辣椒红色素从板椒中提取出来有多种方法，其中最常用最经典的一种方法，是索氏提取法。在这种方法中，首先要将辣椒去籽、切碎并晒干，这一步有利于后面的进一步处理和仓储、运输。接下来，将处理好的辣椒用稀碱浸泡一段时间除去辣味，经过滤后再用水冲洗至 pH 值到 7 左右，取出辣椒并再次晒干备用。经除辣处理的辣椒用滤纸包好后变可以放入索氏提取设备中，用有机溶剂进行索氏提取（许多种类的有机溶剂都可以提取辣椒红色素，包括乙醇、丁烷、丙酮等）。取索氏提取后的提取液，加入到旋转蒸发仪或平行浓缩仪中进行浓缩处理，再将浓缩液加热烘干，便可以得到辣椒红色素的粗产品。对于辣椒红色素或其他天然产物的提取和分析来说，萃取都是至关重要的一步。这不但对萃取设备的快速、高效提出了很高的要求；同时也要求萃取设备可以满足各种不同的实验条件——以辣椒红色素的提取为例，辣椒红色素可以被多种有机溶剂萃取，而具体选择哪一种溶剂则取决于实验人员对最终提取的辣椒红色素性状的不同要求，这就需要萃取设备可以同时支持多种溶剂的使用。对于其他各类天然产物来说，萃取设备可以随时根据分析物的不同提供合适的温度、压力更是尤为关键。固液萃取仪 E-800步琦公司的全自动化六位一体固液萃取仪 E-800 便是这样一款优秀的全自动固液萃取仪。E-800 功能强大，适合各种高要求的萃取任务，提供 6 个独立的萃取位置，可以实现单独过程控制，也可同时运行不同的萃取方法，实现快速、高效、可重现的萃取过程。分析物保护功能可始终保证烧杯中只剩下极少量的溶剂，从而实现最佳的分析物回收率。全频固液萃取仪 E-800 在所有流程步骤中防止热敏分析物的变质和降解，确保萃取物浓缩的安全性和可复现性。在全频固液萃取仪 E-800 中，所有接触样品和溶剂的组件均完全由惰性材料制成。我们的系统可消除浸出材料造成的样品污染和任何记忆效应风险。所有流程步骤（萃取、冲洗、干燥）中均可选择惰性气体供应，保护分析物免受氧化。一旦触发分析物保护传感器，会自动打开惰性气体。大型冷凝器可高效捕获蒸汽，确保最高的溶剂回收率 ( 90%)，即使是蒸发性溶剂。消除任何蒸汽排放，并允许在通风橱外运行。整个萃取过程完全可见。玻璃组件可轻松取放和拆卸，以便进行清洁和放入烘箱中去除污染物（在 +450°C 温度下烘烤）。快速溶剂萃取仪 E-916而步琦的另一款萃取设备——快速溶剂萃取仪 E-916，则实现了最快速度和最大样品处理量的完美结合。快速溶剂萃取仪 E-916 在高温（30-200℃）和高压（50-150bar）条件下进行萃取，结合了快速和大量的特点，是快速加压溶剂萃取 (PSE) 的最佳解决方案。通过并行处理更多样品、轻松加载样品和快速收集萃取物，可以大幅提高生产率，对非常注重效率和节约时间的客户十分友好。可以广泛应用于环境样品、食品、聚合物和天然产品的萃取。萃取辣椒红色素等天然产物往往需要使用大量的溶剂，因此在烘干处理前需要对萃取液进行浓缩处理。步琦不仅可以提供快速高效的旋转蒸发仪，还可以提供同时处理多个平行样品的平行浓缩仪。旋转蒸发仪 R-300步琦作为旋转蒸发仪这一种仪器的全球首个发明者，多年来在旋转蒸发仪领域积累了大量技术和经验，可以提供十分方便、高效的旋转蒸发仪；同时又能在操作使用、设置参数、制作工艺等层面上与步琦的萃取设备完美配合使用。步琦的旋转蒸发仪 R-300 可以适配从 50mL 到 5000mL 不同尺寸的蒸发瓶，温度范围可从 20 ℃ 到220 ℃。通过优化系统参数，旋转蒸发仪 R-300 的《智能蒸馏》可实现自动化、无人值守的过程。用户可以灵活地将自己的 SOP 编程到系统中，然后通过应用程序远程监控蒸馏。智能自助工具 BUCHI 云服务可显著最大化系统运行时间，只需按下按钮即可免费更新。而旋转蒸发仪 R-300 的模块化设计通过高度的系统灵活性帮助满足您在旋转蒸发方面的个体需求。得益于广泛多样的系统附件、玻璃件和通过移动设备远程监控流程的选项，用户能够自定义蒸馏过程以满足独特需求。平行浓缩仪 SyncorePlus而当实验人员需要同步处理多个样品时，例如从几个不同种类的辣椒中提取色素以进行对比，步琦的平行浓缩仪 SyncorePlus 便可以更好地胜任这类工作。步琦的平行蒸发仪器以两种配置提供同步处理样品解决方案：作为分析前的步骤，平行浓缩仪 SyncorePlus Analyst 可将样品蒸发到指定的体积（0.3 mL、1.0 mL、3.0 mL等）。平行浓缩仪 SyncorePlus Polyvap 使样品处理量达到最高，最多可以同时处理 96 个样品。平行浓缩仪 SyncorePlus 可完全自动化操作且易于使用，让您能够以最小的监督处理平行蒸发，同时继续执行其他任务。过程自动化可确保我们的同步处理样品解决方案具有最高的分析精度和安全标准。通过真空涡旋蒸发执行快速而温和的蒸发过程，即使在使用高沸点溶剂（例如水、DMSO 或 DMF）时，也能保护挥发性和热敏感性分析物。通过降低压力来降低沸点，可以提高效率。同时，平行浓缩仪 SyncorePlus 可以与快速溶剂萃取仪 E-916 实现完美的配合。当更换下一批样品进行萃取时，平行蒸发和浓缩处理协同进行，实现互补的工作流程。使用带尾管的收集容器，从而无需转移萃取物。通过减少溶剂消耗，使得消耗品需要量很少，大大降低了运行成本。“到处皆诗境，随时有物华”，大自然中处处都是宝藏，许多天然产物都有极大的作用。无论是辣椒红色素，还是中药材等其他天然产物，都是大自然赋予人类的宝贵馈赠，在众多实验人员和劳动者的努力下更好地为我们所合理利用。 步琦作为实验室前处理设备领域的专家，愿持续提供更高效、更便捷、更人性化、更环保的解决方案，助力各类天然产物的提取与分析，助力一个更美好的未来。